محیط کشت پپتون سالین محلول

محیط کشت محلول پپتون سالین (Peptone Saline Solution)

Peptone Saline Solution که گاهی با نام‌های Maximum Recovery Diluent یا Buffered Peptone Saline نیز شناخته می‌شود، یک محلول آبی استریل است. این محلول حاوی پپتون (۰.۱٪) به عنوان یک ماده محافظت کننده ملایم و تامین کننده مواد مغذی جزئی، و کلرید سدیم (۰.۸۵٪) برای حفظ تعادل اسمزی (ایزوتونیک) و جلوگیری از لیز سلول‌های میکروبی است. همچنین اغلب حاوی یک سیستم بافر فسفات (معمولاً فسفات سدیم) است که pH محیط را در محدوده خنثی (حدود ۷.۰) تثبیت می‌کند و از شوک pH به میکروارگانیسم‌ها جلوگیری می‌نماید. ترکیب این عوامل، باعث می‌شود این محلول به عنوان یک رقیق‌کننده ایده‌ال برای شمارش میکروبی (Viable Count) عمل کند، زیرا استرس اسمزی و تغذیه‌ای به سلول‌ها وارد نکرده و منجر به کاهش کاذب شمارش نمی‌شود. از این محلول همچنین به عنوان پایه برای تهیه رقت‌های سریال نمونه‌های غذایی، محیطی یا بالینی قبل از کشت، و نیز به عنوان محیط نگهداری و انتقال کوتاه‌مدت نمونه‌ها استفاده می‌شود.

کاربرد اصلی آن در آزمایشگاه‌های کنترل کیفیت (آب، غذا، مواد آرایشی)، میکروبیولوژی محیطی و تحقیقاتی به عنوان یک رقیق‌کننده استاندارد برای آزمون‌های کمی میکروبی است.

مشخصات کلیدی

• نوع محیط: مایع (محلول)، رقیق‌کننده و محیط انتقال غیرغذایی
• هدف کشت: رقیق‌سازی نمونه‌ها برای شمارش میکروبی، حفظ زنده‌مانی میکروارگانیسم‌ها در حین انتقال و تهیه سوسپانسیون سلولی
• حالت فیزیکی: پودر (حاوی پپتون، کلرید سدیم و نمک‌های بافر) که پس از حل کردن در آب مقطر، در ظروف مناسب توزیع و اتوکلاو می‌شود.
• ترکیبات کلیدی: پپتون (۰.۱٪)، کلرید سدیم (۰.۸۵٪)، دی‌پتاسیم فسفات، پتاسیم دی‌هیدروژن فسفات (به عنوان بافر)
• ویژگی کلیدی: ایزوتونیک و بافر شده با pH خنثی برای حداقل کردن استرس وارده به سلول‌های میکروبی و دستیابی به بازیابی حداکثری (Maximum Recovery).
• شرایط استفاده: به عنوان رقیق‌کننده در روش‌های رقت‌سازی سریال (معمولاً به نسبت ۱:۱۰) یا برای شستشوی رسوب سلولی استفاده می‌شود. برای انتقال نمونه، نمونه در داخل ظرف حاوی این محلول قرار می‌گیرد.
• شرایط نگهداری نمونه: نمونه‌های رقیق شده یا معلق باید ترجیحاً بلافاصله پردازش شوند، اما می‌توانند به طور موقت (معمولاً تا ۲۴ ساعت) در دمای یخچال (۲-۸ درجه سانتی‌گراد) نگهداری شوند.
• خوانش نتیجه: این محلول محیط کشت نیست و رشد در آن رخ نمی‌دهد. موفقیت آن بر اساس ثبات شمارش میکروبی در آزمون‌های کنترل کیفیت و بقای میکروارگانیسم‌ها در نمونه‌های انتقالی ارزیابی می‌شود.
• کنترل کیفیت: محلول باید شفاف و عاری از هرگونه کدورت یا رسوب باشد. استریلیتی آن باید با انکوباسیون نمونه‌ای از آن در محیط مناسب بررسی شود. عملکرد آن به عنوان رقیق‌کننده می‌تواند با مقایسه شمارش یک سوسپانسیون میکروبی شناخته شده در این محلول با آب مقطر یا سالین معمولی ارزیابی گردد.
• کاربرد اصلی: رقیق‌کننده استاندارد برای شمارش میکروبی (Total Viable Count) در آزمون‌های کنترل کیفیت مواد غذایی، آب و محیط؛ محیط انتقال برای نمونه‌های میکروبیولوژی.

نکات کاربردی و نگهداری

پودر Peptone Saline Solution ایبرسکو (IBRESco) را در جای خشک و خنک نگهداری کنید. برای تهیه، پودر را در آب مقطر با کیفیت بالا (ترجیحاً آب مقطر تازه) حل کرده و کاملاً هم بزنید تا محلول شفاف شود. سپس در ظروف مناسب (لوله، بطری یا ویال) توزیع و طبق دستورالعمل اتوکلاو نمایید. محلول‌های آماده استریل را می‌توان در دمای اتاق یا ترجیحاً در یخچال (۲-۸ درجه سانتی‌گراد) برای مدت طولانی (چند ماه) نگهداری کرد، مشروط بر اینکه درب آن بسته باشد و آلودگی رخ ندهد. قبل از استفاده، اطمینان حاصل کنید که ظرف باز نشده یا آلوده نگردیده است. برای رقت‌سازی، از پیپت‌های استریل و ظروف رقت استریل استفاده کنید. زمان تماس نمونه با محلول باید تا حد امکان کوتاه باشد، زیرا این محلول غنی‌کننده نیست و فقط از مرگ و میر ناشی از شوک اسمزی یا pH جلوگیری می‌کند. برای نمونه‌های بسیار حساس (مانند کوکسی‌های گرم مثبت خشک شده)، ممکن است از پپتون با غلظت کمی بالاتر (۰.۵٪) استفاده شود. این محلول جایگزین محیط‌های غنی‌کننده یا نگهدارنده تخصصی (مانند محیط انتقال آمیز یا کری‌بلر) برای نمونه‌های بالینی خاص نیست. برای اهداف شمارش، از رقت‌های مناسب استفاده کنید تا از حالت “غرق‌آوری” (Overcrowding) پلیت جلوگیری شود.