Description
معرفی محیط کشت لایزین دکربوکسیلاز
Lysine decarboxylase darvash
فروش و قیمت محیط کشت لایزین دکربوکسیلاز
کاربرد: بررسی تولید آنزیم دکربوکسیلاز عفونت را شناسایی می کند..
مواد مصرفی و فراورده های آزمایشگاهی در تستا
برند: دارواش
قیمت : ۹۵۰۰ تومان
شرکت توسعه سلامت توان آفرین (تستا)، محیط کشت لایزین دکربوکسیلاز را معرفی و عرضه می نماید.
برای خرید تست لیزین دارواش (محیط کشت لایزین دکربوکسیلاز) در تستا شاپ ثبت سفارش نمایید.
فهرست مطالب
واکنش های دکربوکسیلاسیون چیست؟
کربوکسیلزدایی یا دکربوکسیلاسیون از واکنش های کاربردی در شیمی آلی است. در این واکنش ترکیب حاوی گروه عاملی کربوکسیل به کربن دی اکسید و یک ترکیب سادهتر تجزیه میشود. در واقع معکوس واکنش کربوکسیلدار کردن (مرتبط با فرآیند فتوسنتز) رخ می دهد.
محیط Moeller دکربوکسیلاز قابلیت تولید آنزیم دکربوکسیلاز در باکتری ها را مشخص می نماید.
اساس تست
آنزیم دکربوکسیلاز باعث می گردد، در محیط کشت اسیدهای آمینه شکسته شده و تولید اسید آمینه و کربن دی اکسید کند. آمین های تولید شده دو ویژگی دارند:
- قلیایی هستند.
- موجب تغییر رنگ معرف pH موجود در محیط کشت میگردد.
اسید آمینه های مورد استفاده به محیط پایه Moeller به غلظت ۱٪ اضافه می شود. هر واکنش دکربوکسیلاسیون برای هر اسید آمینه اختصاصی می باشد.
شیوه های تست دکربوکسیلاز:
این تست ها اغلب شامل روش های مختلفی می باشد که در جدول زیر آمده است:
روش تست | واکنش دکربوکسیلاسیون |
دکربوکسیلاز | لیزین تبدیل به کاداورین (cadaverine) می شود |
اورتتین دکربوکسیلاز | اورنتین تبدیل به پوترسین (putrescine) می شود |
آرژنین دهیدرولاز | آرژنین ابتدا دی هیدرولیز شده و تشکیل سیترولین را می دهد و در نهایت سیترولین تبدیل به اورنتین می گردد |
نتیجه آزمایش:
واکنش منفی: برای این آزمایش لازم است از یک لوله کنترل (بلانک) حاوی گلوگز و فاقد اسید آمینه استفاده شود. محیط Moeller دارای معرف برمو کروزول به رنگ ارغوانی می باشد. اگر واکنش منجر به تغییر رنگ لوله کنترل ( بلانک ) به رنگ زرد باشد به معنی واکنش منفی است و تغییر رنگ نشان دهنده ی تخمیر قند توسط ارگانیسم می باشد.
واکنش مثبت: در مرحله ی اول واکنش، قند گلوکز تخمیر و کربوکسیلزدایی شده و ایجاد رنگ زرد می کند. در ادامه واکنش با کاهش pH شرایط فراهم می گردد تا اسید آمینه دکربوکسیله شود، این تغییرpH را افزایش داده و باعث تغییر رنگ به ارغوانی یا آبی می گردد.
محیط و معرف های لازم
محیط دکربوکسیلاز Moeller حاوی لیزین یا ۱۰% اورنتین و یا ۱ آرژنین (هرکدام از این این اسیدهای آمینه بطور جداگانه به محیط پایه اضافه میگردند).
روغن معدنی مایع استریل (روغن پارافین استریل)
روش کار
کشت باکتری: باکتری مورد آزمایش را در محیط دکربوکسیلاز حاوی اسید آمینه کشت دهید.
کشت باکتری شاهد: باکتری مورد نظر را جداگانه در لوله کنترل (بلانک) حاوی قند و فاقد اسید آمینه به عنوان شاهد کشت دهید.
اضافه کردن روغن استریل: در روی هر کدام از لوله های تلقیح شده روغن استریل مایع به ارتفاع نیم الی یک سانتی متر اضافه نمایید.
انکوباسیون: انکوباسیون لوله ها به مدت ۲۴ ساعت در دمای ۳۵ درجه سانتیگراد انجام شود.
