برند میرمدیابرند zistroyesh
برند میرمدیابرند zistroyesh
محیط کشت اوره آگار آماده - محیط کشت اوره آگار بیس - UREA AGAR
بزرگنمایی تصویر

محیط کشت اوره آگار بیس | محیط کشت اوره آگار آماده | UREA AGAR

7,200 ریال–180,000 ریال

محیط کشت اوره آگار آماده و محیط کشت اوره آگار بیس (UREA AGAR) از فراورده های مصرفی آزمایشگاه های تشخیص طبی توسط شرکت توسعه سلامت توان آفرین (تستا) توزیع می گردد.

تستا، UREA AGAR را در انواع بیس و آماده و با دو برند  عرضه می نماید.
SKU AG-O-310 دسته ها , , برچسب ها , , , ,
اوره آگار

محیط کشت اوره آگار بیس - محیط کشت اوره آگار آماده

UREA AGAR

فهرست مطالب

محیط کشت اوره آگار (UREA AGAR)

کاربرد: اوره آگار توسط کریستنسن در سال ۱۹۴۶ برای دیماشن باکیل انتریک توسعه داده شد.

 تستا شاپ محیط کش اوره آگار آماده و محیط کشت اوره آگار بیس عرضه می کند :

برندهای: زیست رویش – میرمدیا

انواع معرف اوره آگار: بیس اوره آگار – محیط کشت آماده اوره آگار

لیست قیمت محیط کشت اوره آگار بیس و محیط کشت اوره آگار آماده
لیست قیمت محیط کشت اوره آگار بیس و محیط کشت اوره آگار آماده

اوره آگار یک محیط  کشت جامد است که برای استفاده در روش های کیفی به منظور تمایز میکروارگانیسم های تجزیه کننده اوره و اورولیتیک بر اساس فعالیت اوره آز فرموله شده است.

اوره آگار در انواع (محیط کشت اوره آگار بیس – محیط کشت اوره آگار آماده) موجود می باشد.

تعدادی از باکتری های بیماری زا به دلیل داشتن آنزیم اوره آز می توانند اوره را هیدرولیز کرده و آمونیاک و دی اکسید کربن تولید کنند.

بنابراین هنگامی که میکروارگانیسم ها اوره را مصرف می‌کنند در طی انکوباسیون طولانی مدت، آمونیاک تشکیل می‌شود که باعث قلیایی شدن محیط و تولید رنگ قرمز – صورتی به واسطه معرف  فنل رد می شود.

لوله های آماده تست اوره آگار - محیط کشت اوره آگار آماده
لوله های آماده تست اوره آگار (محیط کشت اوره آگار آماده)

اوره و اوره آز چیست؟

اوره یک ترکیب نیتروژنی است که طی متابولیسم و سوخت و ساز پروتئین های بدن به عنوان مواد زائد در کبد تولید و از طریق کلیه ها همراه با ادرار دفع می شود. یک انسان بالغ سالم (به طور متوسط) ۲۵-۳۰ گرم اوره در روز دفع می کند. اوره یک ترکیب بدون رنگ و بو و یک ترکیب خوب برای دفع نیتروژن است زیرا محلول در آب است و سمیت کمتری نسبت به آمونیاک دارد.

بنابراین حتی شاخص اوره خون بالا برای سلامتی انسان خطرناک نیست. شاخص نیتروژن اوره خون معمولاً برای ارزیابی عملکرد کلیه استفاده می شود. اگر اوره خون بالا باشد، عملکرد کلیه ضعیف است. اگر نیتروژن اوره خون طبیعی باشد، عملکرد کلیه خوب است.

