محیط کشت دکستروز کازئین پپتون آگار

محیط کشت آگار دکستروز کازئین پپتون (Dextrose Casein Peptone Agar)

محیط کشت Dextrose Casein Peptone Agar یک محیط انتخابی برای قارچ‌ها بر پایه ترکیب متعادلی از منابع کربن و نیتروژن است. دکستروز (گلوکز) منبع کربن و انرژی سریع‌التجزیۀ مخمرها و کپک‌ها است. کازئین هیدرولیز شده (کازئین پپتون) و پپتون سویا منابع پیچیده و باکیفیت نیتروژن، اسیدهای آمینه و پپتیدها را برای رشد بهینه تامین می‌کنند. تنظیم pH محیط در محدودۀ اسیدی (حدود ۵.۶) شرایط بهینه برای رشد اکثر مخمرها و کپک‌ها را فراهم کرده و همزمان رشد بسیاری از باکتری‌ها را مهار می‌نماید. این محیط اغلب حاوی کلرامفنیکل به عنوان عامل ضدباکتریایی انتخابی است تا از رشد فلور باکتریایی مزاحم در نمونه‌های غیراستریل (مانند غذاها) جلوگیری کند. تعادل مواد مغذی در این محیط، شمارش دقیق و رشد کلنی‌های بارز و قابل تشخیص مخمر و کپک را ممکن می‌سازد.

کاربرد اصلی این محیط در صنایع غذایی، دارویی و آرایشی-بهداشتی برای کنترل کیفیت و انجام آزمون‌های شمارش کلی مخمر و کپک (Total Yeast and Mold Count) مطابق با استانداردهای مرجع (مانند USP، EP و ISO) است. همچنین در پایش آلودگی قارچی محیط‌های تولید و نمونه‌های آب کاربرد دارد.

مشخصات کلیدی

• نوع محیط: جامد (آگار) انتخابی و غنی‌شده برای مخمر و کپک با pH اسیدی
• هدف کشت: شمارش، جداسازی و رشد مطلوب مخمرها و کپک‌ها در نمونه‌های غیراستریل حاوی فلور باکتریایی
• حالت فیزیکی: پودر (تهیه شده در آب مقطر، حرارت داده تا حل شود، اتوکلاو و سپس پس از خنک شدن، آنتی‌بیوتیک استریل اضافه می‌شود).
• ترکیبات کلیدی تغذیه‌ای: دکستروز (گلوکز)، کازئین هیدرولیز شده (کازئین پپتون)، پپتون سویا، آگار.
• ترکیبات کلیدی انتخابی: pH تنظیم‌شده روی ۵.۶ ± ۰.۲ (اسیدی). کلرامفنیکل (معمولاً ۰.۱ گرم در لیتر) برای مهار طیف وسیعی از باکتری‌های گرم مثبت و منفی.
• شرایط کشت: معمولاً به روش Pour Plate (ریختن نمونه رقیق‌شده در پلیت و افزودن محیط مذاب) یا Spread Plate (کشت سطحی) برای شمارش انجام می‌شود.
• شرایط انکوباسیون: دمای ۲۰ تا ۲۵ درجه سانتی‌گراد (دمای مطلوب برای قارچ‌های مزوفیل) به مدت ۵ تا ۷ روز. برخی پروتکل‌ها ممکن است انکوباسیون را تا ۱۴ روز ادامه دهند.
• خوانش نتیجه: شمارش کلنی‌های مخمر (گرد، براق، مرطوب، رنگ کرم) و کلنی‌های کپک (کرکی، پنبه‌ای، با رنگدانه‌های مختلف در میسلیوم یا اسپور). نتیجه به صورت واحد تشکیل کلنی در هر گرم یا میلی‌لیتر (CFU/g or CFU/mL) گزارش می‌شود.
• کنترل کیفیت: رشد خوب و تشکیل کلنی‌های متعدد با سویه‌های مرجع مخمر و کپک مانند Candida albicans ATCC 10231 و Aspergillus brasiliensis (niger) ATCC 16404. عدم رشد یا رشد بسیار ضعیف با سویه باکتریایی Escherichia coli ATCC 25922.
• کاربرد اصلی: آزمون کنترل کیفیت میکروبی محصولات غذایی (شیرینی، نوشیدنی، فرآورده‌های لبنی)، داروهای غیراستریل، مواد آرایشی و پایش بهداشت محیط در صنایع.

نکات کاربردی و نگهداری

پودر Dextrose Casein Peptone Agar باید در جای خشک نگهداری شود. پس از حل کردن و اتوکلاو محیط پایه، باید آن را تا حدود ۴۵-۵۰ درجه سانتی‌گراد سرد کرد. سپس محلول استریل شده آنتی‌بیوتیک (کلرامفنیکل) در شرایط آسپتیک اضافه و به خوبی مخلوط می‌شود. از حرارت دادن محیط پس از افزودن آنتی‌بیوتیک باید خودداری کرد. پلیت‌های آماده را می‌توان در دمای ۲ تا ۸ درجه سانتی‌گراد برای چند هفته نگهداری کرد. قبل از استفاده، پلیت‌ها باید به دمای اتاق برسند. برای نمونه‌های اسیدی قوی، ممکن است نیاز به خنثی‌سازی قبل از کشت باشد. انکوباسیون به مدت ۵ روز حداقل ضروری است، زیرا برخی مخمرها و کپک‌ها کند رشد هستند. محصول با کیفیت ایبرسکو (IBRESco)، با فرمولاسیون متعادل و انتخابی‌گری اثبات‌شده، یک محیط استاندارد، قابل اعتماد و پذیرفته‌شده جهانی برای پایش آلودگی قارچی در برنامه‌های تضمین کیفیت صنعتی فراهم می‌کند.