محیط کشت اسید براث ایبرسکو

محیط کشت براث اسید (Acid Broth)

محیط کشت اسید براث Acid Broth یک محیط غنی‌سازی تخصصی برای بازیابی و کشت میکروارگانیسم‌های عامل فساد در کنسروهای اسیدی (نظیر رب گوجه‌فرنگی، خمیر میوه و کنسانتره‌ها) می‌باشد. این محیط بر اساس دستورالعمل‌های استاندارد برای آزمون‌های عقیمی تجاری فرموله شده است. ویژگی بارز این محیط، pH اسیدی (۴٫۰ یا ۵٫۰) آن است که شرایط را برای رشد باکتری‌های اسیددوست مانند باسیلوس کواگولانس، لاکتوباسیلوس، لکونوستوک، برخی پدیوکوکوس‌ها، استرپتوکوکوس‌ها و مخمرها فراهم کرده و از رشد فلور میکروبی غیرهدف جلوگیری می‌کند. فرمولاسیون این محیط در دو نسخه اصلی موجود است: نسخه استاندارد (pH ۵٫۰) حاوی پپتون، عصاره مخمر، گلوکز و فسفات، و نسخه مخصوص (pH ۴٫۰) حاوی شکر اینورت (مخلوط ۵۰٪ گلوکز و ۵۰٪ فروکتوز)، پپتون و عصاره مخمر. شکر اینورت علاوه بر تأمین کربن، از دست‌رفتن آب محیط در طی انکوباسیون طولانی جلوگیری می‌کند.

کاربرد اصلی این محیط در صنایع کنسروسازی و فرآوری مواد غذایی برای تشخیص آلودگی‌های میکروبی با بار کم در فرآورده‌های اسیدی بسته‌بندی شده به صورت آسپتیک است. روش کار معمولاً به صورت تلقیح ۱۰۰ گرم نمونه به ۳۰۰ میلی‌لیتر محیط در فلاسک‌های ۵۰۰ میلی‌لیتری و انکوباسیون در دمای ۳۰ درجه سانتی‌گراد به مدت ۵ روز (و نگهداری نمونه کنترل به مدت ۱۰ روز) انجام می‌شود.

مشخصات کلیدی محیط کشت اسید براث

• نوع محیط: مایع (براث)، انتخابی برای میکروارگانیسم‌های اسیددوست.
• هدف کشت: تشخیص آلودگی‌های میکروبی و آزمون عقیمی تجاری کنسروهای اسیدی و محصولات غذایی با pH پایین.
• حالت فیزیکی: پودر زرد روشن تا بژ، همگن و روان. بسیار مرطوب‌کننده.
• ترکیبات کلیدی (نسخه استاندارد – گرم/لیتر): پپتون (۵٫۰)، عصاره مخمر (۵٫۰)، گلوکز (۵٫۰)، فسفات (۴٫۰-۵٫۰). pH نهایی: ۵٫۰ ± ۰٫۲.
• ترکیبات کلیدی (نسخه با pH پایین‌تر – گرم/لیتر): شکر اینورت (۱۰٫۰)، پپتون (۱۰٫۰)، عصاره مخمر (۷٫۵). pH نهایی: ۴٫۰ ± ۰٫۲.
• میزان مصرف: ۱۹.۰ تا ۲۰.۰ گرم در لیتر (نسخه استاندارد) یا ۲۷.۵ گرم در لیتر (نسخه با pH پایین‌تر).
• شرایط استریلیزاسیون: اتوکلاو در ۱۲۱ درجه سانتی‌گراد به مدت ۱۵ دقیقه. از حرارت دادن بیش از حد خودداری شود.
• شرایط انکوباسیون: ۳۰ ± ۱ درجه سانتی‌گراد به مدت ۵ روز (برای نمونه‌های کنترلی تا ۱۰ روز).
• خوانش نتیجه: مثبت: کدورت محیط، رشد گرانولی، تشکیل لایه سطحی یا بیوفیلم. منفی: شفاف ماندن محیط. تأیید نهایی با بررسی میکروسکوپی انجام می‌شود.
• کنترل کیفیت: رشد خوب برای Bacillus coagulans، Lactobacillus acidophilus و Leuconostoc mesenteroides.
• کاربرد اصلی: کنترل کیفیت میکروبیولوژی کنسروهای اسیدی و نیمه‌اسیدی، تشخیص باکتری‌های ترمورفیک اسیددوست و مخمرهای مقاوم به اسید.

نکات کاربردی و نگهداری

پودر محیط کشت اسید براث Acid Broth محصول ایبرسکو (IBRESco) باید در جای خشک و خنک و دور از نور مستقیم نگهداری شود. پودر بسیار مرطوب‌کننده است؛ پس از هر بار استفاده، درب ظرف محکم بسته شود. برای تهیه، پودر را در آب مقطر یا دیونیزه حل کرده و با حرارت ملایم و همزدن مداوم به جوش آورید تا کاملاً حل شود. از جوشاندن طولانی و اتوکلاو اضافی خودداری کنید، زیرا حرارت بیش از حد ممکن است به قندها آسیب زده و pH را تغییر دهد. pH محیط بسیار حیاتی است و باید در محدوده مشخص شده باشد. محیط آماده را می‌توان در دمای ۲-۸ درجه سانتی‌گراد به مدت کوتاه نگهداری کرد. روش استاندارد آزمون، استفاده از حداقل سه فلاسک برای هر نمونه و نگهداری یک نمونه شاهد در دمای یخچال برای مقایسه میکروسکوپی و تکرار آزمایش است.