محیط کشت یوگون براث

محیط کشت مایع غنی‌شده یوگن براث (Eugon Broth)

محیط کشت Eugon Broth نسخه فاقد آگار (مایع) محیط Eugon Agar است. فرمولاسیون آن بر پایه عصاره مخمر، کازئین هیدرولیز شده و پپتون بنا شده و حاوی طیف گسترده‌ای از ویتامین‌های گروه B، اسیدهای آمینه، پپتیدها و فاکتورهای رشد ضروری است. اصطلاح “Eugon” (به معنای تغذیه خوب) بیانگر توانایی این محیط در حمایت از رشد میکروارگانیسم‌های حساس و سخت‌پرور است که ممکن است در محیط‌های معمولی رشد ضعیفی داشته یا اصلاً رشد نکنند. این محیط مایع فاقد هرگونه مهارکننده است و بنابراین به عنوان یک محیط غنی‌ساز (Enrichment) عمومی قوی برای بازیابی باکتری‌ها از نمونه‌های پیچیده یا دارای تعداد کم سلول (مانند خون، مایع مغزی-نخاعی) عمل می‌کند. همچنین اغلب به عنوان محیط پایه برای افزودن خون یا سایر مکمل‌ها (مانند همین و NAD برای هموفیلوس) و تهیه محیط‌های مایع تخصصی‌تر استفاده می‌گردد.

کاربرد اصلی این محیط در آزمایشگاه‌های تشخیصی بالینی برای کشت خون (Blood Culture)، کشت مایعات استریل بدن و غنی‌سازی نمونه‌هایی که مشکوک به حضور پاتوژن‌های سخت‌پرور هستند، می‌باشد. همچنین در تحقیقات میکروبیولوژی برای تهیه کشت‌های مایع با چگالی بالا و مطالعات فیزیولوژیک کاربرد دارد.

مشخصات کلیدی

• نوع محیط: مایع (براث) بسیار غنی‌شده و غیرانتخابی برای باکتری‌های سخت‌پرور
• هدف کشت: غنی‌سازی و کشت مایع باکتری‌های سخت‌پرور (Fastidious) و سایر میکروارگانیسم‌های حساس
• حالت فیزیکی: پودر (تهیه شده در آب مقطر، حرارت داده تا حل شود و سپس اتوکلاو). محیط مایع شفاف تا نیمه شفاف است.
• ترکیبات کلیدی غنی‌ساز: عصاره مخمر، کازئین هیدرولیز شده، پپتون، گلوکز، سیستئین هیدروکلراید (کاهنده و عامل رشد)، نمک‌ها.
• افزودنی‌های رایج: خون (برای کشت خون)، همین (Hemin) و نیکوتین آمید آدنین دی‌نوکلئوتید (NAD) (برای رشد هموفیلوس)، پی‌روکسال (ویتامین B6) و سایر فاکتورهای رشد خاص.
• شرایط کشت: معمولاً در بطری‌های کشت خون یا لوله‌های آزمایش حاوی محیط. نمونه (مانند خون) مستقیماً به محیط اضافه و مخلوط می‌شود.
• شرایط انکوباسیون: دمای ۳۵ تا ۳۷ درجه سانتی‌گراد، معمولاً به صورت همراه با تکان دادن (شیکر) برای بهبود هوادهی. مدت زمان بسته به نمونه: برای کشت خون معمولاً ۵ تا ۷ روز، برای سایر نمونه‌ها ۲۴ تا ۴۸ ساعت. برای برخی ارگانیسم‌ها ممکن است نیاز به اتمسفر CO₂ افزایش‌یافته باشد.
• خوانش نتیجه: رشد مثبت: ایجاد کدورت (Turbidity)، تشکیل رسوب، تولید گاز (حباب) یا تغییر رنگ (در صورت وجود شناساگر). در کشت خون، ممکن است توسط سیستم‌های اتوماتیک (مبتنی بر تولید CO₂) یا به صورت چشمی و روزانه بررسی شود.
• کنترل کیفیت: رشد خوب و سریع با سویه‌های سخت‌پرور مانند Haemophilus influenzae ATCC 10211 (در صورت افزودن عوامل X و V) و Streptococcus pneumoniae ATCC 6305. رشد عالی با سویه‌های معمولی مانند Staphylococcus aureus ATCC 29213 نیز انتظار می‌رود.
• کاربرد اصلی: محیط پایه برای سیستم‌های کشت خون، غنی‌سازی مایعات بدن برای پاتوژن‌های سخت‌پرور و تهیه مایه تلقیح (Inoculum) با چگالی بالا برای تست‌های حساسیت آنتی‌بیوتیکی و تحقیقات.

نکات کاربردی و نگهداری

پودر Eugon Broth باید در جای خشک نگهداری شود. آماده‌سازی ساده است و پس از اتوکلاو، محیط آماده مصرف یا برای افزودن مکمل‌ها (که باید استریل باشند) در دسترس است. هنگام استفاده برای کشت خون، معمولاً در بطری‌های خلأدار تجاری یا بطری‌های آزمایشگاهی مناسب ریخته می‌شود. نسبت نمونه به محیط (مثلاً ۱:۵ تا ۱:۱۰ برای خون) بسیار مهم است تا از رقیق شدن بیش از حد مهارکننده‌های طبیعی خون و همچنین تأمین مواد مغذی کافی اطمینان حاصل شود. برای بهبود بازیابی بی‌هوازی‌ها، ممکن است محیط با گاز نیتروژن یا مخلوطی از گازها قبل از استفاده تقویت شود. محیط آماده را می‌توان در دمای ۲ تا ۸ درجه سانتی‌گراد نگهداری کرد. محصول با کیفیت بالا از ایبرسکو (IBRESco)، با فرمولاسیون ثابت و مواد اولیه با کیفیت، یک محیط مایع پایه قابل اعتماد برای کاربردهای حیاتی تشخیصی و تحقیقاتی فراهم می‌کند که حساسیت تشخیص پاتوژن‌های مهم را به حداکثر می‌رساند.