محیط کشت گلوکز یست اکسترکت پپتون آگار 2

محیط کشت آگار پپتون عصاره مخمر گلوکز (GYEP Agar)

محیط کشت Glucose Yeast Extract Peptone (GYEP) Agar یک محیط جامد غنی است که فرمولاسیون متعادل و کاملی دارد. این محیط سه جزء اصلی تغذیه‌ای را یکجا ارائه می‌دهد: گلوکز به عنوان منبع کربن و انرژی بهینه و قابل تخمیر، عصاره مخمر به عنوان منبع غنی ویتامین‌های گروه B، نوکلئوتیدها و فاکتورهای رشد پیچیده، و پپتون به عنوان منبع نیتروژن، اسیدهای آمینه و پپتیدها. این ترکیب باعث می‌شود محیط GYEP برای کشت میکروارگانیسم‌هایی که نیازهای تغذیه‌ایی پیچیده یا نامشخص دارند، ایده‌آل باشد. این محیط به ویژه در میکروبیولوژی صنعتی و تحقیقاتی برای کشت سویه‌های تولیدکننده آنزیم، آنتی‌بیوتیک، یا سایر متابولیت‌های ثانویه، و نیز برای نگهداری کشت‌های استاندارد ارزشمند است. همچنین به دلیل شفافیت و پشتیبانی خوب از اسپورزایی، برای مطالعات مورفولوژیکی باکتری‌ها و قارچ‌ها مناسب است.

کاربرد اصلی آن در بانک‌های میکروبی، آزمایشگاه‌های تحقیقاتی در زمینه فیزیولوژی میکروبی، تخمیر و زیست‌فناوری، و نیز به عنوان یک محیط پایه قوی برای تهیه محیط‌های اختصاصی‌تر می‌باشد. محیط GYEP اغلب با تنظیم pH بهینه برای ارگانیسم هدف (معمولاً خنثی تا کمی اسیدی) استفاده می‌شود.

مشخصات کلیدی

• نوع محیط: جامد (آگار)، غنی‌کننده عمومی و همه‌کاره با ارزش تغذیه‌ای بالا
• هدف کشت: کشت و نگهداری طیف وسیعی از میکروارگانیسم‌ها شامل باکتری‌ها (گرم مثبت و منفی)، قارچ‌ها، مخمرها و اکتینومیست‌ها
• حالت فیزیکی: پودر (حاوی پپتون، عصاره مخمر، گلوکز و آگار) که پس از حل کردن در آب مقطر و اتوکلاو، در پلیت یا لوله ریخته می‌شود.
• ترکیبات کلیدی: پپتون، عصاره مخمر، گلوکز (دکستروز)، آگار، منیزیم سولفات و پتاسیم فسفات در برخی فرمولاسیون‌ها (به عنوان نمک‌های معدنی)
• مزیت کلیدی: ارائه ترکیب کامل و متعادل از کربن (گلوکز)، نیتروژن (پپتون) و فاکتورهای رشد (عصاره مخمر) در یک محیط واحد.
• شرایط کشت: کشت به روش‌های متداول سطحی (Streak یا Spread) برای جداسازی یا به صورت نقطه‌ای برای نگهداری انجام می‌شود. برای کشت مایع، آگار حذف می‌شود (GYEP Broth).
• شرایط انکوباسیون: بسته به میکروارگانیسم هدف: برای باکتری‌ها معمولاً ۳۰-۳۷ درجه سانتی‌گراد به مدت ۲۴-۴۸ ساعت؛ برای قارچ‌ها و اکتینومیست‌ها ۲۵-۳۰ درجه سانتی‌گراد به مدت ۳-۱۴ روز.
• خوانش نتیجه: رشد میکروبی به صورت تشکیل کلونی‌های سالم و با اندازه مناسب مشاهده می‌شود. مورفولوژی کلونی (شکل، رنگ، بافت) برای شناسایی اولیه قابل استفاده است. این محیط برای تست‌های تشخیصی بیوشیمیایی طراحی نشده است.
• کنترل کیفیت: سویه Escherichia coli ATCC 25922: رشد انبوه و خوب. سویه Saccharomyces cerevisiae ATCC 9763: رشد خوب مخمری. سویه Bacillus subtilis ATCC 6633: رشد خوب با اسپورزایی.
• کاربرد اصلی: محیط پایه غنی برای تحقیقات میکروبیولوژی، نگهداری کشت در بانک‌های میکروبی، مطالعات تولید متابولیت‌های ثانویه و کشت میکروارگانیسم‌هایی با نیازهای تغذیه‌ای پیچیده یا ناشناخته.

نکات کاربردی و نگهداری

پودر محیط GYEP Agar ایبرسکو (IBRESco) را در جای خشک و خنک نگهداری کنید. برای تهیه، پودر را در آب مقطر حل کرده و با حرارت ملایم به طور کامل هم بزنید تا محلول شود. از جوشاندن شدید یا طولانی‌مدت به دلیل وجود گلوکز خودداری کنید تا از کاراملیزه شدن جلوگیری شود. پس از اتوکلاو، محیط را می‌توان در حمام آب ۴۵-۵۰ درجه سانتی‌گراد نگه داشت. در صورت نیاز به محیط انتخابی برای قارچ‌ها، می‌توان آنتی‌بیوتیک‌های ضدباکتری (مانند کلرامفنیکل با غلظت ۵۰-۱۰۰ میلی‌گرم در لیتر) را پس از اتوکلاو و خنک شدن محیط، به صورت استریل اضافه نمود. پلیت‌های آماده را می‌توان در کیسه‌های پلاستیکی بسته‌بندی و در دمای ۲ تا ۸ درجه سانتی‌گراد برای چند هفته نگهداری کرد. قبل از استفاده، پلیت‌ها باید به دمای اتاق رسیده و رطوبت سطحی آنها تبخیر شده باشد. این محیط به دلیل غنی بودن، می‌تواند رشد سریع و انبوه باکتری‌ها را باعث شود، بنابراین برای جداسازی از نمونه‌های بسیار آلوده ممکن است چالش‌برانگیز باشد. pH محیط را می‌توان قبل از اتوکلاو مطابق نیاز ارگانیسم هدف تنظیم کرد (معمولاً pH 7.0-7.2 برای باکتری‌ها و ۵.۵-۶.۵ برای بسیاری از قارچ‌ها). برای تهیه محیط مایع (براث)، آگار از فرمولاسیون حذف می‌شود. در کشت اکتینومیست‌ها، ممکن است دوره انکوباسیون طولانی‌تر باشد و برای جلوگیری از خشک شدن محیط، از پارافیلم استفاده شود. این محیط یک انتخاب عالی برای رشد اولیه میکروارگانیسم‌های جدا شده از محیط‌های طبیعی قبل از انتقال به محیط‌های حداقل (Minimal Media) برای مطالعات متابولیکی است.