علاوه بر علل اختلال در عملکرد کلیه، علل زیادی وجود دارد که بر شاخص نیتروژن اوره خون تأثیر می گذارد، مانند: استرس، حمله قلبی، سوختگی، خونریزی دستگاه گوارش، انسداد جریان ادرار، کم آبی بدن…

افراد مبتلا به بیماری شدید کبدی، سوء تغذیه، زنان باردار ممکن است سطح اوره خونشان پایین باشد. محدوده طبیعی نیتروژن اوره در خون یا سرم ۵ تا ۲۰ میلی گرم در دسی لیتر یا ۱.۸ تا ۷.۱ میلی مول اوره در لیتر است. این دامنه به دلیل تغییرات طبیعی ناشی از مصرف پروتئین، کاتابولیسم پروتئین درون زا، وضعیت هیدراتاسیون، سنتز اوره کبدی و دفع کلیوی اوره گسترده است.

اوره آز، هیدرولیز اوره به دی اکسید کربن و آمونیاک را کاتالیز می کند. به طور عمده در دانه ها، میکروارگانیسم ها و بی مهرگان یافت می شود. در گیاهان، اوره آز یک هگزامر است – از شش زنجیره یکسان تشکیل شده است و در سیتوپلاسم قرار دارد. اوره آز در باکتری ها از دو یا سه زیر واحد مختلف تشکیل شده است که برای فعال شدن آن نیاز به اتصال دو یون نیکل در هر زیر واحد دارد.

بسیاری از گونه های باکتری اوره آز تولید می کنند، از جمله هلیکوباکتر پیلوری (باکتری مسئول زخم معده). با انجام این کار، هلیکوباکتر پیلوری PH شیره معده را از حدود pH 3 به pH 7، یعنی pH بهینه برای رشد باکتری، افزایش می دهد. اوره منبع عالی نیتروژن برای رشد باکتری ها است. برای جذب نیتروژن، باکتری ها اوره آز ترشح می کنند تا اوره را تجزیه کنند.

محیط کشت اوره آگار آماده به صورت مایع و محیط کشت اوره آگار بیس به صورت پودر است.

مراحل آنزیمی هیدرولیز اوره
فرمول - واکنش کلی هیدرولیز اوره
فرمول: واکنش کلی هیدرولیز اوره
واکنش کلی هیدرولیز اوره
فرمول - واکنش کلی هیدرولیز اوره
فرمول: واکنش کلی هیدرولیز اوره

محیط کشت اوره آگار

Christensen   در سال ۱۹۶۴ آزمایش باسیل روده ای را انجام داد. آزمایش Urea agar base نیز  که به منظور بررسی فعالیت آنزیم اوره آز انجام می شود ، به نام او نامگذاری شد. تولید اوره آز یک آزمایش افتراقی مهم در میکروبیولوژی است و در روش های استاندارد مشخص شده است.

کریستنسن یک محیط اوره آگار حاوی پپتون و دکستروز ابداع کرد که محتوای بافر آن کاهش یافته بود. این محیط از رشد سریع و زیاد بسیاری از باسیل های گرم منفی، روده ای و مشاهده آسان تولید اوره آز پشتیبانی می کند.

مهمترین میکروارکانیسم های تولیدکننده اوره آز :

گونه های پروتئوس ( (Proteus ، کلبسیلا (Klebsiella)، سودوموناس (Pseudomonas)و استافیلوکوک (Staphylococcus)

 معرف های محیط کشت اوره آز ( فرمول کلاسیک):

Gelatin Peptone

۱.۰ g

Urea

۲۰.۰ g

Dextrose

۱.۰ g

Phenol Red

۱۲.۰ mg

Sodium Chloride

۵.۰ g

Agar

۱۵.۰ g

Monopotassium Phosphate

۲.۰ g

Demineralized Water

۱۰۰۰.۰ ml

 

pH 6.8 +/- 0.2 (25°C)
  • این محیط حاوی اوره و نشانگر pH فنل قرمز است.
  • هنگامی که موجودات زنده از اوره استفاده می کنند، آمونیاک تشکیل می شود که محیط را قلیایی می کند و در نتیجه نشانگر pH را از زرد کم رنگ به صورتی-قرمز تبدیل می کند.
  • پپتون و کاهش محتوای بافر در این محیط باعث رشد سریع‌تر بسیاری از انتروباکتریاسه‌ها و کاهش زمان انکوباسیون می‌شود.
  • دکستروز موجود در این محیط برای از بین بردن واکنش های منفی کاذب و همچنین تحریک فعالیت اوره آز در ارگانیسم هایی که اوره را به آرامی هیدرولیز می کنند، عمل می کند.

