محیط کشت D E نوترالایزینگ براث

محیط کشت مایع خنثی‌کننده (D & E Neutralizing Broth)

محیط کشت D & E Neutralizing Broth نسخه مایع محیط آگار خنثی‌کننده است که با حذف آگار، امکان انجام تست‌های غوطه‌وری، ریکاوری در حجم‌های بیشتر و انکوباسیون مایع را فراهم می‌کند. این محیط حاوی منابع تغذیه‌ای غنی (پپتون، عصاره مخمر و عصاره گوشت) همراه با عوامل خنثی‌کننده اختصاصی شامل لسیتین، پلی‌سوربات ۸۰ و هیستیدین است. این ترکیبات به طور موثر باقیمانده طیف وسیعی از مواد ضد میکروبی مانند ترکیبات آمونیوم چهارتایی (Quaternary Ammonium Compounds)، فنول‌ها، کلر، یدوفورها و آلدهیدها را خنثی می‌کنند و از مهار کاذب رشد میکروارگانیسم‌های زنده در طول فرآیند کشت جلوگیری می‌نمایند.

کاربرد اصلی این محیط در آزمون‌های بازیابی (Recovery Tests) و اعتبارسنجی روش‌های ضدعفونی در صنایع داروسازی (مطابق الزامات فارماکوپیایی مانند USP و EP)، صنایع غذایی، مراکز بهداشتی-درمانی و تولید تجهیزات پزشکی است. به ویژه برای تست غوطه‌وری وسایل، رقیق‌سازی نمونه‌های حاوی ضدعفونی‌کننده و شستشوی سطوح بزرگ برای پایش میکروبیولوژیکی کاربرد دارد.

مشخصات کلیدی

• نوع محیط: مایع (براث) غنی شده حاوی ترکیبات خنثی‌کننده (Neutralizing Agents)
• هدف کشت: ریکاوری، رشد و شمارش میکروارگانیسم‌های زنده از نمونه‌های مایع یا شستشوهای حاوی باقیمانده مواد ضدعفونی‌کننده
• حالت فیزیکی: پودر (تهیه شده در آب مقطر، حرارت داده شده تا حل شود و سپس اتوکلاو). محیط مایع شفاف تا کمی کدر است.
• ترکیبات کلیدی تغذیه‌ای: پپتون، عصاره مخمر، عصاره گوشت، گلوکز.
• ترکیبات کلیدی خنثی‌کننده: لسیتین (خنثی‌کننده ترکیبات آمونیوم چهارتایی و فنول‌ها)، پلی‌سوربات ۸۰ (خنثی‌کننده فنول‌ها و یدوفورها)، هیستیدین (خنثی‌کننده ترکیبات جیوه‌ای و گلوتارآلدئید).
• شرایط کشت: معمولاً در لوله‌های آزمایش یا ظروف استریل حاوی حجم مشخصی از محیط، برای غوطه‌وری مستقیم وسایل کوچک، رقیق‌سازی نمونه یا کشت شستشوی سطوح استفاده می‌شود.
• شرایط انکوباسیون: دمای ۳۰ تا ۳۵ درجه سانتی‌گراد برای باکتری‌ها به مدت ۲ تا ۵ روز و دمای ۲۰ تا ۲۵ درجه سانتی‌گراد برای قارچ‌ها و مخمرها به مدت ۵ تا ۷ روز.
• خوانش نتیجه: رشد میکروبی با مشاهده کدورت (Turbidity)، تشکیل پلت (Pellet) یا لکه (Pellicle) در سطح محیط تشخیص داده می‌شود. برای شمارش کمی، کشت‌های مثبت معمولاً بر روی محیط آگار جامد (مانند D & E Neutralizing Agar یا Soybean Casein Digest Agar) زیرکشت داده می‌شوند و کلنی‌ها شمارش می‌گردند.
• کنترل کیفیت: رشد خوب با سویه‌های مرجع مانند Staphylococcus aureus ATCC 6538 و Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027. تست اثربخشی خنثی‌کنندگی با کشت این سویه‌ها در حضور غلظت مشخص و زیرمهارکننده (Sub-inhibitory Concentration) از ضدعفونی‌کننده مورد استفاده در فرآیند.
• کاربرد اصلی: اعتبارسنجی روش‌های نظافت و ضدعفونی، تست استریلیتی (Sterility Test) برای محصولاتی که با مواد ضدعفونی‌کننده تماس داشته‌اند، و پایش میکروبیولوژیکی محیط‌های کنترل‌شده (مانند آب مورد استفاده در شستشو).

نکات کاربردی و نگهداری

پودر D & E Neutralizing Broth باید در جای خشک و خنک نگهداری شود. پس از حل کردن در آب مقطر و اتوکلاو، محیط آماده مصرف است. محیط آماده را می‌توان در دمای ۲ تا ۸ درجه سانتی‌گراد برای چند هفته نگهداری کرد. قبل از استفاده، محیط باید به دمای اتاق برسد. تأیید عملکرد خنثی‌کنندگی محیط (Neutralization Efficacy Test) برای ضدعفونی‌کننده‌های خاص مورد استفاده در فرآیند، یک گام ضروری در مطالعات اعتبارسنجی است. حجم محیط مورد استفاده باید به اندازه‌ای باشد که به طور کامل نمونه یا وسه را پوشش دهد. پس از انکوباسیون، در صورت مشاهده رشد (کدورت)، می‌توان از محیط برای کشت ثانویه بر روی پلیت‌های جامد جهت شناسایی و شمارش دقیق استفاده کرد. محصول با کیفیت بالا از ایبرسکو (IBRESco)، با فرمولاسیون استاندارد و عملکرد معتبر، ابزاری کلیدی برای اطمینان از صحت نتایج پایش میکروبیولوژیکی در محیط‌های حساس و تحت کنترل فراهم می‌آورد.