محیط کشت دیکسون آگار

محیط کشت انتخابی مخمر دیسون (Dixon’s Agar Modified)

محیط کشت Dixon’s Agar (Modified) یک محیط تخصصی بر پایه عصاره مخمر، دکستروز و پپتون است که با افزودن لیپیدهای ضروری (معمولاً روغن زیتون، توئین ۸۰ و گلیسرول مونواستئارات) غنی می‌شود. گونه‌های جنس Malassezia (مانند M. furfur, M. globosa) برای رشد خود به اسیدهای چرب با زنجیره بلند نیاز دارند و نمی‌توانند روی محیط‌های قارچی معمولی رشد کنند. این محیط نیازهای تغذیه‌ای خاص آن‌ها را برآورده می‌سازد. همچنین حاوی سیکلوheximide (برای مهار کپک‌ها و مخمرهای آلوده‌کننده) و کلرامفنیکل (برای مهار باکتری‌ها) است که انتخاب‌گری آن را افزایش می‌دهند. محیط اغلب قبل از ریختن در پلیت، برای امولسیون شدن چربی‌ها به خوبی تکان داده می‌شود. کلنی‌های Malassezia پس از انکوباسیون به رنگ کرم تا زرد و با قوام کره‌ای ظاهر می‌شوند.

کاربرد اصلی این محیط در آزمایشگاه‌های قارچ‌شناسی پزشکی و دامپزشکی برای تشخیص عفونت‌های ناشی از Malassezia مانند پیتریازیس ورسیکالر، فولیکولیت و درماتیت سبورئیک است. همچنین در تحقیقات مربوط به این مخمرها کاربرد دارد.

مشخصات کلیدی

• نوع محیط: جامد (آگار) غنی‌شده و انتخابی برای مخمرهای لیپوفیل جنس Malassezia
• هدف کشت: جداسازی و کشت مخمرهای لیپوفیل، به ویژه گونه‌های جنس Malassezia
• حالت فیزیکی: پودر پایه به همراه اجزای مایع (معمولاً روغن). پس از آماده‌سازی، محیطی کدر و چرب است.
• ترکیبات کلیدی تغذیه‌ای و لیپیدی: عصاره مخمر، دکستروز، پپتون، روغن زیتون (یا روغن دیگر)، گلیسرول مونواستئارات، پلی‌سوربات (توئین) ۸۰، آگار.
• ترکیبات کلیدی انتخابی: سیکلوheximide (اکتیدیون) (مهارکننده قارچ‌ها و مخمرهای غیرلیپوفیل)، کلرامفنیکل (مهارکننده باکتری‌ها).
• شرایط کشت: نمونه (پوست، سواب، مو) مستقیماً روی سطح پلیت کشت داده می‌شود (کشت سطحی). به دلیل محتوای چربی، محیط ممکن است جامد نرمی داشته باشد.
• شرایط انکوباسیون: دمای ۳۲ تا ۳۵ درجه سانتی‌گراد (دمای نزدیک به دمای پوست) به مدت ۵ تا ۱۴ روز. کشت در شرایط هوازی معمولی انجام می‌شود.
• خوانش نتیجه: تشکیل کلنی‌های کوچک، براق، محدب و با قوام کره‌ای به رنگ کرم، زرد کمرنگ یا نارنجی. کلنی‌ها معمولاً پس از ۵-۷ روز ظاهر می‌شوند. عدم رشد مخمرهای معمولی یا کپک‌ها به دلیل وجود سیکلوheximide.
• کنترل کیفیت: رشد خوب و تشکیل کلنی‌های مشخص با سویه Malassezia furfur ATCC 14521 (یا سویه مرجع دیگر). عدم رشد با مخمرهای غیرلیپوفیل مانند Candida albicans ATCC 10231.
• کاربرد اصلی: تشخیص آزمایشگاهی عفونت‌های پوستی ناشی از مخمرهای جنس Malassezia در پزشکی و دامپزشکی.

نکات کاربردی و نگهداری

پودر پایه Dixon’s Agar (Modified) باید در جای خشک نگهداری شود. اجزای لیپیدی (روغن‌ها) جداگانه نگهداری شده و هنگام تهیه محیط اضافه می‌شوند. پس از مخلوط کردن تمام اجزا و حرارت دادن برای استریل‌سازی (اغلب اتوکلاو در دمای ۱۲۱ درجه سانتی‌گراد به مدت ۱۵ دقیقه)، محیط باید به شدت تکان داده شود تا یک امولسیون یکنواخت از چربی در کل محیط ایجاد شود. سپس بلافاصله در پلیت ریخته و بگذارید سفت شود. آنتی‌بیوتیک‌ها (سیکلوheximide و کلرامفنیکل) معمولاً پس از اتوکلاو و هنگامی که محیط به حدود ۵۰ درجه سانتی‌گراد رسید، به صورت محلول استریل اضافه می‌شوند. پلیت‌های آماده را می‌توان در دمای ۲ تا ۸ درجه سانتی‌گراد برای مدت محدود (چند هفته) نگهداری کرد. قبل از استفاده، پلیت‌ها باید به دمای اتاق برسند. نمونه‌های پوستی باید به خوبی روی سطح محیط مالیده شوند. عدم رشد روی این محیط، عفونت ناشی از Malassezia را رد نمی‌کند، زیرا برخی گونه‌ها ممکن است بسیار سخت‌پرور باشند یا نیاز به شرایط خاص‌تری داشته باشند. محصول با کیفیت ایبرسکو (IBRESco)، با فرمولاسیون بهینه، ابزار تشخیصی ارزشمندی برای شناسایی این مخمرهای مهم پوست‌زی فراهم می‌کند.