الایزا
کیت های بیوشیمی
کیت های مولکولی و سایر
کیت های دامپزشکی
کیت های زیبایی
تجهیزات آزمایشگاهی
کیت های تشخیص سریع
مصرفی
کیت سنجش TSH (96 تستی) الایزا
1,256,000 تومان
فهرست مطالب
مقدمه:
کیت سنجش TSH (96 تستی) الایزا – TSH هورمونی گلیکوپروتئینی با وزن مولکولی ۲۶۶۰۰ دالتون است که از بخش قدامی غده هیپوفیز ترشح می‌شود و از دو زیرواحد، آلفا و بتای اختصاصی، تشکیل شده است. زیرواحد آلفا شبیه زیرواحد آلفای هورمون‌های گلیکوپروتئینی LH، FSH و hCG می‌باشد. ترشح TSH توسط هورمون آزادکننده TRH تحریک می‌گردد که این هورمون آزادکننده خود از هیپوتالاموس ترشح می‌شود. TSH با اثر بر غده تیروئید، موجب سنتز و ترشح هورمون‌های تیروئیدی (شامل T3 و T4) می‌گردد.
ترشح هورمون TSH توسط میزان هورمون‌های تیروئیدی آزاد موجود در خون از طریق فیدبک منفی تنظیم می‌شود. سنجش میزان TSH جهت بررسی و تشخیص اختلالات غده تیروئید و همچنین بررسی محور هیپوتالاموس-هیپوفیز حائز اهمیت است. کیت حاضر، قابلیت اندازه‌گیری و تیتراسیون هورمون TSH را با حساسیت و اختصاصیت بسیار بالا دارا می‌باشد.
اساس آزمایش:
اساس این کیت بر روش ساندویچ و با استفاده از آنتی‌بادی‌های مونوکلونال است. در این روش، چاهک‌ها توسط آنتی‌بادی‌هایی علیه یک اپی‌توپ آنتی‌ژنی از زیرواحد بتای مولکول TSH پوشش داده می‌شوند (Coating). نمونه بیماران با آنتی‌بادی پوشش‌داده‌شده در ته چاهک‌ها مجاور می‌شود. سپس آنتی‌بادی ثانویه ضد TSH که به آنزیم HRP متصل است به چاهک‌ها اضافه می‌گردد.
مقدار کمپلکس ایمنی تشکیل‌شده در چاهک‌ها با غلظت TSH در نمونه‌ها متناسب است. پس از شستشو، محلول رنگزا که حاوی هیدروژن پراکسید (H₂O₂) و کروموژن است به چاهک‌ها افزوده می‌شود. رنگ آبی حاصل، با کمپلکس ایمنی تشکیل‌شده در چاهک‌ها متناسب است. با افزودن محلول متوقف‌کننده، رنگ آبی به زرد تبدیل می‌شود که بیشترین جذب نوری را در طول موج ۴۵۰ نانومتر دارد.
محتویات کیت:
یک پلیت ۹۶ خانه حاوی چاهک‌های پوشش داده شده با آنتی‌بادی ضد TSH
(Plate Coated TSH-Anti)محلول آنزیم کونژوگه
(Conjugate Enzyme TSH):
یک ویال حاوی ۱۲ میلی‌لیتر (آماده مصرف)سری استانداردها (Set Standards):
شامل ۶ ویال استاندارد با غلظت‌های ۰، ۰.۵، ۲.۵، ۵، ۱۵ و ۳۰ mIU/L
(استاندارد صفر: ۲ میلی‌لیتر، سایر استانداردها: ۱ میلی‌لیتر)
کالیبره شده بر اساس استانداردهای WHO IRP 80/558سرم کنترل (Serum Control):
یک ویال حاوی ۱ میلی‌لیتر با غلظت مشخص (درج‌شده روی برچسب ویال)محلول رنگزای یک‌مرحله‌ای (Substrate-Chromogen):
یک ویال حاوی ۱۲ میلی‌لیتر (آماده مصرف)محلول شستشو (Wash Solution):
یک ویال حاوی ۵۰ میلی‌لیتر محلول شستشوی غلیظ (×۲۰)
برای تهیه محلول آماده، با نسبت ۱ به ۲۰ با آب مقطر رقیق گردد.محلول متوقف‌کننده (Stop Solution):
یک ویال حاوی ۱۲ میلیلیتربرچسب مخصوص پلیت
مواد و وسایل مورد نیاز که در کیت موجود نمی‌باشند:
دستگاه الایزاریدر با طول موج ۴۵۰ نانومتر و در صورت امکان ۶۳۰ نانومتر
سمپلرهای دقیق ۵۰ و ۱۰۰ میکرولیتر
آب مقطر
نکات قابل توجه برای مصرف‌کنندگان:
محتویات این کیت فقط برای استفاده در همین کیت طراحی شده‌اند.