بررسی نتایج: نتایج را بررسی نمایید.
تفسیر:
تغییر رنگ محیط به زرد: این نوع تغییر رنگ به معنی تخمیر گلوکز و نشان دهنده رشد باکتری های می باشد.
تغییر رنگ محیط به آبی – ارغوانی: به معنی نتیجه منفی بوده و نشان دهنده ربوکسیلاسیون است. توصیه می گردد با منفی بودن پاسخ، لوله ها را مجدداً برای ۲۴ ساعت انکوبه نموده و نتایج را یک بار دیگر مورد بررسی قرار دهید.
جدول کنترل کیفی و نتایج:
اسید آمینه | نوع کنترل | باکتری مورد نظر | نتایج |
آرژنین | کنترل مثبت | انتروباکتر کلوآکه | محیط قلیایی (رنگ بنفش باقی می ماند)، نتیجه + |
آرژنین | کنترل منفی | کلبسیلا پنمونیه | محیط اسیدی (رنگ زرد می شود)، نتیجه – |
لیزین | کنترل مثبت | کلبسیلا پنمونیه | محیط قلیایی (رنگ بنفش باقی می ماند)، نتیجه + |
لیزین | کنترل منفی | انتروباکتر کلوآکه | محیط اسیدی (رنگ زرد می شود)، نتیجه – |
اورنتین | کنترل مثبت | انتروباکتر کلوآکه | محیط قلیایی (رنگ بنفش باقی می ماند)، نتیجه + |
اورنتین | کنترل منفی | کلبسیلا پنمونیه | محیط اسیدی (رنگ زرد می شود)، نتیجه – |
مهم: تمامی لوله های کنترل واکنش منفی (اسیدی) دارند.
مشخصات پوترسین
پاترسین یک ترکیب آلی با فرمول (CH₂)₄(NH₂)₂. یک جامد بی رنگ است که در نزدیکی دمای اتاق ذوب می شود. این است که به عنوان یک دی امین طبقه بندی شده است. همراه با کاداویرین، آن را تا حد زیادی مسئول بوی ناپاک گوشت putrefying است، اما همچنین به بوی ناخوشایند دیگر کمک می کند.
فرمول: C4H12N2
که جرم مولی آن: ۸۸.۱۵ g/mol
نقطه جوش: ۱۵۸.۵ درجه سانتی گراد
ChemSpider ID: ۱۳۸۳۷۷۰۲
طبقه بندی: ترکیب آلی
مشخصات کاداورین
کاداورین یک ترکیب آلی با فرمول (CH₂)₅(NH₂)₂. طبقه بندی شده به عنوان دی امین، آن را یک مایع بی رنگ با بوی ناخوشایند است. این است که در مقادیر کمی در موجودات زنده وجود دارد اما اغلب با putrefaction بافت حیوانی همراه است.
فرمول: C5H14N2
که جرم مولی آن: ۱۰۲.۱۸ g/mol
نقطه جوش: ۱۷۹ درجه سانتی گراد
چگالی: ۸۷۰ kg/m
نقطه ذوب: ۹ درجه سانتی گراد
ChemSpider ID: 13866593
طبقه بندی: ترکیب آلی
مشخصات لیزین
Lysine یک α آمینه است که پیش زمینه ای برای بسیاری از پروتئین ها است. شامل یک گروه α آمینه، یک گروه اسید α-کربوهیدراتیک، و یک لسیل زنجیره ای جانبی است که آن را به عنوان یک اسید آمینه اساسی، شارژ شده، آلیفاتیک طبقه بندی می کند.
فرمول: C6H14N2O2
IUPAC ID: Lysine
که جرم مولی آن: ۱۴۶.۱۹ g/mol
شناسه ChemSpider: ۸۴۳
نقطه جوش: ۳۱۱.۵ درجه سانتی گراد
محلول در: آب
طبقه بندی: آمینو اسید
جهت تشخیص باکتری ها از محیط کشت لایزین دکربوکسیلاز توصیه می گردد.
تستا عرضه کننده انواع کیت های آزمایشگاهی و لوازم مصرفی آزمایشگاهی و تست لیزین دارواش
- Amino Acid Decarboxylase Test - Procedure, Uses and Interpretation (microbiologyinfo.com)
Lysine decarboxylase - Wikipedia
Reviews
There are no reviews yet.