محیط کشت هارت اینفیوژن آگار 1

محیط کشت آگار اینفیوژن قلب (Heart Infusion Agar)

محیط کشت Heart Infusion Agar یک محیط بسیار مغذی است که بر پایه عصاره قلب گاو و پپتون فرموله شده است. عصاره قلب گاو، منبع غنی از فاکتورهای رشد، کربوهیدرات‌های پیچیده، ویتامین‌ها (به ویژه گروه B) و مواد معدنی است که رشد بهینه بسیاری از باکتری‌های بیماری‌زای سخت‌پرور (مانند استرپتوکوک‌ها، برخی نایسریاها و هموفیلوس) را ممکن می‌سازد. پپتون نیز نیتروژن و اسیدهای آمینه ضروری را تأمین می‌کند. این محیط فاقد هرگونه ماده انتخابی یا افتراقی است و بنابراین به عنوان یک محیط پایه غنی‌ساز (Enrichment Base) همه‌کاره عمل می‌کند. اغلب به آن خون (برای تهیه بلاد آگار) یا سرم اضافه می‌شود تا آن را برای کشت پاتوژن‌های خاص‌تر مناسب سازند. همچنین می‌توان آنتی‌بیوتیک‌ها یا سایر مواد افزودنی را برای ایجاد خاصیت انتخابی به آن اضافه کرد. محیط HIA برای تهیه محیط شکلات آگار نیز با گرم کردن آن همراه با خون استفاده می‌شود.

کاربرد اصلی این محیط در آزمایشگاه‌های میکروبیولوژی تشخیصی بالینی به عنوان پایه برای تهیه محیط‌های خون‌دار و شکلات آگار برای جداسازی پاتوژن‌ها از نمونه‌های خون، مایع مغزی-نخاعی و سایر نمونه‌های استریل است. همچنین در تحقیقات و نگهداری کشت‌های میکروبی کاربرد دارد.

مشخصات کلیدی

• نوع محیط: جامد (آگار) غنی‌شده و غیرانتخابی برای کشت باکتری‌های سخت‌پرور
• هدف کشت: کشت و نگهداری باکتری‌های سخت‌پرور و طیف وسیعی از میکروارگانیسم‌ها، و استفاده به عنوان پایه برای محیط‌های تخصصی‌تر
• حالت فیزیکی: پودر (تهیه شده در آب مقطر، حرارت داده تا حل شود و سپس اتوکلاو). محیط پایه نیمه شفاف است.
• ترکیبات کلیدی: عصاره قلب گاو (Beef Heart Infusion)، پپتون، سدیم کلرید، آگار.
• افزودنی‌های رایج: خون گوسفند یا خرگوش (۵-۱۰٪) برای تهیه بلاد آگار. سرم یا سایر فاکتورهای رشد (مثل همین و NAD).
• شرایط کشت: پس از افزودن خون یا سایر مواد، برای کشت سطحی نمونه‌های بالینی استفاده می‌شود.
• شرایط انکوباسیون: بسته به ارگانیسم هدف: دمای ۳۵ تا ۳۷ درجه سانتی‌گراد، اغلب در اتمسفر حاوی ۵-۱۰٪ CO₂ برای کاپنوفیل‌ها، به مدت ۲۴ تا ۴۸ ساعت (گاهی بیشتر).
• خوانش نتیجه: مشاهده رشد خوب و تشکیل کلنی‌های مشخص باکتری‌های سخت‌پرور. در صورت افزودن خون، مشاهده نوع همولیز (آلفا، بتا، گاما).
• کنترل کیفیت: رشد عالی با سویه‌های سخت‌پرور مانند Streptococcus pneumoniae ATCC 6305 (در بلاد آگار حاوی خون) و Haemophilus influenzae ATCC 10211 (در شکلات آگار).
• کاربرد اصلی: محیط پایه برای تهیه محیط‌های خون‌دار و شکلات آگار در آزمایشگاه‌های تشخیص پزشکی، تحقیقاتی و صنعتی.

نکات کاربردی و نگهداری

پودر Heart Infusion Agar باید در جای خشک نگهداری شود. آماده‌سازی ساده است و پس از اتوکلاو، محیط پایه باید تا حدود ۴۵-۵۰ درجه سانتی‌گراد سرد شود. در این مرحله، افزودنی‌های استریل (خون، سرم، آنتی‌بیوتیک) در شرایط آسپتیک اضافه و به آرامی مخلوط می‌شوند. برای تهیه شکلات آگار، مخلوط حاوی خون باید تا حدود ۸۰-۸۵ درجه سانتی‌گراد حرارت دیده و سپس به سرعت خنک شود. پلیت‌های آماده را می‌توان در دمای ۲ تا ۸ درجه سانتی‌گراد برای چند هفته نگهداری کرد. قبل از استفاده، پلیت‌ها باید به دمای اتاق برسند. به دلیل غنای بالا، این محیط مستعد آلودگی قارچی است؛ بنابراین باید در شرایط استریل تهیه و نگهداری شود. محصول با کیفیت بالا از ایبرسکو (IBRESco)، با عصاره قلب با کیفیت و فرمولاسیون ثابت، پایه‌ای مطمئن برای تهیه محیط‌های حیاتی تشخیصی فراهم می‌کند که بازیابی بهینه پاتوژن‌های مهم بالینی را تضمین می‌نماید.