محلول پاپانیکولائو | محلول رنگ OG6 | اورنج جی

محلول رنگ OG6

Orange G solution (OG6)

محلول رنگ OG6/با حجم ۰.۵ لیتری و ۱ لیتری 

تستا شاپ محلول اورنج جی را با دو برند مختلف و با کیفیت عرضه می کند :

• برند پادتن طب PadtanTeb
• برند بهارافشان BaharAfshan

محلول پاپانیکولائو چیست؟

رنگ‌آمیزی با محلول پاپانیکولائو، از تکنیک‌های بافت‌شناسی رنگ‌آمیزی که توسط جورج پاپانیکولائو، ابداع و تکمیل شده است. روش رنگ‌آمیزی پاپانیکولائو از پراستفاده‌ترین لکه‌ها در سیتولوژی است.

از این شیوه در تشخیص و تمایز سلول‌ها در ترشحات مختلف بدن استفاده می‌شود. نمونه‌ها می‌توانند اسمیر زنان (پاپ اسمیر)، خلط، بزاق، ادرار، مایع نخاع، مایع شکمی، مایع جنب، مایع سینوویال، مایع منی، مواد آسپیراسیون، نمونه‌های لمس تومور، یا سایر مواد حاوی سلول باشند.

رنگ‌آمیزی پاپ یک روشی مطمئن خصوصاً در شناسایی سرطان دهانه رحم در زنان محسوب می‌گردد. این روش به پاپ اسمیر نیز مشهور است.

محلول اورنج جی، برای تفاوت بین انواع سلول‌ها در اسمیر واژن برای تشخیص سرطان واژن، رحم و دهانه رحم طراحی شده است. علاوه بر این، این روش برای رنگ‌آمیزی انواع دیگر ترشحات بدنی و اسمیر سلول ارزشمند است.

محلول پاپانیکولائو، با برند پادتن طب و بهارافشان عرضه می‌گردد.

محلول رنگ OG6 چیست؟

یکی از انواع محلول پاپانیکلائو، محلول رنگ OG6 است که معمولاً به فرم نمک سدیمی و به‌صورت پودر یا کریستال‌های نارنجی‌رنگ وجود دارد از همین رو به اورنج جی معروف شده است.

در روش رنگ‌آمیزی پاپ، به پنج لکه و سه‌راه حل تقسیم می‌گردد. محلول رنگ OG6 یکی از این شیوه‌هاست و حاوی نارنجی G در الکل اتیل ۹۵٪ با مقدار کمی اسید فسفاتوتونگستیک است. در محلول رنگ OG6، «OG» نشان‌دهنده نارنجی G و «۶» نشان‌دهنده غلظت اسید فسفوتونگستیک اضافه شده است. انواع دیگری نظیر OG5  و OG8 نیز کاربرد دارد.

محلول اورنج جی، با برندهای پادتن طب (در حجم‌های ۵۰۰ میلی‌لیتری و ۱ لیتری) و بهارافشان عرضه می‌گردد.

فرمول شیمیایی محلول رنگ OG6:

• Molecular FormulaC_۱۶H_۱۰N_۲Na_۲O_۷S_۲

فرمول شیمیایی اورنج جی – فرمول مولکولی محلول رنگ OG6

کاربردهایی عمده اورنج جی:

نمونه هایی از محصولات محلول رنگ پادتن طب

محلول پاپانیکولائو، در روش پاپ و موارد زیر مورداستفاده قرار می‌گیرد:

• در رنگی آمیزی
• استفاده به‌عنوان یک شناساگر شیمیایی اسید و باز است.
• رنگ‌آمیزی کراتین
• رنگ‌آمیزی تری کروم، با دیگر رنگ‌های زرد ترکیب‌شده
• رنگ‌آمیزی اریتروسیت‌ها
• رنگ OG6 در سیتولوژی جهت رنگ‌آمیزی سیتوپلاسم سلول‌ها استفاده می‌شود.