از مخلوط کردن محتویات کیت‌هایی با شماره ساخت مختلف جداً خودداری نمایید.
کلیه مواد سرمی موجود در کیت از نظر HBsAg و آنتی‌بادی‌های ضد HCV و HIV کنترل شده‌اند و عاری از این عوامل می‌باشند. با این حال، جهت ایمنی، باید از تماس مستقیم با این مواد پرهیز شود.
جدول اطلاعات کیت TSH
| بخش | محتوا / توضیحات |
|---|---|
| نام کیت | کیت الایزا TSH |
| کاربرد | اندازه‌گیری سطح TSH برای بررسی عملکرد تیروئید |
| نوع کیت | ایمنواسی ساندویچ با آنتی‌بادی‌های مونوکلونال |
| محدوده اندازه‌گیری استانداردها | ۰، ۰.۵، ۲.۵، ۵، ۱۵ و ۳۰ mIU/L |
| اجزای کیت | ۱. پلیت ۹۶ خانه پوشش‌داده‌شده با آنتی‌بادی TSH ۲. محلول آنزیم کونژوگه (۱۲ میلی‌لیتر) ۳. شش ویال استاندارد با حجم‌های مختلف ۴. یک ویال سرم کنترل (۱ میلی‌لیتر) ۵. محلول رنگزا (۱۲ میلی‌لیتر) ۶. محلول شستشوی غلیظ (۵۰ میلی‌لیتر، ×۲۰) ۷. محلول متوقف‌کننده (۱۲ میلی‌لیتر) ۸. برچسب مخصوص پلیت |
| مواد مورد نیاز خارج از کیت | دستگاه الایزاریدر (۴۵۰ نانومتر)، سمپلر ۵۰ و ۱۰۰ µL، آب مقطر |
| شرایط نگهداری کیت | دمای ۲–۸ درجه سانتی‌گراد، پلیت در کیسه با نم‌گیر، عدم انجماد و ذوب مکرر |
| نگهداری نمونه‌ها | در دمای ۲–۸ درجه تا ۲ روز، یا -۲۰ درجه تا ۳۰ روز |
| ویژگی‌های آنالیت TSH | گلیکوپروتئین با وزن مولکولی ۲۶۶۰۰ دالتون، دارای دو زیرواحد آلفا و بتا |
| منبع تنظیم ترشح | TRH از هیپوتالاموس ← تحریک هیپوفیز برای ترشح TSH ← تحریک تیروئید برای تولید T3 و T4 |
| کنترل فیدبک | توسط سطح T3 و T4 آزاد در خون |
| زمان انکوباسیون اصلی | ۶۰ دقیقه (پس از افزودن نمونه و کونژوگه) |
| زمان انکوباسیون رنگ | ۱۵ دقیقه (در تاریکی) |
| خوانش نهایی | طول موج ۴۵۰ نانومتر (مرجع: ۶۳۰ نانومتر) |
| روش محاسبه نتایج | با استفاده از منحنی استاندارد رسم‌شده از جذب نوری استانداردها و تطابق جذب نمونه‌ها با آن |
شرایط نگهداری:
کیت را در دمای ۲ تا ۸ درجه سانتی‌گراد در یخچال نگهداری نمایید.
چاهک‌ها را در کیسه مخصوص پلیت به همراه نم‌گیر نگهداری نمایید.
پایداری محتویات کیت تا پایان تاریخ انقضای درج‌شده روی هر یک از اقلام معتبر است.
