توضیحات
معرفی کیت رنگ آمیزی زیل نلسون
kit for the Microscopic Investigation of Mycobacteria
جهت رنگ آمیزی و باکتری های مقاوم به رنگ آمیزی گرم نظیر مایکوباکتریوم مایکوباکتریوم توبرکلوزیس و مایکوباکتریوم لپره، شرکت توسعه سلامت توان آفرین (تستا)، کیت رنگ آمیزی زیل نلسون معرفی و عرضه می نماید.برای خرید ست رنگ آمیزی اسید فست روز آزمون در تستا شاپ ثبت سفارش نمایید.
فروش کیت رنگ آمیزی زیل نلسون برند روز آزمون
کاربرد: جهت رنگ آمیزی و تشخیص باکتری های مقاوم به رنگ آمیزی گرم.
مواد مصرفی، فراورده های آزمایشگاهی و انواع کیت های آزمایشگاهی و کیت های تشخیص سریع در تستا
برند: روز آزمون (فارا)
محتویات: ۴ ویال ۱۰۰ میلی لیتری
قیمت:۲۳۰,۰۰۰ تومان
فهرست مطالب
باکتری اسید فست چیست؟
باکتریهایی هستند که در برابر رنگآمیزی گرم، تغییر رنگ نمی دهند و احتمالاً علت آن به جهت نفوذ پذیری انتخابی دیواره سلولی باکتری است. مایکوباکتری ها در بافت شناسی مشکل دارند زیرا نفوذ به رنگ ها در این میکروارگانیسم ها به دلیل مقاومت آن ها دشوار است. در واقع رنگ آمیزی Ziehl-Neelsen یک روش رنگ آمیزی برای برجسته کردن باسیل مقاوم به اسید الکلی (AARB) است.
به کیت رنگ آمیزی زیل نلسون، کیت رنگ آمیزی AFB-Color نیز می گویند، چرا که برای بررسی میکروسکوپی باکتری های اسید فست (AFB= Acid fast bacteria) استفاده می شود.
در دیواره سلولی این نوع باکتری ها ماده مومی شکل وجود دارد که آن ها را در برابر اسید الکل موجود در رنگ آمیزی مقاوم میسازد. برای مثال میتوان مایکوباکتریوم ها (توبرکلوزیس و لپره) و نوکاردیاها را نام برد.
ابتدا اسمیر سلولها را توسط کربول فوچسین پوشانده و با حمام بخار حرارت میدهند. بهدنبال آن بیرنگ کردن توسط اسید – الکل انجام شده و سپس رنگ متضاد (سبز یا آبی) اضافه میشود. باکتریهای اسید فاست (مایکوباکتریومها و برخی از اکتینومایسسهای وابسته) به صورت قرمز در میآیند و بقیه رنگ متضاد را میگیرند.
توضیح بیشتر در خصوص رنگ آمیزی گرم
روش لکه Ziehl-Neelsen
مراحل رنگ آمیزی زیل نلسون
شامل ۳ مرحله است:
گام اول: استفاده از یک رنگ پر انرژی .
مرحله دوم: تغییر رنگ پی در پی با یک اسید قوی و سپس با الکل در ۹۰ °C.
مرحله سوم: رنگ آمیزی کنتراست.
روش انجام رنگ آمیزی اسید فست
- فیکس کردن لام ها: برای فیکس کردن نمونه بر روی لام دو راه وجود دارد:
- استفاده از حرارت
- استفاده از فورر به مدت حداقل ۱۰ دقیقه و در دمای ۶۰ درجه سانتی گراد. استفده از رنگ فوچسین: روی لام را با رنگ کربول فوچسین (فوچسین بازی) آغشته کرده و کاملاً پخش می کنیم.
- حرارت دادن لام: با استفاده از پنبه اغشته با الکل سطح زیری لام را حرارت میدهیم. (حرارت دادن را تا زمانی ادامه پیدا میکند که بخار از روی لام متصاعد شود.)
- نکته: در صورت پاک شدن رنگ از روی لام، آن را دوباره با رنگ بپوشانید. دقت کنید حرارت به مدت طولانی موجب رسول در سطح لام و نتیجه کاذب می گردد. (علت حرارت در رنگ آمیزی ذیل نلسون این است که از انجا که دیواره TB بسیار لیپیدی است رنگ نمیتواند وارد دیواره باسیل شود بنابراین با حرارت، نفوذ رنگ به داخل باسیلل ها را افزایش میدهیم.)
- وقفه ۵ دقیقه ای: بعد از حرارت لام را در هوای ازاد اتاق قرار دهید تا رنگ آمیزی کامل گردد.
- شستشو: لام را با آب معمولی شستشوی می دهیم و آب گیری می کنیم.
- رنگ بری: سپس با اسید الکل ۳٪ رنگ بری به مدت ۳ تا ۴ دقیقه انجام میدهیم. از آنجا که رنگ دیواره باسیل ها شسته نمی شود، رنگ قرمر کربول فوچسین را در خود نگه می دارد و سایر قسمت های لام پاک می شود.
- افزایش کنتراست: در انتها توسط یک رنگ زمینهای مانند متیلین بلو یا مالاشیت سبز استفاده می شود تا کنتراست و وضوح بیشتری پیدا کند.
- استفاده از میکروسکوپ: لامها را پس از خشک کردن در زیر میکروسکوپ با عدسی ۱۰۰ بررسی می نماییم.