روش استفاده از اورنج جی

مرحله آماده‌کردن نمونه

ابتدا نمونه‌ها را سانتریفیوژ می‌نماییم. نمونه‌های سیتولوژی معمولاً به‌وسیله سرنگ یا لوله‌آزمایش به بخش پاتولوژی منتقل می‌شوند.

سپس از رسوب آنها یک قطره برداشته و بر روی لام قرار می‌دهیم.

مرحله فیکس کردن

ابتدا لام‌های مربوط به نمونه‌های سیتولوژی را در ۳ ظرف گزیلول (هرکدام به مدت ۲۰ دقیقه) قرار می‌دهیم.

سپس آنها را در الکل ۹۶ درجه حداقل به مدت ۳۰ دقیقه قرار داده تا کاملاً فیکس شوند.

سپس نمونه‌ها را به ترتیب ۱۰ بار به الکل ۸۰ درجه و ۱۰ بار به الکل ۷۰ درجه وارد و خارج کرده و بعد با آب شستشو می‌دهیم.

مرحله رنگ‌آمیزی هسته

ابتدا نمونه‌ها را به مدت ۵ دقیقه در رنگ هماتوکسین که رنگ مخصوص هسته است قرار می‌دهیم.

لام‌ها را با آب قلیایی یا آب شهری بدون کلر شستشو می‌دهیم.

لام‌ها را یک‌بار وارد محلول اسید الکل می‌کنیم تا رنگ هماتوکسین سیتوپلاسم از بین برود. سپس آنها را دوباره شستشو می‌دهیم. بعد لام‌ها را ۳ بار وارد محلول کربنات لیتیوم می‌کنیم تا رنگ هسته فیکس شود سپس با آب لام‌ها را شستشو می‌دهیم.

مرحله رنگ‌آمیزی سیتوپلاسم

لام‌ها را به تعداد ۱۰ بار وارد الکل ۹۶ درجه می‌کنیم. بعد به مدت ۴ دقیقه نمونه‌ها را در محلول رنگ OG6 قرار می‌دهیم.

سپس نمونه‌ها را ۲ بار در الکل ۹۶ درجه وارد کرده و بعد به مدت ۵ دقیقه در رنگ EA50 قرار می‌دهیم.

مرحله آبگیری

در مرحله آبگیری، ۲ ظرف حاوی الکل ۹۶ درجه و دو ظرف حاوی الکل مطلق و ۳ ظرف حاوی گزیلول تهیه کرده و لام‌ها را به ترتیب وارد ظروف حاوی الکل با درجه پایین، الکل با درجه بالا و گزیلول می‌کنیم .

پس از رنگ‌آمیزی لام‌ها بر روی آنها چسبی به نام Canad Bond می‌ریزیم. سپس به‌وسیله لام مقداری گزیلول برداشته و لامل را بر روی آن قرار می‌دهیم. در هنگام گذاشتن لامل باید دقت کنیم که حبابی ایجاد نشود.

تفسیر رنگ‌ اورنج جی

اولین ضد لکه OG-6. نارنجی جی برای رنگ‌آمیزی کراتین استفاده می‌شود.

محلول پاپانیکولائو، یک الگوی رنگ‌آمیزی کم رنگ و زرد نارنجی در سلول‌های اپیتلیال سنگفرشی بالغ و کراتینه شده به دست می آید.

محلول پاپانیکولائو، یک الگوی رنگ‌آمیزی کم رنگ و زرد نارنجی در تشخیص سرطان دهانه رحم

• هسته: آبی
• سلول‌های کراتین بالا: نارنجی
• سلول‌های سطحی: صورتی
• Erythrocytes: صورتی تیره
• سلول‌های پاراباسال: آبی/سبز
• سلول‌های واسطه: آبی/سبز
• سلول‌های متابلاستی: ممکن است شامل هر دو آبی / سبز و صورتی

منابع:

Papanicolaou′s Lösung 2a, Orange G-Lösung (OG 6) for cytology | Sigma-Aldrich (sigmaaldrich.com)

Papanicolaou stain – Wikipedia

Papanicolaou (PAP) Red Stain Kit (Cytology Stain) (ab150679) | Abcam

OG-6 | C16H10N2Na2O7S2 | ChemSpider