محیط کشت فلوئید تتراتیونیت مدیوم

محیط کشت مایع تتراتیونات بدون ید و سبز درخشان (Fluid Tetrathionate Medium without Iodine and Brilliant Green)

محیط کشت Fluid Tetrathionate Medium without Iodine and BG (FTM) یک فرمولاسیون پایه بر اساس محیط کلاسیک تتراتیونات مولر-کافمن (MKTTn) است، اما به صورت فاقد ید-یدید و سبز درخشان (Brilliant Green) ارائه می‌شود. این محیط حاوی پپتون، صفرای گاو (Ox Bile)، کلسیم کربنات و عامل کلیدی تتراتیونات سدیم (Sodium Tetrathionate) می‌باشد. تتراتیونات یک عامل اکسیدکننده است که توسط باکتری‌های دارای آنزیم تتراتیونات ردوکتاز (مانند بسیاری از سالمونلاها) به تیوسولفات احیا می‌شود. این احیا محیط را برای سالمونلاها کاهنده کرده و رشد رقابتی بسیاری از باکتری‌های روده‌ای که فاقد این آنزیم هستند را مهار می‌کند. صفرا نیز به مهار باکتری‌های گرم مثبت کمک می‌کند. عدم وجود سبز درخشان در این فرمولاسیون پایه، آن را برای سویه‌های حساس سالمونلا (مانند برخی از سروتیپ‌ها) مناسب‌تر می‌سازد. محیط پایه قبل از استفاده باید با محلول ید-یدید (که معمولاً جداگانه عرضه می‌شود) تکمیل شود تا تتراتیونات تشکیل گردد و خاصیت انتخابی خود را به دست آورد.

کاربرد اصلی این محیط در میکروبیولوژی مواد غذایی و دامپزشکی به عنوان یک محیط غنی‌سازی انتخابی (Selective Enrichment) در روش‌های چندمرحله‌ای استاندارد (مانند ISO 6579-1:2017) برای جداسازی سالمونلا از نمونه‌های پیچیده مانند گوشت، فرآورده‌های طیور، خوراک دام و نمونه‌های مدفوع است.

مشخصات کلیدی

• نوع محیط: مایع (براث) پایه غنی‌سازی انتخابی برای سالمونلا (بدون ید و سبز درخشان)
• هدف کشت: غنی‌سازی انتخابی و افزایش تعداد سالمونلا (به جز سروتیپ‌های تیفی و پاراتیفی بسیار حساس) در نمونه‌های دارای فلور همراه
• حالت فیزیکی: پودر (تهیه شده در آب مقطر، حرارت داده تا حل شود، سپس در لوله‌ها یا بطری‌ها توزیع و اتوکلاو می‌شود). محیط مایل به زرد و کدر است.
• ترکیبات کلیدی پایه: پپتون، صفرای گاو، تتراتیونات سدیم، کلسیم کربنات (بافر).
• ترکیبات حذف‌شده در این فرمول: محلول ید-یدید و سبز درخشان (Brilliant Green). (ید-یدید معمولاً جداگانه برای افزودن قبل از استفاده ارائه می‌شود).
• افزودنی اجباری قبل از استفاده: محلول استریل ید-یدید (Iodine-Potassium Iodide Solution) که برای تشکیل تتراتیونات فعال و ایجاد خاصیت انتخابی کامل ضروری است.
• شرایط کشت: پس از افزودن محلول ید-یدید به محیط پایه استریل و سرد شده، نمونه (معمولاً از یک پیش‌غنی‌سازی مانند BPW) به نسبت مشخص (مثلاً ۰.۱ میلی‌لیتر به ۱۰ میلی‌لیتر محیط یا ۱ میلی‌لیتر به ۱۰ میلی‌لیتر) اضافه می‌شود.
• شرایط انکوباسیون: دمای ۳۷ درجه سانتی‌گراد به مدت ۱۸ تا ۲۴ ساعت (گاهی تا ۴۸ ساعت).
• خوانش نتیجه: رشد باکتری ممکن است با کدورت همراه باشد، اما نتیجه نهایی در این مرحله نیست. پس از انکوباسیون، از این کشت بر روی محیط‌های انتخابی-افتراقی جامد (مانند XLD آگار، هکتون انتریک آگار) زیرکشت داده می‌شود.
• کنترل کیفیت: رشد خوب سالمونلا با سویه Salmonella Typhimurium ATCC 14028 پس از افزودن ید-یدید. مهار نسبی Escherichia coli ATCC 25922.
• کاربرد اصلی: مرحله غنی‌سازی ثانویه در روش استاندارد ISO برای جداسازی سالمونلا از مواد غذایی و خوراک دام.

نکات کاربردی و نگهداری

پودر Fluid Tetrathionate Medium without Iodine and BG (FTM) باید در جای خشک نگهداری شود. مرحله حیاتی: افزودن محلول استریل ید-یدید به محیط پایه بلافاصله قبل از استفاده است. معمولاً به ازای هر ۱۰۰ میلی‌لیتر محیط پایه، ۱ میلی‌لیتر از محلول ید-یدید ۲۰٪ اضافه و خوب مخلوط می‌شود. محیط پس از افزودن ید-یدید، باید به رنگ قهوه‌ای کهربایی درآید. این محیط نباید بیش از حد حرارت ببیند یا اتوکلاو شود. محیط پایه حاوی تتراتیونات سدیم به خودی خود غیرفعال است و تنها پس از افزودن ید-یدید به تتراتیونات فعال تبدیل می‌شود. انکوباسیون بیش از ۲۴ ساعت ممکن است باعث کاهش خاصیت انتخابی محیط شود. زیرکشت بر روی محیط جامد باید پس از ۱۸-۲۴ ساعت انجام گیرد. محصول با کیفیت ایبرسکو (IBRESco)، با ارائه جداگانه محیط پایه و محلول ید-یدید، انعطاف‌پذیری و کنترل بیشتری در آماده‌سازی محیط فعال و مطابق با استاندارد برای غنی‌سازی مؤثر سالمونلا فراهم می‌کند.