محیط کشت GC مدیوم بیس 1

محیط کشت پایه جی‌سی (GC Medium Base)

محیط کشت GC Medium Base یک محیط پایه پیچیده بر پایه پپتون و عصاره مخمر است که به طور ویژه برای رفع نیازهای غذایی باکتری‌های بسیار سخت‌پرور جنس Neisseria فرموله شده است. این محیط پایه فاقد هرگونه ماده انتخابی یا افتراقی است و به همین دلیل به عنوان یک بستر مغذی همه‌کاره برای تهیه محیط‌های تخصصی‌تر عمل می‌کند. برای تبدیل آن به یک محیط کشت کامل و مناسب برای نایسریا، افزودن موارد زیر ضروری است: هموگلوبین یا خون گرم شده (شکلات شده) که منبع ضروری فاکتورهای X (همین) و V (NAD) را فراهم می‌کند، و یک مکمل غنی‌کننده (مانند مکمل IsoVitalex یا Supplement B) که حاوی کوآنزیم‌ها، ویتامین‌ها و اسیدهای آمینه اضافی برای رشد بهینه است. اغلب آنتی‌بیوتیک‌های انتخابی مانند وانکومایسین، کولیستین، نیستاتین و تری متوپریم (VCNT) نیز برای مهار فلور طبیعی دستگاه تناسلی و سایر آلودگی‌ها به آن افزوده می‌شود تا محیط انتخابی (مانند Thayer-Martin یا Martin-Lewis Agar) ایجاد گردد.

کاربرد اصلی این محیط در آزمایشگاه‌های میکروبیولوژی تشخیصی بالینی به عنوان پایه برای تهیه محیط شکلات آگار غنی‌شده انتخابی جهت جداسازی Neisseria gonorrhoeae (عامل سوزاک) و Neisseria meningitidis (عامل مننژیت) از نمونه‌های بالینی مانند سواب‌های مجرای ادراری، دهانه رحم، حلق و مایع مغزی-نخاعی است.

مشخصات کلیدی

• نوع محیط: جامد (آگار) پایه غنی‌شده برای کشت نایسریا و باکتری‌های کاپنوفیل
• هدف کشت: فراهم آوردن بستر تغذیه‌ای پایه برای تهیه محیط‌های کامل کشت نایسریاهای بیماری‌زا
• حالت فیزیکی: پودر (تهیه شده در آب مقطر، حرارت داده تا حل شود، سپس اتوکلاو و پس از سرد شدن، مکمل‌ها اضافه می‌شوند). محیط پایه شفاف است.
• ترکیبات کلیدی پایه: پپتون ویژه، عصاره مخمر، مونو و دی‌پتاسیم فسفات، کلرید سدیم، آگار.
• افزودنی‌های ضروری برای محیط کامل: منبع هموگلوبین (خون گرم شده یا همولیزات گوسفند) و مکمل غنی‌کننده (IsoVitalex, Supplement B).
• افزودنی‌های انتخابی (برای محیط انتخابی): کوکتل آنتی‌بیوتیکی VCNT (وانکومایسین، کولیستین، نیستاتین، تری‌متوپریم) یا مشابه.
• شرایط کشت: محیط کامل در پلیت ریخته و سفت می‌شود. نمونه (سواب) به صورت مستقیم روی سطح کشت داده شده و استریک می‌شود.
• شرایط انکوباسیون: دمای ۳۵ تا ۳۷ درجه سانتی‌گراد در اتمسفر حاوی ۵-۱۰٪ دی‌اکسید کربن (CO₂) (شرایط کاپنوفیلیک) به مدت ۴۸ تا ۷۲ ساعت.
• خوانش نتیجه: مشاهده کلنی‌های کوچک، صاف، خاکستری-شفاف و محدب (برای نایسریا). در محیط غیرانتخابی، آلودگی‌های دیگر نیز ممکن است رشد کنند. در محیط انتخابی، کلنی‌های مشکوک نایسریا باید با تست‌های بیشتر (اکسیداز، رنگ‌آمیزی گرم، تست‌های بیوشیمیایی) تأیید شوند.
• کنترل کیفیت: رشد خوب و تشکیل کلنی‌های مشخص با سویه Neisseria gonorrhoeae ATCC 49226 در محیط کامل حاوی مکمل‌ها و تحت اتمسفر CO₂. عدم رشد در محیط پایه به تنهایی.
• کاربرد اصلی: پایه استاندارد برای تهیه محیط‌های شکلات آگار غنی‌شده و انتخابی مورد استفاده در تشخیص سوزاک و مننژیت مننگوکوکی در آزمایشگاه‌های تشخیص پزشکی.

نکات کاربردی و نگهداری

پودر GC Medium Base باید در جای خشک نگهداری شود. پس از اتوکلاو، محیط پایه باید تا حدود ۷۰-۸۰ درجه سانتی‌گراد سرد شود تا خون اضافه شده کاراملیزه (شکلاتی) گردد، یا تا ۵۰-۵۵ درجه سانتی‌گراد سرد شود اگر از همولیزات آماده استفاده می‌شود. سپس مکمل غنی‌کننده استریل و آنتی‌بیوتیک‌های انتخابی (در صورت نیاز) اضافه شده و به آرامی مخلوط می‌گردند. افزودن CO₂ به اتمسفر انکوباسیون برای رشد نایسریاها ضروری مطلق است. پلیت‌های آماده را می‌توان در دمای ۲ تا ۸ درجه سانتی‌گراد و در بسته‌بندی محکم برای چند هفته نگهداری کرد. قبل از استفاده، پلیت‌ها باید به دمای اتاق برسند. نمونه‌ها باید بلافاصله پس از جمع‌آوری کشت داده شوند زیرا نایسریاها نسبت به خشکی و تغییر دما بسیار حساس هستند. محصول با کیفیت بالا از ایبرسکو (IBRESco)، با فرمولاسیون بهینه، پایه‌ای مطمئن برای تهیه محیط‌های تشخیصی حساس و حیاتی برای این پاتوژن‌های مهم انسانی فراهم می‌کند.