محیط کشت یوگون آگار

محیط کشت غنی شده یوگن آگار (Eugon Agar)

محیط کشت Eugon Agar یک محیط پیچیده با فرمولاسیونی بر پایه عصاره مخمر، کازئین هیدرولیز شده و پپتون است که حاوی طیف وسیعی از ویتامین‌ها، اسیدهای آمینه و فاکتورهای رشد ضروری می‌باشد. اصطلاح “Eugon” به معنای “تغذیه خوب” است و نشان‌دهنده توانایی این محیط در حمایت از رشد میکروارگانیسم‌های دارای نیازهای تغذیه‌ای دشوار است. این محیط فاقد هرگونه ماده انتخابی یا افتراقی است و بنابراین به عنوان یک محیط غنی‌ساز (Enrichment) پایه همه‌کاره عمل می‌کند. برای تهیه محیط‌های اختصاصی‌تر مانند شکلات آگار یا بلاد آگار، خون گرم شده یا گرم نشده به این محیط پایه اضافه می‌شود. همچنین ممکن است برای اهداف خاص، آنتی‌بیوتیک‌ها یا سایر مواد افزودنی به آن اضافه گردد.

کاربرد اصلی این محیط در آزمایشگاه‌های میکروبیولوژی تشخیصی بالینی به عنوان پایه برای تهیه محیط‌های کشت خون‌دار با کیفیت بالا برای جداسازی پاتوژن‌های تنفسی، باکتری‌های سخت‌پرور از نمونه‌های استریل (مانند مایع مغزی-نخاعی، خون) و نیز در کشت بی‌هوازی‌ها است. همچنین در تحقیقات برای کشت میکروارگانیسم‌های حساس کاربرد دارد.

مشخصات کلیدی

• نوع محیط: جامد (آگار) بسیار غنی‌شده و غیرانتخابی برای باکتری‌های سخت‌پرور
• هدف کشت: فراهم آوردن بستر تغذیه‌ای بهینه برای کشت باکتری‌های سخت‌پرور (Fastidious) و به عنوان پایه برای محیط‌های خون‌دار
• حالت فیزیکی: پودر (تهیه شده در آب مقطر، حرارت داده تا حل شود و سپس اتوکلاو). محیط پایه شفاف تا نیمه شفاف است.
• ترکیبات کلیدی غنی‌ساز: عصاره مخمر (منبع غنی ویتامین‌های B)، کازئین هیدرولیز شده (منبع اسیدهای آمینه و پپتیدها)، پپتون، گلوکز، سیستئین هیدروکلراید (کاهنده/عامل رشد)، نمک‌ها، آگار.
• افزودنی‌های رایج: خون گوسفند، اسب یا خرگوش (۵-۱۰٪) برای تهیه بلاد آگار یا شکلات آگار (با گرم کردن). گاهی همین (Hemin) و نیکوتین آمید آدنین دی‌نوکلئوتید (NAD) نیز برای رشد Haemophilus اضافه می‌شود.
• شرایط کشت: به عنوان محیط پایه، پس از افزودن خون یا سایر مواد، برای کشت سطحی (Streak) نمونه‌های بالینی استفاده می‌شود.
• شرایط انکوباسیون: بسته به ارگانیسم هدف: ۳۵-۳۷ درجه سانتی‌گراد، در اتمسفر حاوی ۵-۱۰٪ CO₂ (برای کاپنوفیل‌ها مانند نایسریا و برخی استرپتوکوک‌ها) یا در شرایط بی‌هوازی (برای بی‌هوازی‌های سخت‌پرور). مدت زمان معمولاً ۲۴-۴۸ ساعت است، اما ممکن است برای برخی میکروارگانیسم‌ها بیشتر طول بکشد.
• خوانش نتیجه: رشد خوب و تشکیل کلنی‌های مشخص باکتری‌های سخت‌پرور که ممکن است روی محیط‌های معمولی رشد ضعیفی دارند. مشاهده همولیز (آلفا، بتا، گاما) در صورت افزودن خون.
• کنترل کیفیت: رشد عالی با سویه‌های سخت‌پرور مانند Haemophilus influenzae ATCC 10211 (نیازمند عوامل X و V) یا Streptococcus pneumoniae ATCC 6305 در صورت افزودن خون مناسب. رشد خوب با سویه‌های معمولی مانند Staphylococcus aureus ATCC 25923 نیز انتظار می‌رود.
• کاربرد اصلی: تهیه محیط‌های کشت خون‌دار و شکلات آگار با کیفیت بالا در آزمایشگاه‌های تشخیص پزشکی، تحقیقاتی و صنعتی برای کشت پاتوژن‌های حساس.

نکات کاربردی و نگهداری

پودر Eugon Agar باید در جای خشک نگهداری شود. آماده‌سازی شامل حل کردن، اتوکلاو و سپس سرد کردن تا ۴۵-۵۰ درجه سانتی‌گراد است. در این مرحله، افزودنی‌های استریل (مانند خون، همین، NAD) در شرایط آسپتیک اضافه و به آرامی مخلوط می‌شوند. برای تهیه شکلات آگار، مخلوط حاوی خون باید تا حدود ۸۰-۸۵ درجه سانتی‌گراد حرارت داده شده و سپس به سرعت خنک شود. پلیت‌های آماده را می‌توان در دمای ۲ تا ۸ درجه سانتی‌گراد برای چند هفته نگهداری کرد. قبل از استفاده، پلیت‌ها باید به دمای اتاق برسند. این محیط به دلیل غنای بالا، مستعد آلودگی قارچی است؛ بنابراین باید در شرایط استریل تهیه و نگهداری شود. محصول با کیفیت بالا از ایبرسکو (IBRESco)، با فرمولاسیون ثابت و مواد اولیه با خلوص عالی، پایه‌ای مطمئن برای تهیه محیط‌های حیاتی تشخیصی فراهم می‌کند که بازیابی بهینه پاتوژن‌های مهم بالینی را تضمین می‌نماید.