کاربرد کیت رنگ آمیزی زیل نلسون
- ست رنگ آمیزی اسید فست روز آزمون در موارد زیر کاربرد دارد:
- در موارد مشکوک به عفونت سل.
- شناسایی مایکوباکتریوم توبرکلوزیس.
- شناسای مایکوباکتریوم لپرا.
- شناسایی مایکوباکتریایی غیر معمول در افراد مبتلا به ایدز (باسیل منحنی و مهره) مورد نیاز است.
- تفکیک باکتری اسید فست از غیر آن.
- شناسایی برخی از گونه های قارچ مانند کریپتوسپوریدیوم.
نمونه باکتری های رنگ آمیزی شده
در تصویر میکروسکوپی زیر باکتری های اسید سریع توسط کیت رنگ آمیزی زیل نلسون رنگ آمیزی و به تصیویر کشیده شده است. تستا، مشاهده تصاویر میکروسکوپی باکتری ایکولای توصیه می نماید.
روش رنگآمیزی: Ziehl–Neelsen
تصویر۱: نوع نمونه های مدفوع – فلش روی تصویر نتیجه مثبت وجود باکتری است.
تصویر۲: نوع نمونه شیر – لکه های قرمز رنگ باسیل مقاوم در برابر اسید و نتیجه مثتب را نشان می دهد.
تصویر۳: نوع نمونه غذذ لنفاوی – فلش ها تعداد زیادی باسیل اسیدی فست را نمایش می دهد.
تصویر۴: نوع نمونه اسمیرهای گرفته شده از یک کلنی خالص – تعداد زیادی باسیل اسید فست خوشه ای مشاهده می گردد.
مشخصات ست رنگ آمیزی اسید فست روز آزمون
کیت رنگ آمیزی زیل نلسون Tb-color
kit for the Microscopic Investigation of Mycobacteria
کیت رنگ آمیزی زیل نلسون تولید شرکت فن آوری روزآزمون می باشد و تمام مراحل تولید و کنترل کیفی مطابق دستورالعملهای ISO 13485 انجام می پذیرد .
تکنیک Tb-color
Tb-color یک رنگ آمیزی اصلاح شده Ziehl-Neelsen را ارائه می دهد که بدون گرمایش کار می کند و می تواند در بررسی سل از طریق اسمیر خلط استفاده شود. در این رنگ آمیزی باسیل سل به رنگ قرمز دز زمینه آبی در تصاویر میکروسکوپی قابل مشاهده است. (همچنین به عنوان روش Kinyoun شناخته می شود).
از مزایای این مجموعه آن است که به گونه ای اصلاح شده تا نیازی به گرم کردن محلول کاربولوچسین نباشد، در نتیجه از انتشار بخارات فنل بالقوه خطرناک جلوگیری می شود.
پس از رنگ امیزی، مایکوباکتری های مقاوم به اسید حتی پس از درمان با محلول های رنگ زدایی قوی مانند HCL-ethanol رنگ خود را حفظ می کنند. آن ها پس از ضد عفونی با مالاکیت سبز قرمز باقی می مانند، در حالی که میکروارگانیسم هایی که مستعد اسید هستند، لکه سبز را می گیرند.
کیت رنگ آمیزی زیل نلسون روز آزمون از ۴ معرف ۱۰۰ میلی لیتری تشکیل شده و برای انجام ۱۰۰ تست کفایت می کند.
محتویات ست رنگ آمیزی اسید فست روز آزمون
معرف | نوع معرف | تعداد | حجم |
معرف ۱ | فوشین فنیکه | ۲ | ۱۰۰CC |
معرف ۲ | اسید الکل | ۱ | ۱۰۰CC |
معرف ۳ | متیلن بلو | ۱ | ۱۰۰CC |
نکات احتیاطی در استفاده از کیت کیت رنگ آمیزی زیل نلسون
با توجه معرف های شیمیایی موجود در این کیت لازم است به نکات احتیاطی زیر توجه شود.
- استفاده از دستکش محافظ، لباس محافظ، محافظ چشم و صورت در حین آزمایش لازم است.
- توجه نمایید که برخی مایعات محتویات کیت تا حدودی خطراتی نظیر: قابل اشتعال، قابلیت خورندگی فلزات، تولید بخارات سمی و … را دارند و باید با احتیاط با آن برخورد شود.
- در صورت که پوست (یا مو) به این مواد آلوده شود، لازم است با آب شستشو داده شود.
- در صورت استنشاق بخارات سمی، سریعاً فرد آلود را از محیط خارج و به هوای آزاد منتقل نمایید و در صورت لزوم مراقبت های پزشکی اعمال گردد.
- در صورت ورود این مواد با چشم، چند دقیقه با احتیاط با آب بشویید.
- بهتر است هنگام آزمایش لنز به چشم نداشته باشید.
جهت رنگ آمیزی Tb-color، استفاده از کیت رنگ آمیزی زیل نلسون توصیه می گردد.
تستا عرضه کننده انواع کیت های آزمایشگاهی و لوازم مصرفی آزمایشگاهی و ست رنگ آمیزی اسید فست روز آزمون.
کامکار –
سلام
شیوه های رنگ آمیزی در این سایت خیلی خوب و جامع معرفی شده است.
واقعا جای تقدیر دارد.