محیط کشت بایل پپتون ترانسپورت مدیوم 2

محیط انتقالی پپتون صفرا (Bile Peptone Transport Medium)

محیط کشت Bile Peptone Transport Medium که گاهی به عنوان محیط انتقالی Sachs نیز شناخته می‌شود، یک محیط چندمنظوره برای حفظ حیات باکتری‌های روده‌ای در حین انتقال به آزمایشگاه است. این محیط حاوی پپتون به عنوان منبع نیتروژن، نمک‌های صفراوی (بایل) برای مهار نسبی باکتری‌های گرم مثبت و فلور طبیعی روده که ممکن است بیش از حد رشد کنند، و گلوکز در مقدار کم به عنوان یک منبع انرژی سریع است. حالت نیمه‌جامد (به دلیل مقدار کم آگار) از حرکت فعال باکتری‌ها جلوگیری می‌کند ولی امکان انتشار مواد مغذی را فراهم می‌سازد. وجود یک محیط کاهنده (مانند سیستئین) به حفظ شرایط بی‌هوازی نسبی در عمق محیط کمک می‌کند و از اکسیداسیون باکتری‌های بی‌هوازی اختیاری جلوگیری می‌نماید.

این محیط برای استفاده در شرایط میدانی یا کلینیکی که امکان کشت فوری نمونه وجود ندارد، ایده‌آل است. نمونه مدفوع یا سواب رکتال مستقیماً درون محیط فرو برده می‌شود. نمک‌های صفراوی با کنترل رشد فلور همراه، شانس بازیافت پاتوژن‌های روده‌ای (مخصوصاً سالمونلا و شیگلا) را پس از انتقال و کشت در محیط‌های انتخابی مناسب (مانند SS Agar، XLD) افزایش می‌دهند. همچنین برای انتقال نمونه‌های مشکوک به Vibrio cholerae نیز می‌تواند استفاده شود.

مشخصات کلیدی

• نوع محیط: نیمه‌جامد (Semi-solid)، انتقالی/نگهدارنده (Transport)
• هدف کشت: حفظ و انتقال نمونه‌های مدفوع و رکتال برای جداسازی باکتری‌های روده‌ای بیماری‌زا (به ویژه سالمونلا و شیگلا)
• حالت فیزیکی: پودر (تهیه شده در آب مقطر، حرارت داده شده تا حل شود و سپس در لوله‌های پیچ‌دار توزیع و استریل می‌شود). محیط در لوله به صورت ستونی جامد است.
• ترکیبات کلیدی: پپتون، نمک‌های صفراوی (بایل)، گلوکز، سیستئین هیدروکلراید، آگار (به مقدار کم برای ایجاد حالت نیمه‌جامد)، شناساگر فنول رد (اختیاری).
• شرایط کشت (تلقیح نمونه): نمونه مدفوع (به اندازه یک نخود) یا سواب رکتال مستقیماً در عمق محیط در لوله فرو برده و کمی مخلوط می‌شود.
• شرایط نگهداری و انتقال: لوله‌های تلقیح‌شده باید در دمای اتاق (۱۵-۲۵ درجه سانتی‌گراد) نگهداری و در اسرع وقت (ترجیحاً ظرف ۲۴-۴۸ ساعت) به آزمایشگاه منتقل شوند. از قرار دادن در یخچال یا فریزر خودداری شود.
• خوانش نتیجه (پس از انتقال): محیط به خودی خود برای تشخیص استفاده نمی‌شود. پس از انتقال، یک لوپ از محیط (ترجیحاً از ناحیه ای که بیشترین رشد را نشان می‌دهد) بر روی محیط‌های انتخابی جامد کشت داده می‌شود.
• کنترل کیفیت: حفظ قابلیت زنده‌مانی و بازیافت Salmonella Typhimurium (ATCC 14028) و Shigella sonnei (ATCC 25931) پس از ۴۸ ساعت نگهداری در دمای اتاق. مهار نسبی رشد بیش از حد Escherichia coli.
• کاربرد اصلی: جمع‌آوری و انتقال نمونه‌های مدفوع در بررسی‌های اپیدمیولوژیک، مطالعات میدانی و شرایطی که کشت فوری امکان‌پذیر نیست.

نکات کاربردی و نگهداری

پودر Bile Peptone Transport Medium باید در جای خشک نگهداری شود. لوله‌های آماده محیط (قبل از تلقیح) را می‌توان در دمای ۲ تا ۸ درجه سانتی‌گراد برای چند ماه نگهداری کرد. قبل از استفاده، لوله باید به دمای اتاق برسد. برای تلقیح، از نمونه تازه (کمتر از ۲ ساعت از دفع) استفاده شود. اگر نمونه مدفوع آبکی است، می‌توان چند قطره از آن را به لوله اضافه کرد. پس از تلقیح، درب لوله محکم بسته شود. محیط نباید حاوی حباب هوا باشد. لوله‌های تلقیح‌شده باید برچسب‌گذاری شده و در یک ظرف محکم و ضد نشت برای انتقال بسته‌بندی شوند. از قرار دادن لوله‌ها در معرض نور مستقیم خورشید یا دمای بالا خودداری شود. حداکثر زمان نگهداری توصیه شده قبل از کشت مجدد معمولاً ۴۸ ساعت است، اگرچه برخی پاتوژن‌ها ممکن است تا ۷۲ ساعت نیز زنده بمانند. پس از رسیدن به آزمایشگاه، کشت بر روی محیط انتخابی باید در اسرع وقت انجام گیرد. محیط‌های استفاده شده باید به عنوان ضایعات میکروبیولوژیکی عفونی اتوکلاو شوند. این محیط برای ویروس‌ها یا انگل‌های روده‌ای مناسب نیست.