محیط کشت D E نوترالایزینگ آگار

محیط کشت آگار خنثی‌کننده (D & E Neutralizing Agar)

محیط کشت D & E Neutralizing Agar یک محیط غنی شده (حاوی پپتون، عصاره مخمر و عصاره گوشت) است که با افزودن عوامل خنثی‌کننده اختصاصی مانند لسیتین، پلی‌سوربات (توئین) ۸۰ و هیستیدین تکمیل می‌گردد. این ترکیبات توانایی جذب و غیرفعال کردن طیف وسیعی از مواد شیمیایی ضد میکروبی رایج (مانند ترکیبات آمونیوم چهارتایی، فنول‌ها، کلر، ید و گلوتارآلدئید) را دارند. بنابراین، از مهار شدن رشد میکروارگانیسم‌های زنده باقی‌مانده پس از عملیات ضدعفونی جلوگیری کرده و امکان شمارش دقیق آنها را فراهم می‌کند.

کاربرد اصلی این محیط در آزمون کارایی ضدعفونی‌کننده‌ها و پایش میکروبیولوژیکی سطوح در محیط‌های حساس مانند خطوط تولید استریل داروها، واحدهای غذایی، بیمارستان‌ها و سالن‌های عمل جراحی است. همچنین برای بازیابی میکروارگانیسم‌ها از نمونه‌هایی که در محیط‌های حاوی مواد ضدعفونی‌کننده جمع‌آوری شده‌اند، ایده‌آل است.

مشخصات کلیدی

• نوع محیط: جامد (آگار) غنی شده حاوی ترکیبات خنثی‌کننده (Neutralizing Agents)
• هدف کشت: شمارش و بازیابی میکروارگانیسم‌های زنده از سطوح یا نمونه‌های حاوی باقیمانده مواد ضدعفونی‌کننده و ضدباکتریایی
• حالت فیزیکی: پودر (تهیه شده در آب مقطر، حرارت داده شده تا حل شود و سپس اتوکلاو).
• ترکیبات کلیدی تغذیه‌ای: پپتون، عصاره مخمر، عصاره گوشت، گلوکز، آگار.
• ترکیبات کلیدی خنثی‌کننده: لسیتین (برای خنثی کردن ترکیبات آمونیوم چهارتایی و فنول‌ها)، پلی‌سوربات ۸۰ (برای خنثی کردن فنول‌ها و یدوفورها)، هیستیدین (برای خنثی کردن مواد مبتنی بر جیوه و گلوترآلدئید).
• شرایط کشت: معمولاً به روش کشت سطحی (Contact Plate یا Spread Plate) برای نمونه‌برداری از سطوح، یا ریختن در پلیت برای تست غوطه‌وری (Immersion Test) نمونه‌های مایع استفاده می‌شود.
• شرایط انکوباسیون: دمای ۳۰ تا ۳۵ درجه سانتی‌گراد برای باکتری‌ها به مدت ۲ تا ۵ روز و دمای ۲۰ تا ۲۵ درجه سانتی‌گراد برای قارچ‌ها و مخمرها به مدت ۵ تا ۷ روز.
• خوانش نتیجه: شمارش کلنی‌های باکتریایی، قارچی یا مخمری رشد کرده روی پلیت. نتیجه به صورت واحد تشکیل کلنی در هر سطح (CFU/cm²) یا در هر حجم (CFU/mL) گزارش می‌شود. عدم رشد نشان‌دهنده اثربخشی ضدعفونی یا عدم حضور میکروارگانیسم زنده است.
• کنترل کیفیت: رشد مطلوب با سویه‌های مرجع مانند Staphylococcus aureus ATCC 6538 و Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027. همچنین تست عملکرد خنثی‌کنندگی با کشت این سویه‌ها در حضور غلظت زیرمهارکننده (Sub-inhibitory Concentration) یک ضدعفونی‌کننده استاندارد.
• کاربرد اصلی: اعتبارسنجی (Validation) و پایش روتین (Routine Monitoring) فرآیندهای نظافت و ضدعفونی در صنایع داروسازی (مطابق با دستورالعمل‌های USP و EP)، صنایع غذایی، مراکز بهداشتی-درمانی و تولید محصولات آرایشی-بهداشتی.

نکات کاربردی و نگهداری

پودر D & E Neutralizing Agar باید در جای خشک و خنک نگهداری شود. پس از حل کردن و اتوکلاو، محیط را تا حدود ۴۵-۵۰ درجه سانتی‌گراد سرد کرده و در پلیت‌های استریل (ترجیحاً پلیت‌های تماس استاندارد) بریزید. پلیت‌های آماده را می‌توان در دمای ۲ تا ۸ درجه سانتی‌گراد در بسته‌بندی مناسب برای جلوگیری از خشک شدن، برای چند هفته نگهداری کرد. قبل از استفاده، پلیت‌ها باید به دمای اتاق رسیده و سطح آنها خشک باشد. تأیید عملکرد خنثی‌کنندگی محیط برای ضدعفونی‌کننده‌های خاص مورد استفاده در فرآیند، یک مرحله ضروری در اعتبارسنجی است. از این محیط می‌توان برای تست‌های غوطه‌وری وسایل یا برای نمونه‌برداری از سطوح با استفاده از سواب (که سپس در محیط غوطه‌ور می‌شود) نیز استفاده کرد. محصول با کیفیت بالا از ایبرسکو (IBRESco)، با فرمولاسیون بهینه و قابل اعتماد، ابزاری ضروری برای برنامه‌های تضمین کیفیت و کنترل آلودگی در محیط‌های حساس تحت کنترل (Controlled Environments) فراهم می‌کند.