محلول شستشوی آماده مصرف (رقیق‌شده با آب مقطر) به مدت یک هفته در دمای ۲–۸ درجه سانتی‌گراد قابل استفاده است.
جمع‌آوری و آماده‌سازی نمونه:
از سرم یا پلاسما می‌توان پس از جداسازی از خون استفاده کرد. نمونه را می‌توان تا دو روز در دمای ۲–۸ درجه و برای مدت زمان طولانی‌تر (تا ۳۰ روز) در دمای ۲۰- درجه سانتی‌گراد نگهداری نمود.
(از انجماد و ذوب مکرر نمونه باید پرهیز شود.)
توضیحات عمومی:
قبل از شروع آزمایش، تمام مواد و نمونه‌ها را به دمای اتاق رسانده و به‌خوبی مخلوط نمایید.
بهتر است آزمایش بدون وقفه انجام شود.
برای هر نمونه، از نوک سمپلر یک‌بارمصرف استفاده کنید.
پس از افزودن محلول متوقف‌کننده، حداکثر تا نیم ساعت خوانش جذب نوری انجام شود.
شستشوی کامل چاهک‌ها اهمیت زیادی دارد؛ آخرین قطرات نیز باید خارج شوند.
زمان انکوباسیون از عوامل مهم در نتیجه صحیح آزمایش است. پیش از شروع، کلیه مواد مورد نیاز را آماده کرده و درب محلول‌ها را باز نمایید.
توصیه می‌شود تعداد تست‌های هم‌زمان محدود باشد و زمان افزودن نمونه‌ها از ۵ دقیقه بیشتر نشود.
مراحل انجام آزمایش:
چاهک‌های مورد نظر را انتخاب نموده و بقیه را با نم‌گیر داخل کیسه مخصوص پلیت قرار دهید.
۵۰ میکرولیتر از هر استاندارد، سرم کنترل، و نمونه را به چاهک مربوطه اضافه کنید. توصیه می‌شود هر نمونه و استاندارد در دو چاهک (داپلیکیت) اجرا شود و میانگین جذب برای محاسبه استفاده گردد.
۱۰۰ میکرولیتر محلول آنزیم کونژوگه را به هر چاهک اضافه نموده و پلیت را ۱۵ ثانیه به‌آرامی تکان دهید.
چاهک‌ها را با برچسب مخصوص پوشانده و به مدت ۶۰ دقیقه در دمای اتاق (۲۲ تا ۲۸ درجه) انکوبه نمایید.
محتویات چاهک‌ها را تخلیه و هر چاهک را ۵ بار با محلول شستشوی آماده بشویید. در هر بار شستشو، حدود ۳۰۰ میکرولیتر محلول ریخته، سپس چاهک‌ها را وارونه کرده و روی پارچه یا کاغذ نم‌گیر چند ضربه بزنید.
۱۰۰ میکرولیتر محلول رنگزا را به هر چاهک اضافه نمایید.
چاهک‌ها را به مدت ۱۵ دقیقه در دمای اتاق و در تاریکی انکوبه نمایید.
با افزودن ۱۰۰ میکرولیتر محلول متوقف‌کننده به هر چاهک، واکنش آنزیمی را متوقف نمایید. جذب نوری را با دستگاه الایزاریدر در ۴۵۰ نانومتر (و در صورت امکان ۶۳۰ نانومتر برای فیلتر مرجع) بخوانید.
محاسبه نتایج:
جذب نوری استانداردها و نمونه‌ها را با دستگاه در طول موج ۴۵۰ نانومتر بخوانید.
منحنی استاندارد را بر اساس مقادیر جذب نوری (محور Y) و غلظت‌ها (محور X) رسم نمایید (روش نقطه به نقطه).
میانگین جذب نوری هر نمونه را روی محور Y مشخص نموده، خطی عمود به منحنی بکشید تا بر آن مماس شود. سپس از محل تماس، خطی عمود بر محور X رسم کرده و مقدار غلظت را تعیین نمایید.
تستا عرضه کننده
کیت سنجش TSH (96 تستی) الایزا
- اطلاعات کارشناسان تستا
- کاتالوگ محصول
دیدگاهها
هیچ دیدگاهی برای این محصول نوشته نشده است.