محیط کشت DCLS آگار

محیط کشت انتخابی و افتراقی دی‌سی‌ال‌اس (DCLS Agar)

محیط کشت DCLS Agar یک محیط بهبودیافته از سری محیط‌های حاوی دسی‌کولات است که با افزودن سیترات سدیم و دو منبع قندی (لاکتوز و ساکارز)، انتخاب‌گری و قدرت افتراق آن افزایش یافته است. سدیم دسی‌کولات و سیترات به عنوان عوامل انتخابی قوی، رشد باکتری‌های گرم مثبت و بسیاری از گرم منفی‌های روده‌ای غیربیماری‌زا (مانند E. coli که تخمیرکننده سریع لاکتوز است) را مهار می‌کنند. حضور همزمان لاکتوز و ساکارز همراه با شاخص رنگ قرمز خنثی، امکان افتراق میان ارگانیسم‌های تخمیرکننده قند (که کلنی‌های صورتی تا قرمز ایجاد می‌کنند) و غیرتخمیرکننده‌ها (که کلنی‌های بی‌رنگ یا کهربایی باقی می‌مانند) را فراهم می‌کند. باکتری‌های پاتوژن مورد هدف مانند سالمونلا و شیگلا معمولاً قندها را تخمیر نکرده و کلنی‌های شفاف با مرکز سیاه (به دلیل تولید H₂S) یا بی‌رنگ تشکیل می‌دهند.

کاربرد اصلی این محیط در آزمایشگاه‌های تشخیص پزشکی برای جداسازی اولیه سالمونلا و شیگلا از نمونه مدفوع و در آزمایشگاه‌های کنترل کیفیت مواد غذایی و آب برای ردیابی این پاتوژن‌ها می‌باشد.

مشخصات کلیدی

• نوع محیط: جامد (آگار) بسیار انتخابی و افتراقی برای انتروباکتریاسه‌های پاتوژن
• هدف کشت: جداسازی و تمایز باکتری‌های گرم منفی روده‌ای، به ویژه سالمونلا و شیگلا، بر اساس عدم تخمیر لاکتوز/ساکارز و تولید H₂S
• حالت فیزیکی: پودر (تهیه شده در آب مقطر، حرارت ملایم تا حل شود، سپس اتوکلاو نشده و فقط در بن‌ماری جوشانده می‌شود تا از تجزیه دسی‌کولات جلوگیری شود).
• ترکیبات کلیدی انتخابی: سدیم دسی‌کولات و سدیم سیترات (مهارکننده‌های قوی).
• ترکیبات کلیدی افتراقی: لاکتوز و ساکارز (منابع قند)، قرمز خنثی (شاخص pH). سیترات آهن برای تشخیص تولید سولفید هیدروژن (H₂S).
• شرایط کشت: پلیت‌ها با نمونه مدفوع یا غلظت‌های غذایی به روش کشت سطحی (Streak برای جداسازی) تلقیح می‌شوند.
• شرایط انکوباسیون: دمای ۳۵ تا ۳۷ درجه سانتی‌گراد به مدت ۱۸ تا ۲۴ ساعت (گاهی تا ۴۸ ساعت برای نمونه‌های دارای تعداد کم باکتری).
• خوانش نتیجه: سالمونلا: کلنی‌های بی‌رنگ یا کهربایی با مرکز سیاه (به دلیل تولید H₂S و تشکیل سولفید آهن سیاه). شیگلا: کلنی‌های بی‌رنگ یا کهربایی بدون مرکز سیاه (معمولاً H₂S تولید نمی‌کنند). ارگانیسم‌های تخمیرکننده (مانند E. coli یا کلبسیلا): کلنی‌های صورتی تا قرمز با رسوب صفراوی اطراف کلنی. ارگانیسم‌های مهارشده: رشد ناچیز یا عدم رشد.
• کنترل کیفیت: رشد خوب و ویژگی‌های کلنی مشخص با سویه‌های: Salmonella Typhimurium ATCC 14028 (کلنی بی‌رنگ با مرکز سیاه)، Shigella flexneri ATCC 12022 (کلنی بی‌رنگ)، و رشد مهارشده یا کلنی‌های قرمز با Escherichia coli ATCC 25922.
• کاربرد اصلی: تشخیص آزمایشگاهی اسهال‌های باکتریایی ناشی از سالمونلا و شیگلا و پایش این پاتوژن‌ها در مواد غذایی.

نکات کاربردی و نگهداری

پودر DCLS Agar باید در جای خشک و دور از نور نگهداری شود. به دلیل حساسیت سدیم دسی‌کولات به حرارت مرطوب (اتوکلاو)، محیط فقط باید با حرارت ملایم و هم‌زده شدن حل شده و سپس به مدت ۱ دقیقه جوشانده شود (طبق دستور سازنده). پس از جوشاندن، بلافاصله در بن‌ماری آب ۴۵-۵۰ درجه سانتی‌گراد قرار داده شده و سپس در پلیت ریخته می‌شود. پلیت‌های آماده را می‌توان در دمای ۲ تا ۸ درجه سانتی‌گراد، ترجیحاً در بسته‌بندی محافظ و دور از نور، برای چند هفته نگهداری کرد. قبل از استفاده، پلیت‌ها باید به دمای اتاق برسند. محیط بیش از حد گرم یا اتوکلاو شده، انتخاب‌گری خود را از دست می‌دهد. تفسیر نتایج باید توسط پرسنل مجرب انجام شود، زیرا برخی سویه‌های سالمونلا ممکن است H₂S تولید نکنند و برخی سویه‌های پروتئوس یا سیتروباکتر می‌توانند کلنی‌های مشابه ایجاد کنند. کلنی‌های مشکوک باید با تست‌های بیوشیمیایی و سرولوژیکی تأیید شوند. محصول با کیفیت ایبرسکو (IBRESco)، با فرمولاسیون بهینه، انتخاب‌گری و افتراق قابل اعتمادی را برای تشخیص حیاتی این پاتوژن‌های روده‌ای فراهم می‌آورد.