محیط کشت یوگون LT100 آگار

محیط کشت غنی شده کم‌حجم یوگن ال‌تی ۱۰۰ آگار (Eugon LT100 Agar)

محیط کشت Eugon LT100 Agar یک فرمولاسیون پیشرفته و بهینه‌شده از محیط Eugon کلاسیک است که با کاهش حجم محیط در هر پلیت (معمولاً ۲۰-۲۵ میلی‌لیتر به جای ۴۰-۵۰ میلی‌لیتر معمول) و حفظ حداکثر غنای تغذیه‌ای، امکان شمارش دقیق‌تر کلنی‌ها را فراهم می‌آورد. این محیط حاوی منابع تغذیه‌ای پیچیده شامل عصاره مخمر، کازئین هیدرولیز شده، پپتون سویا و سیستئین است که همگی برای حمایت از رشد و بازیابی باکتری‌های سخت‌پرور و بالقوه آسیب‌دیده (مثلاً در اثر استرس ناشی از نگهدارنده‌ها یا شرایط نمونه) ضروری هستند. ویژگی “LT100” (Low Volume 100mm) نشان می‌دهد که این محیط برای استفاده در پلیت‌های ۱۰۰ میلی‌متری استاندارد با حجم کم محیط فرموله شده است. این طراحی باعث می‌شود کلنی‌ها به صورت مجزا و قابل شمارش رشد کنند، در حالی که مواد مغذی کافی برای حتی کندترین میکروارگانیسم‌ها نیز وجود دارد. این محیط اغلب برای تست‌های استریلیتی و شمارش میکروبی در صنایع داروسازی و کنترل کیفیت محصولات بیولوژیک استفاده می‌شود.

کاربرد اصلی این محیط در صنایع داروسازی و کنترل کیفیت محصولات بهداشتی-درمانی برای انجام آزمون‌های شمارش کلی میکروارگانیسم‌های زنده (Total Viable Count) و آزمون استریلیتی (Sterility Test) بر روی نمونه‌هایی مانند داروهای تزریقی غیراستریل، واکسن‌ها، مواد اولیه دارویی و محصولات پزشکی مطابق با دستورالعمل‌های فارماکوپیایی (مانند USP، Ph. Eur.) است.

مشخصات کلیدی

• نوع محیط: جامد (آگار) بسیار غنی‌شده، کم‌حجم و غیرانتخابی برای شمارش میکروارگانیسم‌های زنده
• هدف کشت: شمارش و بازیابی بهینه باکتری‌ها، قارچ‌ها و مخمرهای زنده، به ویژه سلول‌های آسیب‌دیده یا سخت‌پرور، در نمونه‌های دارویی و بیولوژیک
• حالت فیزیکی: پودر (تهیه شده در آب مقطر با کیفیت تزریقی، حرارت داده تا حل شود، سپس اتوکلاو و در پلیت‌های ۱۰۰ میلی‌متری استریل با حجم کم ریخته می‌شود). محیط پایه شفاف است.
• ترکیبات کلیدی غنی‌ساز: عصاره مخمر، پپتون سویا (Casein Soy Peptone)، کازئین هیدرولیز شده، سیستئین هیدروکلراید (به عنوان کاهنده و فاکتور رشد)، گلوکز، نمک‌ها، آگار.
• ویژگی فیزیکی: طراحی برای ریختن حجم کم (معمولاً ۲۰-۲۵ میلی‌لیتر) در پلیت‌های ۱۰۰ میلی‌متری، که باعث ایجاد لایه نازک و یکنواختی از آگار می‌شود.
• شرایط کشت: معمولاً به روش Pour Plate (نمونه با محیط مذاب مخلوط شده و در پلیت ریخته می‌شود) یا Spread Plate (نمونه بر سطح محیط جامد پخش می‌شود) انجام می‌گیرد.
• شرایط انکوباسیون: برای شمارش کلی: دمای ۳۰ تا ۳۵ درجه سانتی‌گراد برای باکتری‌ها به مدت ۳ تا ۵ روز و دمای ۲۰ تا ۲۵ درجه سانتی‌گراد برای قارچ‌ها و مخمرها به مدت ۵ تا ۷ روز (مطابق با دستورالعمل‌های فارماکوپیایی).
• خوانش نتیجه: شمارش کلنی‌های باکتریایی، مخمری و قارچی که روی سطح یا در عمق محیط رشد کرده‌اند. نتیجه به صورت واحد تشکیل کلنی در هر میلی‌لیتر یا گرم (CFU/mL or CFU/g) گزارش می‌شود.
• کنترل کیفیت: بازیابی عالی (Recovery) با سویه‌های آسیب‌دیده یا سخت‌پرور. رشد خوب و تشکیل کلنی‌های قابل شمارش با سویه‌های چالش مرجع مانند Staphylococcus aureus ATCC 6538، Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027، Bacillus subtilis ATCC 6633، Candida albicans ATCC 10231 و Aspergillus brasiliensis ATCC 16404.
• کاربرد اصلی: آزمون شمارش میکروبی و آزمون استریلیتی در کنترل کیفیت محصولات دارویی تزریقی غیراستریل، واکسن‌ها، محصولات بیولوژیک و مواد اولیه مطابق با استانداردهای USP <61>, USP <71> و Ph. Eur. 2.6.12, 2.6.13.

نکات کاربردی و نگهداری

پودر Eugon LT100 Agar باید در جای خشک و کنترل‌شده نگهداری شود. آماده‌سازی باید تحت شرایط کنترل‌شده و با استفاده از آب با کیفیت تزریقی (Water for Injection) انجام شود تا از آلودگی خارجی جلوگیری گردد. پس از اتوکلاو، محیط باید تا ۴۵-۵۰ درجه سانتی‌گراد سرد شود و سپس تحت شرایط آسپتیک و اغلب در هود جریان laminar، در پلیت‌های استریل ۱۰۰ میلی‌متری با حجم دقیق ریخته شود. پلیت‌های آماده را می‌توان در دمای ۲ تا ۸ درجه سانتی‌گراد برای مدت محدود و در بسته‌بندی مناسب نگهداری کرد. قبل از استفاده، پلیت‌ها باید به دمای اتاق برسند. اعتبارسنجی (Validation) روش شمارش با این محیط برای هر نوع محصول خاص، ضروری است تا از عدم وجود اثر بازدارندگی یا افزایشی (inhibition/stimulation) توسط نمونه اطمینان حاصل شود. محصول با کیفیت ممتاز از ایبرسکو (IBRESco)، مطابق با الزامات سخت‌گیرانه فارماکوپه، محیطی استاندارد، قابل تکرار و با قابلیت بازیابی عالی برای تضمین کیفیت و ایمنی محصولات حساس دارویی فراهم می‌کند.