محیط کشت YM براث

محیط کشت براث وای‌ام (Yeast Mold Broth)

محیط کشت Yeast Mold Broth (YM Broth) نسخه مایع محیط جامد Yeast Mold Agar است که برای کشت، غنی‌سازی و تولید توده زیستی (بیومس) قارچ‌ها در حالت مایع فرموله شده است. این محیط حاوی ترکیبات مغذی مشابهی شامل عصاره مخمر و پپتون به عنوان منابع نیتروژن، ویتامین‌ها و پیش‌سازهای ضروری، و دکستروز (گلوکز) به عنوان منبع اصلی کربن و انرژی سریع‌الاستفاده است. pH پایین (حدود ۵٫۴) این محیط، یک عامل انتخابی مهم است که از رشد بسیاری از باکتری‌ها جلوگیری کرده و شرایط بهینه برای رشد قارچ‌ها را فراهم می‌کند. حالت مایع این محیط امکان رشد سه‌بعدی، هوادهی بهتر (در کشت شیک)، تولید متابولیت‌های خارج سلولی و مشاهده الگوهای رشد (مانند تشکیل پلت میسلیومی یا growth pellet در کپک‌ها و کدورت یکنواخت در مخمرها) را فراهم می‌آورد. YM Broth به طور گسترده‌ای برای تولید اینوکولوم اولیه، مطالعات رشد و سینتیک، تخمیر در مقیاس کوچک و آزمایش‌های فیزیولوژیکی روی قارچ‌ها استفاده می‌شود.

کاربرد اصلی آن در تحقیقات میکروبیولوژی و میکولوژی، صنایع تخمیر و بیوتکنولوژی (برای تولید مخمر نانوایی، مخمر آبجو، مخمر تغذیه‌ای و تولید متابولیت‌های ثانویه از کپک‌ها)، و کنترل کیفیت (مانند تست‌های استریلیتی مایع برای قارچ‌ها) است.

مشخصات کلیدی

• نوع محیط: مایع (براث)، غنی، نیمه‌انتخابی (به دلیل pH اسیدی) برای کشت مایع قارچ‌ها.
• هدف کشت: کشت مایع، غنی‌سازی، تکثیر و تولید توده زیستی مخمرها (Yeasts) و کپک‌ها (Molds).
• حالت فیزیکی: پودر (تهیه شده در آب مقطر، حرارت داده شده تا حل شود و سپس اتوکلاو می‌شود).
• ترکیبات کلیدی تغذیه‌ای: عصاره مخمر، پپتون، دکستروز (گلوکز).
• فاکتورهای انتخابی: pH اسیدی (~۵٫۴) (مهارکننده انتخابی بسیاری از باکتری‌ها).
• مکانیسم عمل: ایجاد یک محیط مایع مغذی با pH بهینه برای متابولیسم قارچ‌ها، همراه با مهار نسبی فلور باکتریایی رقیب.
• شرایط کشت: کشت در لوله‌ها، فلاسک‌ها یا بیوراکتورهای استریل. کشت می‌تواند ثابت (برای تشکیل پلت میسلیومی یا رشد سطحی) یا شیک (برای رشد یکنواخت و هوادهی مخمرها) انجام شود.
• شرایط انکوباسیون: ۲۰ تا ۲۵ درجه سانتی‌گراد (دمای بهینه برای بسیاری از قارچ‌ها) یا دمای خاص بر اساس گونه (مثلاً ۳۰ درجه برای برخی مخمرها). مدت زمان معمولاً ۲۴ تا ۷۲ ساعت یا بیشتر برای کپک‌های کندرشد. کشت شیک معمولاً با سرعت ۱۵۰-۲۰۰ دور در دقیقه انجام می‌شود.
• خوانش نتیجه: مخمرها: ایجاد کدورت یکنواخت در محیط. کپک‌ها (رشد شیک): ممکن است کدورت ایجاد کنند یا به صورت پلت‌های کوچک میسلیومی رشد کنند. کپک‌ها (رشد ثابت): تشکیل لایه یا پلی روی سطح، یا تشکیل گلوله‌های میسلیومی (پلت) در کف. محیط ممکن است بوی مشخص قارچی پیدا کند.
• کنترل کیفیت: رشد خوب و ایجاد کدورت با سویه Candida albicans ATCC 10231 یا Saccharomyces cerevisiae ATCC 9763 (کنترل مثبت مخمر). رشد میسلیومی با سویه Aspergillus brasiliensis ATCC 16404 (کنترل مثبت کپک).
• کاربرد اصلی: تهیه کشت مایع اولیه (اینوکولوم) برای فرآیندهای تخمیر، مطالعات رشد و تولید متابولیت در مخمرها و کپک‌ها، کشت مایع برای تست‌های استریلیتی، و تولید توده زیستی برای تحقیقات و کاربردهای صنعتی.

نکات کاربردی و نگهداری

پودر Yeast Mold Broth محصول ایبرسکو (IBRESco) باید در جای خشک و خنک نگهداری شود. برای تهیه محیط، پودر را در آب مقطر حل کرده و با حرارت ملایم هم بزنید تا کاملاً حل شود. pH محیط باید پس از حل کردن در محدوده ۵٫۴ ± ۰٫۲ تنظیم شود (معمولاً با اسید کلریدریک رقیق). سپس اتوکلاو نمایید. محیط آماده را می‌توان در دمای ۲ تا ۸ درجه سانتی‌گراد برای مدت محدود نگهداری کرد. قبل از استفاده، محیط باید به دمای انکوباسیون برسد. برای کشت شیک، استفاده از شیکر انکوباتوردار با کنترل دما و سرعت توصیه می‌شود. حجم محیط در فلاسک نباید بیش از ۲۰-۳۰٪ حجم کل فلاسک باشد تا هوادهی کافی فراهم شود. برای کشت کپک‌هایی که به صورت پلت رشد می‌کنند، کشت ثابت (بدن تکان) مناسب‌تر است. از آنجایی که محیط حاوی قند است، در صورت آلودگی باکتریایی مقاوم، ممکن است کدورت ایجاد شود، بنابراین بررسی خلوص کشت (مثلاً زیر میکروسکوپ یا کشت روی آگار) توصیه می‌شود. برای اهداف صنعتی یا تحقیقاتی کمی، می‌توان رشد را با اندازه‌گیری جذب نوری (OD) در طول موج ۶۰۰ نانومتر برای مخمرها ردیابی کرد. برای جلوگیری از آلودگی متقابل در هنگام کار با کشت‌های مایع قارچی (به ویژه در شیکر)، رعایت اصول ایمنی زیستی و استفاده از درپوش‌های مناسب ضروری است.