محیط کشت GN براث هاینا 1

محیط کشت غنی‌سازی انتخابی جی‌ان حاجنا (GN Broth Hajna)

محیط کشت GN Broth (Hajna) یک محیط انتخابی بر پایه پپتون و مانیتول است که حاوی دزوکسی کولات سدیم و سیترات سدیم به عنوان عوامل انتخابی اصلی می‌باشد. دزوکسی کولات رشد باکتری‌های گرم مثبت و بسیاری از باکتری‌های گرم منفی غیرپاتوژن روده را مهار می‌کند. سیترات سدیم نیز به عنوان یک مهارکننده اضافی عمل می‌نماید. مانیتول به عنوان منبع کربن تخمیرشدنی، به برخی از پاتوژن‌ها (مانند برخی شیگلاها) برتری متابولیکی می‌دهد. نمک‌های فسفات نیز به عنوان بافر در محیط حضور دارند. این محیط به اندازه کافی انتخابی است تا رشد فلور طبیعی را محدود کند، اما در عین حال به اندازه کافی ملایم است تا به باکتری‌های پاتوژن آسیب‌دیده یا تحت استرس (مانند شیگلا که نسبت به محیط‌های انتخابی قوی بسیار حساس است) اجازه بازیابی و تکثیر دهد. از این رو، GN Broth اغلب به عنوان یک محیط غنی‌سازی اولیه (Primary Enrichment) برای شیگلا و همچنین سالمونلا در نظر گرفته می‌شود.

کاربرد اصلی این محیط در آزمایشگاه‌های تشخیص پزشکی برای جداسازی شیگلا و سالمونلا از نمونه مدفوع و در کنترل کیفیت مواد غذایی و آب برای ردیابی این پاتوژن‌ها است. این محیط بخشی از برخی پروتکل‌های استاندارد برای تشخیص شیگلا می‌باشد.

مشخصات کلیدی

• نوع محیط: مایع (براث) انتخابی برای غنی‌سازی اولیه شیگلا و سالمونلا
• هدف کشت: غنی‌سازی و افزایش حساسیت جداسازی شیگلا و سالمونلا از نمونه‌های دارای فلور طبیعی فراوان
• حالت فیزیکی: پودر (تهیه شده در آب مقطر، حرارت داده تا حل شود، سپس در لوله‌ها یا بطری‌ها توزیع و اتوکلاو می‌شود). محیط مایع و کهربایی رنگ است.
• ترکیبات کلیدی: پپتون، مانیتول، دزوکسی کولات سدیم، سیترات سدیم، فسفات سدیم (بافر)، کلرید سدیم.
• شرایط کشت: نمونه مدفوع (معمولاً به اندازه یک سواب یا مقدار کمی) مستقیماً به لوله حاوی ۱۰-۱۵ میلی‌لیتر محیط اضافه و مخلوط می‌شود.
• شرایط انکوباسیون: دمای ۳۵ تا ۳۷ درجه سانتی‌گراد به مدت ۶ تا ۱۲ ساعت (و نه بیشتر). انکوباسیون طولانی‌تر ممکن است منجر به رشد بیش از حد فلور رقابتی و کاهش بازیابی پاتوژن‌ها شود.
• خوانش نتیجه: رشد باکتری ممکن است با کدورت همراه باشد، اما نتیجه نهایی در این مرحله نیست. پس از انکوباسیون (معمولاً ۶-۸ ساعت)، از این کشت بر روی محیط‌های انتخابی-افتراقی جامد (مانند مک‌کانکی آگار، XLD آگار، هکتون انتریک آگار) زیرکشت داده می‌شود.
• کنترل کیفیت: رشد خوب شیگلا با سویه Shigella flexneri ATCC 12022. رشد خوب سالمونلا با سویه Salmonella Typhimurium ATCC 14028. مهار نسبی Escherichia coli.
• کاربرد اصلی: مرحله غنی‌سازی اولیه در روش‌های تشخیصی برای جداسازی شیگلا و سالمونلا از نمونه مدفوع در آزمایشگاه‌های بالینی.

نکات کاربردی و نگهداری

پودر GN Broth (Hajna) باید در جای خشک نگهداری شود. آماده‌سازی شامل حل کردن و اتوکلاو است. مدت زمان انکوباسیون بسیار مهم است: معمولاً ۶ تا ۸ ساعت کافی است و نباید از ۱۲-۱۸ ساعت تجاوز کند. انکوباسیون طولانی باعث رشد بیش از حد باکتری‌های رقابتی مقاوم‌تر و تولید اسید از مانیتول می‌شود که می‌تواند به سلول‌های حساس شیگلا آسیب برساند. حجم نمونه نسبت به محیط نباید زیاد باشد. زیرکشت بر روی محیط جامد باید پس از ۶-۸ ساعت انجام شود. این محیط برای غنی‌سازی Salmonella Typhi (تیفوئید) مناسب نیست. محصول با کیفیت ایبرسکو (IBRESco)، با فرمولاسیون دقیق، یک محیط غنی‌سازی انتخابی قابل اعتماد برای بهبود حساسیت تشخیص این پاتوژن‌های مهم روده‌ای فراهم می‌کند.