محیط کشت فرمنتیشن مدیوم استافیلوکوک و میکروکوکوس

محیط کشت تخمیر استافیلوکوک و میکروکوک (Fermentation Medium for Staphylococcus and Micrococcus)

محیط کشت Fermentation Medium for Staphylococcus and Micrococcus یک محیط پایه بر اساس پپتون فایزر (Peptone P) و عصاره مخمر است که حاوی شناساگر قرمز فنل (Phenol Red) می‌باشد. این ترکیب پایه، نیازهای تغذیه‌ای عمومی استافیلوکوک و میکروکوک را تأمین می‌کند اما فاقد هرگونه کربوهیدرات قابل تخمیر است. برای انجام تست، یک قند اختصاصی (مانند گلوکز، مانیتول، مالتوز، ترهالوز، فروکتوز، زایلوز و غیره) به صورت استریل به محیط اضافه می‌شود. اصل تست بر اساس توانایی باکتری در تخمیر آن قند خاص و تولید اسید است که باعث کاهش pH و تغییر رنگ شناساگر از قرمز (خنثی/قلیایی) به زرد (اسیدی) می‌گردد. تولید گاز (که نادر است) نیز با استفاده از لوله دورهام کوچک قابل مشاهده است. الگوی تخمیر قندهای مختلف، یک ابزار بیوشیمیایی کلیدی برای افتراق Staphylococcus aureus از سایر استافیلوکوک‌های کوآگولاز منفی و نیز تمایز استافیلوکوک‌ها از میکروکوک‌ها (که معمولاً قندها را تخمیر نمی‌کنند) محسوب می‌شود.

کاربرد اصلی این محیط در آزمایشگاه‌های میکروبیولوژی تشخیصی به عنوان بخشی از مجموعه تست‌های شناسایی برای کوکسی‌های گرم مثبت جدا شده از نمونه‌های بالینی، مواد غذایی یا محیطی است.

مشخصات کلیدی

• نوع محیط: مایع (براث) پایه برای تست تخمیر قندهای اختصاصی توسط استافیلوکوک و میکروکوک
• هدف کشت: بررسی توانایی تخمیر کربوهیدرات‌های مختلف توسط کوکسی‌های گرم مثبت به منظور کمک به شناسایی و افتراق
• حالت فیزیکی: پودر (تهیه شده در آب مقطر، حرارت داده تا حل شود، در لوله‌های کوچک توزیع و استریل می‌شود. قند اختصاصی معمولاً پس از استریل‌سازی اضافه می‌گردد). محیط پایه قرمز رنگ است.
• ترکیبات کلیدی پایه: پپتون فایزر (Peptone P) (منبع نیتروژن بهینه‌شده)، عصاره مخمر، قرمز فنل (Phenol Red) (شناساگر pH).
• افزودنی ضروری برای تست: یک قند یا الکل خاص (مانند مانیتول، گلوکز، ترهالوز، مالتوز) به غلظت نهایی ۰.۵-۱٪.
• شرایط کشت: لوله‌های حاوی محیط پایه و قند اضافه شده، با یک اینوکولوم سبک از کشت تازه باکتری (۱۸-۲۴ ساعته) تلقیح می‌شوند.
• شرایط انکوباسیون: دمای ۳۵ تا ۳۷ درجه سانتی‌گراد به مدت ۲۴ تا ۴۸ ساعت (گاهی تا ۷۲ ساعت برای واکنش‌های کند).
• خوانش نتیجه: تخمیر مثبت (تولید اسید): تغییر رنگ محیط از قرمز به زرد. تخمیر مثبت با تولید اسید و گاز: تغییر رنگ به زرد به همراه تشکیل حباب در لوله دورهام. عدم تخمیر (منفی): عدم تغییر رنگ (قرمز باقی می‌ماند) یا تغییر به قرمز تیره‌تر (قلیایی شدن نادر).
• کنترل کیفیت: برای محیط حاوی مانیتول: سویه مثبت: Staphylococcus aureus ATCC 25923 (تغییر به زرد). سویه منفی: Staphylococcus epidermidis ATCC 12228 (معمولاً منفی یا دیررس).
• کاربرد اصلی: تست بیوشیمیایی کلیدی در شناسایی استافیلوکوک‌ها (به ویژه تست تخمیر مانیتول برای S. aureus) و افتراق آنها از میکروکوک‌ها و دیگر کوکسی‌های گرم مثبت.

نکات کاربردی و نگهداری

پودر پایه Fermentation Medium for Staphylococcus and Micrococcus باید در جای خشک نگهداری شود. محیط پایه پس از اتوکلاو آماده است. قندهای مورد آزمایش باید به صورت جداگانه در آب مقطر حل و استریل (ترجیحاً با فیلتراسیون) شده و سپس به مقدار دقیق به محیط پایه استریل و سرد شده اضافه شوند. از حرارت دادن محیط حاوی قند خودداری کنید. بهتر است یک لوله کنترل حاوی محیط پایه بدون قند نیز تلقیح شود تا هرگونه تغییر رنگ ناشی از متابولیسم اجزای پایه مشخص گردد. تخمیر مانیتول یک نشانگر مهم برای Staphylococcus aureus کوآگولاز مثبت است (اگرچه برخی سویه‌های کوآگولاز منفی نیز می‌توانند مانیتول مثبت باشند). میکروکوک‌ها معمولاً تمام قندها را تخمیر نمی‌کنند. تفسیر تغییر رنگ باید با دقت انجام شود؛ رنگ نارنجی ممکن است نشانه مثبت ضعیف یا منفی باشد. محصول با کیفیت ایبرسکو (IBRESco)، با فرمولاسیون بهینه‌شده برای این گروه باکتریایی، نتایج واضح و قابل اعتمادی را برای این تست تشخیصی ارزشمند فراهم می‌آورد.