محیط کشت BHI آگار 1

محیط کشت آگار انفوزیون مغز و قلب (BHI Agar)

محیط کشت Brain Heart Infusion Agar یک محیط همه‌فن‌حریف و با ارزش غذایی بالا است که از ترکیب عصاره مغز گاو (Brain Infusion) و عصاره قلب گاو (Heart Infusion) به همراه پپتون و دکستروز ساخته می‌شود. این ترکیب منبع غنی از اسیدهای آمینه، پپتیدها، نوکلئوتیدها، ویتامین‌ها (به ویژه گروه B) و مواد معدنی ضروری را فراهم می‌کند که برای رشد حتی سخت‌پرورترین میکروارگانیسم‌ها کافی است. دکستروز به عنوان یک منبع انرژی سریع‌التجزیه عمل می‌کند. این محیط به دلیل غنای بالا، اغلب به عنوان محیط پایه برای تهیه محیط‌های خوندار (با افزودن خون) یا محیط‌های انتخابی (با افزودن آنتی‌بیوتیک) مورد استفاده قرار می‌گیرد.

کاربردهای اصلی BHI Agar شامل: کشت و نگهداری سویه‌های استاندارد باکتریایی و قارچی، کشت نمونه‌های بالینی پیچیده (مانند خون، مایع مغزی-نخاعی، بافت)، مطالعه میکروارگانیسم‌های بی‌هوازی (در ترکیب با تکنیک‌های بی‌هوازی)، کشت قارچ‌های بیماری‌زا (مانند Candida، Cryptococcus)، و نیز استفاده در تست‌های حساسیت آنتی‌بیوتیکی برای برخی پاتوژن‌های خاص است. این محیط به دلیل پشتیبانی از رشد خوب و تولید اسپور باکتری‌هایی مانند Bacillus و Clostridium نیز شناخته شده است.

مشخصات کلیدی

• نوع محیط: جامد (آگار)، عمومی/غنی (All Purpose/Enriched)
• هدف کشت: کشت طیف وسیعی از باکتری‌ها (از جمله سخت‌پرورها)، قارچ‌ها و مخمرها
• حالت فیزیکی: پودر (تهیه شده در آب مقطر، حرارت داده شده تا حل شود و سپس اتوکلاو)
• ترکیبات کلیدی: عصاره مغز گاو، عصاره قلب گاو، پپتون، دکستروز (گلوکز)، سدیم کلرید، دی‌پتاسیم فسفات، آگار
• شرایط کشت: محیط در پلیت‌ها یا لوله‌ها ریخته و سفت می‌شود. کشت می‌تواند سطحی، عمقی یا خطی باشد.
• شرایط انکوباسیون: بسته به میکروارگانیسم هدف: معمولاً ۳۵-۳۷ درجه سانتی‌گراد برای باکتری‌ها به مدت ۱۸-۲۴ ساعت (گاهی تا ۴۸ ساعت)، ۲۵-۳۰ درجه سانتی‌گراد برای قارچ‌ها به مدت ۲-۷ روز. شرایط اتمسفر می‌تواند هوازی، بی‌هوازی یا همراه با CO2 افزایش یافته باشد.
• خوانش نتیجه: ارزیابی بر اساس وجود یا عدم رشد، مورفولوژی کلونی (اندازه، شکل، رنگ، شفافیت) و گاهی ویژگی‌های خاص (مانند تولید رنگ‌دانه).
• کنترل کیفیت: رشد عالی و تشکیل کلونی‌های فراوان توسط باکتری‌های سخت‌پرور مانند Streptococcus pneumoniae (ATCC 6305) و قارچ‌هایی مانند Candida albicans (ATCC 10231).
• کاربرد اصلی: محیط پایه چندمنظوره در تحقیقات میکروبیولوژی، کنترل کیفیت، کشت نمونه‌های بالینی و نگهداری کلکسیون‌های میکروبی.

نکات کاربردی و نگهداری

پودر Brain Heart Infusion Agar باید در جای خشک و خنک نگهداری شود. تهیه محیط ساده است، اما به دلیل وجود دکستروز، باید از اتوکلاو طولانی یا دمای بیش از حد جلوگیری کرد تا از قهوه‌ای شدن (کاراملیزاسیون) محیط جلوگیری شود. پلیت‌های آماده شده را می‌توان در دمای ۲ تا ۸ درجه سانتی‌گراد و در کیسه‌های پلاستیکی بسته برای جلوگیری از خشک شدن به مدت چند هفته نگهداری کرد. قبل از استفاده، پلیت‌ها باید به دمای اتاق برسند. برای کشت نمونه‌های بالینی استریل (مانند خون یا CSF)، محیط اغلب به صورت بطری‌های کوچک حاوی محیط شیب‌دار (BHI Slant) استفاده می‌شود. برای کشت بی‌هوازی، می‌توان از محیط عمقی در لوله‌های بلند استفاده کرد. از آنجایی که این محیط غیرانتخابی است، در صورت کشت نمونه‌های غیراستریل (مانند سواپ گلو)، ممکن است رشد بیش از حد فلور طبیعی رخ دهد. برای اهداف خاص، می‌توان آنتی‌بیوتیک‌ها (مانند کلرامفنیکل، جنتامایسین) یا ضدقارچ‌ها (مانند سیکلوهگزیمید) به آن اضافه کرد. این محیط برای کشت ویروس‌ها یا انگل‌ها مناسب نیست. در تست‌های حساسیت آنتی‌بیوتیکی، باید از دستورالعمل‌های استاندارد برای آماده‌سازی محیط مطابق با دستور کار آزمایش پیروی کرد.