پروتئوس معمولاً بسیار فعال‌تر است و معمولاً در عرض ۲ تا ۶ ساعت محیط را قرمز می‌کند، در حالی که موجوداتی که کمتر فعال هستند مانند کلبسیلا ممکن است به یک دوره زمانی ۲۴-۴۸ ساعته نیاز داشته باشند.

کنترل کیفیت


تمام لات نامبر های اوره آگار با استفاده از ارگانیسم های کنترل کیفیت زیر آزمایش شده و قابل قبول هستند. آزمایش کنترل کیفیت ارگانیسم ها باید مطابق با روش های کنترل کیفیت آزمایشگاهی انجام شود.

RESULTS

INCUBATION

CONTROL

positive

Aerobic, 24 h @ 35°C

Proteus mirabilis ATCC12453

positive

Aerobic, 24-48 h @ 30°C

Cryptococcus neoformans ATCC 34877

negative

Aerobic, 24 h @ 35°C

Escherichia coli ATCC 25922

تفسیر آزمایش

پس از انکوباسیون رشد رنگ صورتی  روشن ( فوشیا) را بعد از ۲، ۶ و ۲۴ ساعت و روزانه تا ۶ روز مشاهده می شود.

شدت رنگ نشان دهنده میزان هیدرولیز اوره است.

تست مثبت : رشد شدید رنگ صورتی-قرمز

 تست منفی : بدون تغییر رنگ

استفاده از محیط کشت اوره آگار بیس و محیط کشت اوره آگار آماده تاثیری در نتایج آزمایش ندارد و کاملاً مشابه است.

گونه های Proteus spp.، Morganella morganii، و برخی از گونه های Providencia stuartii معمولاً در عرض ۴-۵ ساعت واکنش را کامل می کنند (مثبت سریع) و بنابراین به راحتی از ارگانیسم‌های ضعیف‌تر تولید کننده اوره آز مانند گونه های کلبسیلا و انتروباکتر (مثبت تاخیری) قابل تمایز هستند یعنی پس از ۶ ساعت یک واکنش مثبت ضعیف در قسمت شیبدار ایجاد می شود که در طول انکوباسیون طولانی ( ۶ روز) واکنش شدید می شود. اگر ارگانیسم اوره آز منفی باشد، محیط کشت به رنگ زرد باقی می ماند مانند باکتری اشرشیاکلی.

(A) uninoculated  (تلقیح نشده)

(B) Proteus mirabilis (rapidly urease positive) (مثبت سریع)

(C) Klebsiella pneumoniae (delayed urease positive) (مثبت تاخیری)

(D) Escherichia coli (urease negative) (اوره آز منفی)

تفسیر آزمایش اوره آگار
تفسیر آزمایش اوره آگار - تلقطح نشده، مثبت سریع، مثبت تاخیری، اوره آز منفی

تهیه محیط کشت هیدراته

  1. ۲۹ گرم از محیط را در ۱۰۰ میلی لیتر آب غیر معدنی معلق کنید.
  2. کاملا مخلوط کرده و با فیلتراسیون استریل کنید.
  3. ۱۵ گرم آگار را در ۹۰۰ میلی لیتر آب غیر معدنی حل کنید و با هم زدن مکرر حرارت داده و به مدت یک دقیقه بجوشانید تا محیط کاملاً حل شود.
  4. اتوکلاو کرده و در دمای ۱۲۱ درجه سانتی گراد به مدت ۱۵ دقیقه استریل کنید.
  5. سپس تا دمای ۵۰-۴۵ درجه سانتیگراد خنک کنید و به صورت غیر عفونی پایه اوره آگار استریل را اضافه کنید.
  6. کاملا مخلوط کنید و در لوله های استریل بریزید.
  7. در حالت Slant   (اریب) خنک کنید تا لبه های عمیق تشکیل شود.

