محیط کشت هاناهان SOB براث 1
Price range: 850,000 تومان through 2,850,000 تومان
محیط کشت مایع با کارایی بالای هاناهان (SOB Broth)
محیط کشت Hanahan’s Broth (SOB Medium) یک محیط مایع غنیشده با کارایی بالا است که به طور خاص برای رشد باکتریهای اشریشیا کلی (E. coli) با کارایی ترانسفورماسیون (تبدیل) و ترانسفکسیون عالی در آزمایشهای کلونینگ مولکولی طراحی شده است. این محیط با داشتن ترکیبات مغذی ویژه، رشد سریع و سلامت سلولی را تضمین میکند.
محیط کشت براث هاناهان (محیط اساوبی) – SOB Broth
محیط کشت SOB Broth (مخفف Super Optimal Broth) یک فرمولاسیون بهینهشده است که توسط داگلاس هاناهان برای دستیابی به ترانسفورماسیون با کارایی بسیار بالا در E. coli توسعه یافت. این محیط حاوی تریپتون و عصاره مخمر به عنوان منابع اصلی نیتروژن و فاکتورهای رشد است. اجزای کلیدی که آن را از محیطهای معمولی متمایز میکند، حضور منیزیم کلرید (MgCl₂) و منیزیم سولفات (MgSO₄) در غلظتهای بالاست. یون منیزیم برای حفظ یکپارچگی غشاء سلولی و به ویژه برای تثبیت غشاء خارجی باکتریهای گرم منفی حیاتی است، که منجر به تشکیل سلولهای مستعد (Competent Cells) سالم با کارایی بالای جذب DNA خارجی میگردد. علاوه بر این، محیط حاوی پتاسیم کلرید (KCl) است که به حفظ فشار اسمزی مناسب کمک میکند. هنگامی که برای تهیه سلولهای مستعد بسیار کارآمد (مانند سلولهای شیمیایی یا الکتروکامپیتنت) استفاده میشود، اغلب پس از رشد، محلول استریل گلوکز نیز به عنوان منبع انرژی سریع اضافه میگردد. رشد در این محیط معمولاً منجر به تولید سلولهایی با سلامت و کارایی بهینه برای کارهای کلونینگ میشود.
کاربرد اصلی این محیط در آزمایشگاههای بیولوژی مولکولی، ژنتیک و بیوتکنولوژی برای رشد باکتریهای E. coli جهت تهیه سلولهای مستعد با کارایی بالا، ترانسفورماسیون، و کشت سلولهای تراریخت است.
مشخصات کلیدی
- نوع محیط: مایع (براث) غنیشده با کارایی بالا برای رشد E. coli در کارهای کلونینگ مولکولی
- هدف کشت: رشد سریع و تولید سلولهای E. coli سالم و با کارایی بالا برای ترانسفورماسیون و سایر تکنیکهای مولکولی
- حالت فیزیکی: پودر (تهیه شده در آب مقطر با خلوص بالا، حرارت داده تا حل شود و سپس اتوکلاو). محیط مایع شفاف است.
- ترکیبات کلیدی: تریپتون، عصاره مخمر، کلرید سدیم، کلرید پتاسیم، کلرید منیزیم (MgCl₂)، سولفات منیزیم (MgSO₄).
- افزودنی متداول پس از اتوکلاو: محلول استریل گلوکز ۲۰٪ (برای دستیابی به غلظت نهایی ۰.۴٪ یا ۲۰ میلیمولار).
- شرایط کشت: معمولاً در فلاسکهای ارلن مایر با حجم مناسب (نسبت هوا به مایع بالا) روی شیکر انکوباتور با سرعت بالا (۲۵۰-۳۰۰ دور در دقیقه) برای هوادهی عالی.
- شرایط انکوباسیون: دمای ۳۷ درجه سانتیگراد (برای سویههای مزوفیل) تا زمانی که چگالی نوری (OD600) به مقدار مطلوب (معمولاً ۰.۴ تا ۰.۶ برای تهیه سلولهای مستعد) برسد. این معمولاً ۲-۴ ساعت طول میکشد.
- خوانش نتیجه: رشد سریع با ایجاد کدورت (Turbidity) قابل اندازهگیری توسط اسپکتروفتومتر. کارایی نهایی با میزان موفقیت ترانسفورماسیون (تعداد کلونی در هر میکروگرم DNA) سنجیده میشود.
- کنترل کیفیت: رشد سریع و دستیابی به چگالی نوری بالا در زمان کوتاه با سویههای استاندارد E. coli مانند DH5α. دستیابی به کارایی ترانسفورماسیون بالا (معمولاً >۱۰⁷ کلنی/میکروگرم DNA برای سلولهای شیمیایی مستعد).
- کاربرد اصلی: محیط استاندارد طلایی برای رشد E. coli جهت تهیه سلولهای مستعد با کارایی بالا در پروتکلهای کلونینگ، ساخت کتابخانههای ژنومی و بیان پروتئین.
نکات کاربردی و نگهداری
پودر SOB Broth باید در جای خشک نگهداری شود. آمادهسازی باید با آب با خلوص بالا (مانند آب دیونیزه یا Milli-Q) انجام شود. محیط پایه پس از اتوکلاو و سرد شدن، برای افزودن گلوکز استریل آماده است. برای دستیابی به بهترین نتایج، کشت باید در مرحله رشد لگاریتمی میانی (OD600 ~0.5) متوقف شود. هوادهی قوی (با استفاده از شیکر با سرعت بالا و حجم کم محیط در فلاسک) برای رشد سریع و سلامت سلولی حیاتی است. هنگام تهیه سلولهای مستعد شیمیایی، سلولها در این محیط رشد کرده و سپس تحت تیمارهای شیمیایی خاص (مانند CaCl₂) قرار میگیرند. محصول با کیفیت بالا از ایبرسکو (IBRESco)، با فرمولاسیون دقیق و مواد اولیه خالص، نتایج قابل تکرار و عالی را برای تحقیقات پیشرفته بیولوژی مولکولی تضمین میکند.
الایزا
کیت های بیوشیمی
کیت های مولکولی و سایر
کیت های دامپزشکی
کیت های سلامت و زیبایی
تجهیزات آزمایشگاهی
کیت های تشخیص سریع
مصرفی
دیدگاهها
هیچ دیدگاهی برای این محصول نوشته نشده است.