محیط کشت آسپاراژین براث

محیط کشت براث آسپاراژین (Asparagine Broth)

محیط کشت Asparagine Broth یک محیط تعریف شده از نظر شیمیایی است که فرمول اصلی آن بر پایه نمک‌های معدنی و آسپاراژین است. این محیط فاقد هرگونه منبع پیچیده کربن و نیتروژن (مانند پپتون یا عصاره) است، بنابراین رشد باکتری در آن کاملاً وابسته به توانایی متابولیک آن در هیدرولیز آسپاراژین و استفاده از محصولات حاصل است. برخی فرمولاسیون‌ها ممکن است حاوی گلیسرول به عنوان یک منبع کربن اضافی و قابل تخمیر برای تسهیل رشد اولیه باشند.

کاربرد اصلی این محیط در باکتری‌شناسی تشخیصی، به ویژه برای گونه‌های Mycobacterium است. توانایی استفاده از آسپاراژین یک صفت تاکسونومیک مهم برای تفکیک مایکوباکتریوم‌ها محسوب می‌شود. برای مثال، Mycobacterium tuberculosis معمولاً نتیجه مثبت می‌دهد (رشد قابل مشاهده و اغلب قلیایی شدن محیط)، در حالی که برخی گونه‌های غیربیماری‌زا مانند Mycobacterium smegmatis ممکن است نتیجه منفی داشته باشند. محیط کشت Asparagine Broth همچنین می‌تواند برای مطالعه خصوصیات متابولیک سایر باکتری‌های دشوارپرور که قادر به استفاده از اسیدهای آمینه به عنوان منابع اصلی هستند، به کار رود.

مشخصات کلیدی

• نوع محیط: مایع (براث)، بیوشیمیایی/تشخیصی (محیط حداقل)
• هدف کشت: ارزیابی توانایی باکتری در استفاده از آسپاراژین به عنوان تنها منبع کربن و نیتروژن، به ویژه در شناسایی مایکوباکتریوم‌ها
• حالت فیزیکی: پودر (حل شونده در آب مقطر)
• ترکیبات کلیدی: آسپاراژین، دی‌پتاسیم فسفات، منیزیم سولفات، گلیسرول (در برخی فرمولاسیون‌ها)، شناساگر pH (معمولاً فنول رد یا بروموتیمول بلو)
• شرایط کشت: محیط در لوله‌های درپیچ دار یا شل تقسیم می‌شود.
• شرایط انکوباسیون: 35 تا ۳۷ درجه سانتی‌گراد (برای پاتوژن‌ها) یا ۳۰ درجه سانتی‌گراد، به مدت طولانی (معمولاً ۷ تا ۱۴ روز یا بیشتر) با توجه به رشد کند باکتری‌های هدف.
• خوانش نتیجه: مثبت: رشد قابل مشاهده (کدورت) و اغلب تغییر رنگ شناساگر به قرمز/صورتی (قلیایی شدن ناشی از تولید آمونیاک). منفی: عدم رشد یا رشد بسیار ضعیف و عدم تغییر رنگ.
• کنترل کیفیت: مثبت: Mycobacterium tuberculosis (در شرایط ایمنی سطح ۳)، منفی: Mycobacterium smegmatis (در شرایط ایمنی سطح ۲).
• کاربرد اصلی: تست بیوشیمیایی در شناسایی مایکوباکتریوم‌ها و مطالعه متابولیسم باکتریایی.

نکات کاربردی و نگهداری

پودر محیط کشت Asparagine Broth به دلیل ترکیب شیمیایی دقیق، باید در شرایط خشک و خنک و در ظرف درب‌بسته نگهداری شود. محیط مایع آماده شده نسبتاً شفاف است. از آنجایی که تست اغلب برای باکتری‌های کندرشد مانند مایکوباکتریوم‌ها استفاده می‌شود، ضروری است از استریلیته کامل محیط اطمینان حاصل شود. لوله‌های تلقیح شده باید به خوبی درب‌بندی شده و برای جلوگیری از تبخیر در طول انکوباسیون طولانی مدت، در یک ظرف مرطوب قرار داده شوند. خوانش نتایج باید به صورت هفتگی و با مقایسه با یک لوله کنترل تلقیح نشده انجام گیرد. رشد ممکن است به صورت ذرات ریز یا یک لایه سطحی ظاهر شود. تغییر رنگ شناساگر نشانه قوی‌تری از یک واکنش مثبت است. به دلیل ماهیت بیماری‌زایی برخی از باکتری‌های هدف، کلیه مراحل کار با کشت‌های زنده باید مطابق با پروتکل‌های ایمنی زیستی مناسب انجام شود.