محدودیت ها

  1. واکنش قلیایی تولید شده در این محیط پس از انکوباسیون طولانی مدت ، ناشی از فعالیت اوره آز به دلیل استفاده از پپتون ها یا سایر پروتئین ها ممکن است واکنش های مثبت کاذب رخ دهد که PH را به دلیل هیدرولیز پروتئین و آزاد شدن بقایای اسید آمینه بیش از حد افزایش می دهد.
  2. برای از بین بردن هیدرولیز پروتئین احتمالی، آزمایش کنترل را با همان محیط آزمایش بدون اوره انجام دهید.
  3. محیط را اتوکلاو نکنید زیرا حرارت بیش از حد ممکن است مواد را تغییر دهد.  
  4. محیط را گرم یا دوباره گرم نکنید زیرا اوره خیلی راحت تجزیه می شود.
  5. به دلیل تنوع تغذیه ای، ممکن است با برخی از سویه ها مواجه شویم که رشد ضعیفی دارند یا در این محیط رشد نمی کنند.
  6. محیط کشت اوره آگار فعالیت سریع اوره آز را فقط در Proteus spp اوره آز مثبت تشخیص می دهد.
  7. اوره به نور حساس است و می تواند تحت اتوهیدرولیز قرار گیرد. در دمای ۲ تا ۸ درجه سانتیگراد در تاریکی نگهداری شود.

تفاوت محیط کشت اوره آگار با اوره براث

اوره آگار کریستنسن برای تشخیص فعالیت اوره آز در انواع میکروارگانیسم ها استفاده می شود.

اوره براث یک محیط مایع است که توسط استوارت (stuarts)  ساخته شد و عمدتاً برای تمایز گونه های پروتئوس استفاده می شود.

اگر از اوره براث استفاده شود؛ ارگانیسم‌های اوره‌آز مثبت سریع (Proteus spp.، Morganella morganii) یک واکنش مثبت قوی در عرض ۸ تا ۲۴ ساعت پس از انکوباسیون ایجاد می‌کنند، اما ارگانیسم‌های مثبت تاخیری (مانند انتروباکتر) به دلیل ظرفیت بافری بالای این محیط واکنش مثبت ایجاد نمی‌کنند.

محیط کشت اوره آگار میرمدیا از نوع بیس و در اوزان ۱۰۰ و ۵۰۰ گرم عرضه می گردد.

محیط کشت اوره آگار زیست رویش از نوع مدیم و آماده، محلول cc 2.5 عرضه می گردد.

منابع
  1. Christensen, W.B., 1946 Urea decomposition as a means of differentiating Proteus and paracolon cultures from each other and from Salmonella and Shigella types. J. Bacteriol. 52:461-46
  2. Ewing, W.H. 1986. Identification of Enterobacteriaceae. 4 th ed. Elsevier, New York, NY.
  3. MacFaddin, J.F. 1985. Media for Isolation-Cultivation-Identification-Maintenance of Medical Bacteria. Vol. 1. Williams & Wilkins, Baltimore, MD.
  4. Andrews, W. H., G. A. June, P. S. Sherrod, T. S. Hammack, and R. M. Amaguana. FDABacteriological analytical manual, 8th ed. AOAC International, Gaithersburg, MD.
  5. Clinical Microbiology Procedures Handbook, Fourth Edition. (2016). American Society of Microbiology. Clinical Microbiology Procedures Handbook | Wiley Online Books
  6.  

5 دیدگاه برای محیط کشت اوره آگار بیس | محیط کشت اوره آگار آماده | UREA AGAR

  1. رضا –

    عجب مقاله ای
    با اجازه کپی
    برا دانشگاه

  2. sima –

    بسیار جامع و کامل بود ممنون

  3. نیلوفر –

    متن عالی بود

  4. خدايي –

    عاااالیییییی مثل همیشه😍😍🤌🏻

  5. خدايي –

    عالی بود مرسی

دیدگاه خود را بنویسید

نشانی ایمیل شما منتشر نخواهد شد. بخش‌های موردنیاز علامت‌گذاری شده‌اند *