محیط کشت فلوئید تایوگلیکولات مدیوم 1

محیط کشت مایع تیوگلیکولات (Fluid Thioglycollate Medium)

محیط کشت Fluid Thioglycollate Medium (FTM) یک محیط پیچیده حاوی تیوگلیکولیک اسید (Thioglycolic Acid)، سیستئین، رسازورسین (Resazurin) و منابع مغذی غنی (پپتون کازئین، عصاره مخمر، عصاره گوشت، گلوکز) است. تیوگلیکولات و سیستئین به عنوان عوامل کاهنده قوی عمل کرده و پتانسیل اکسیداسیون-احیا (Eh) محیط را پایین می‌آورند و شرایط بی‌هوازی را در عمق لوله ایجاد می‌کنند. رسازورسین یک شناساگر ردوکس است که در حضور اکسیژن به رنگ صورتی درمی‌آید و در شرایط بی‌هوازی بی‌رنگ می‌شود. بنابراین، بخش بالایی لوله (در تماس با هوا) صورتی رنگ (هوازی) و بخش پایین آن بی‌رنگ (بی‌هوازی) است. این امر امکان رشد همزمان باکتری‌های هوازی در قسمت بالا، میکروآئروفیل‌ها در وسط و بی‌هوازی‌های اجباری در قسمت پایین لوله را فراهم می‌سازد. غنای محیط نیز از رشد بسیاری از باکتری‌های سخت‌پرور پشتیبانی می‌کند.

کاربرد اصلی این محیط در آزمایشگاه‌های میکروبیولوژی بالینی برای کشت خون و مایعات استریل بدن، در صنایع داروسازی برای آزمون استریلیتی (Sterility Test) مطابق با فارماکوپه‌ها (USP، Ph. Eur.) و در تحقیقات به عنوان یک محیط همه‌کاره برای نگهداری کشت میکروارگانیسم‌های مختلف است.

مشخصات کلیدی

• نوع محیط: مایع (براث) غنی‌شده با گرادیان اکسیژن برای کشت هوازی، میکروآئروفیل و بی‌هوازی
• هدف کشت: کشت همزمان باکتری‌های هوازی، بی‌هوازی و میکروآئروفیل در یک لوله
• حالت فیزیکی: پودر (تهیه شده در آب مقطر، حرارت داده تا حل شود، سپس در لوله‌های بلند توزیع و اتوکلاو می‌شود). قبل از اتوکلاو معمولاً به رنگ کهربایی است و پس از آن، بخش بالایی ممکن است صورتی رنگ شود.
• ترکیبات کلیدی: پپتون کازئین، عصاره مخمر، عصاره گوشت، گلوکز، تیوگلیکولات سدیم (کاهنده)، ال-سیستئین (کاهنده)، رسازورسین (شناساگر ردوکس)، آگار (مقدار کم، حدود ۰.۰۷۵٪ برای کاهش تلاطم و حفظ گرادیان).
• شرایط کشت: نمونه مستقیماً به لوله اضافه می‌شود. برای کشت خون یا آزمون استریلیتی، حجم مشخصی از نمونه به لوله حاوی محیط تلقیح می‌گردد. نیازی به تکان دادن نیست.
• شرایط انکوباسیون: دمای ۳۰ تا ۳۵ درجه سانتی‌گراد (برای آزمون استریلیتی) یا ۳۵ تا ۳۷ درجه سانتی‌گراد (برای کشت بالینی) به مدت ۱۴ روز برای آزمون استریلیتی یا تا زمانی که رشد مشاهده شود (معمولاً ۲-۷ روز).
• خوانش نتیجه: رشد مثبت: ایجاد کدورت (Turbidity)، تشکیل رسوب، پلیت (pellicle) در سطح، تولید گاز یا تغییر رنگ رسازورسین. محل رشد در لوله (بالا، وسط، پایین) نشان‌دهنده نیاز اکسیژنی میکروارگانیسم است. هوازی: رشد در بخش صورتی بالا. بی‌هوازی: رشد در بخش بی‌رنگ پایین. میکروآئروفیل: رشد در مرز بین دو ناحیه.
• کنترل کیفیت: رشد خوب هوازی با سویه Staphylococcus aureus ATCC 6538. رشد خوب بی‌هوازی با سویه Clostridium sporogenes ATCC 19404. عدم رشد در محیط کنترل (شاهد).
• کاربرد اصلی: محیط کشت مایع اصلی در آزمون استریلیتی داروها (USP <71>)، کشت خون و مایعات استریل در تشخیص بالینی و محیط نگهداری عمومی برای مجموعه‌های کشت میکروبی.

نکات کاربردی و نگهداری

پودر Fluid Thioglycollate Medium (FTM) باید در جای خشک نگهداری شود. آماده‌سازی شامل حل کردن و اتوکلاو است. پس از اتوکلاو، لوله‌ها باید به صورت عمودی و بدون تکان خوردن سرد شوند تا گرادیان اکسیژن حفظ شود. لوله‌ها نباید بیش از ۱/۴ بالایی آنها پر شود تا سطح تماس کافی با هوا وجود داشته باشد. محیط آماده را می‌توان در دمای ۲ تا ۲۵ درجه سانتی‌گراد نگهداری کرد. قبل از استفاده، باید بررسی شود که بیش از ۱/۴ بالایی لوله به دلیل اکسیداسیون صورتی نشده باشد؛ اگر چنین است، می‌توان لوله را به مدت کوتاهی در بن‌ماری گرم کرد تا اکسیژن خارج شود و رنگ صورتی از بین برود. برای آزمون استریلیتی، اعتبارسنجی محیط (تست باروری و تست مهار) برای هر سری و برای هر نوع محصول ضروری است. محصول با کیفیت ایبرسکو (IBRESco)، مطابق با استانداردهای فارماکوپیایی، یک محیط پایه قابل اعتماد و ضروری برای کاربردهای حیاتی کنترل کیفیت و تشخیصی فراهم می‌کند.