محیط کشت دکستروز براث

محیط کشت مایع دکستروز براث (Dextrose Broth)

محیط کشت Dextrose Broth یک محیط پایه مایع متشکل از دکستروز (گلوکز) و پپتون است. دکستروز یک منبع کربوهیدرات قابل تخمیر و در دسترس برای تامین سریع انرژی و کربن است، در حالی که پپتون، نیتروژن، اسیدهای آمینه و فاکتورهای رشد ضروری را فراهم می‌کند. سادگی این فرمولاسیون آن را به یک محیط همه‌کاره برای رشد اولیه، تهیه اینوکولوم، مطالعات تخمیر اولیه و نیز به عنوان پایه برای بسیاری از محیط‌های اختصاصی‌تر تبدیل کرده است. با توجه به وجود دکستروز، این محیط برای رشد مخمرها (مانند Saccharomyces cerevisiae) بسیار مناسب است و اغلب در فرآیندهای تخمیر و تحقیقات مربوط به متابولیسم قندها استفاده می‌شود. همچنین می‌تواند برای کشت باکتری‌های متعارف که قادر به استفاده از گلوکز هستند، مورد استفاده قرار گیرد.

کاربرد اصلی این محیط در آزمایشگاه‌های تحقیقاتی (مطالعات رشد میکروبی، فیزیولوژی و تخمیر)، صنایع تخمیری (تهیه کالچر استارتر)، کنترل کیفیت (بررسی آلودگی کلی در نمونه‌های مایع) و به عنوان محیط پایه برای تست‌های بیوشیمیایی مختلف (با افزودن معرف‌های خاص) می‌باشد.

مشخصات کلیدی

• نوع محیط: مایع (براث) عمومی و غیرانتخابی با منبع کربوهیدرات ساده
• هدف کشت: کشت و تکثیر مخمرها، کپک‌ها و باکتری‌های غیرسخت‌پرور در فاز مایع
• حالت فیزیکی: پودر (تهیه شده در آب مقطر، حرارت داده تا حل شود و سپس اتوکلاو). محیط مایع و شفاف است.
• ترکیبات کلیدی: دکستروز (گلوکز، معمولاً ۱۰-۲۰ گرم در لیتر)، پپتون (۵-۱۰ گرم در لیتر).
• pH نهایی: حدود ۶.۸ ± ۰.۲ (خنثی تا کمی اسیدی).
• شرایط کشت: معمولاً در لوله‌های آزمایش یا فلاسک‌های ارلن مایر. کشت می‌تواند به صورت ساکن (Static) یا روی شیکر (Shaking) برای تهویه بهتر انجام شود.
• شرایط انکوباسیون: برای قارچ‌ها: دمای ۲۰ تا ۲۵ درجه سانتی‌گراد به مدت ۲ تا ۵ روز. برای باکتری‌ها: دمای ۳۰ تا ۳۷ درجه سانتی‌گراد به مدت ۱۸ تا ۴۸ ساعت.
• خوانش نتیجه: رشد مثبت با مشاهده کدورت (Turbidity) در محیط، تشکیل رسوب سلولی در ته ظرف، یا تشکیل لایه/پلیت (Pellicle) در سطح (به ویژه توسط برخی مخمرها و کپک‌ها).
• کنترل کیفیت: رشد خوب و ایجاد کدورت واضح با سویه‌های مرجع مانند Saccharomyces cerevisiae ATCC 9763 (مخمر) و Escherichia coli ATCC 25922 (باکتری).
• کاربرد اصلی: محیط پایه برای کشت مایع مخمر و باکتری، تهیه مایه تلقیح (Inoculum) برای فرآیندهای بزرگ‌مقیاس، مطالعات تخمیر و رشد، و کنترل کیفیت میکروبیولوژیکی عمومی.

نکات کاربردی و نگهداری

پودر Dextrose Broth باید در جای خشک نگهداری شود. آماده‌سازی بسیار ساده است: پس از حل کردن در آب مقطر، محیط به مدت ۱۵ دقیقه در دمای ۱۲۱ درجه سانتی‌گراد اتوکلاو می‌شود. به دلیل وجود دکستروز، از حرارت‌دهی بیش از حد باید خودداری کرد تا از کاراملیزه شدن قند جلوگیری شود. محیط آماده را می‌توان در دمای ۲ تا ۸ درجه سانتی‌گراد نگهداری کرد. برای کشت مخمرها و کپک‌ها در حضور باکتری‌های رقابتی، می‌توان آنتی‌بیوتیک ضدباکتری (مانند کلرامفنیکل) پس از استریل‌سازی و سرد شدن محیط اضافه کرد. هوادهی (Aeration) با تکان دادن فلاسک‌ها، رشد هوازی مخمرها و بسیاری از باکتری‌ها را به شدت افزایش می‌دهد. این محیط ایبرسکو (IBRESco) با کیفیت و خلوص بالا، یک محیط پایه مایع قابل اعتماد و مقرون به‌صرفه برای اهداف عمومی کشت و تحقیقات اولیه فراهم می‌کند. برای مطالعات تخصصی‌تر (مانند تست‌های تخمیر خاص)، ممکن است نیاز به افزودن بافر، نمک‌ها یا معرف‌های دیگر باشد.