محیط کشت SCDLP20 براث 1

محیط کشت براث سویا کازئین دیجست لسیتین پلی‌سوربات ۲۰ (SCDLP20 Broth)

محیط کشت Soybean-Casein Digest Lecithin Polysorbate 20 Medium (SCDLP20) یک محیط خنثی‌کننده تخصصی است که بر پایه محیط مغذی Soybean-Casein Digest Medium (معادل Tryptic Soy Broth) ساخته شده و با لسیتین و پلی‌سوربات ۲۰ (Polysorbate 20) تقویت شده است. این ترکیب برای خنثی‌سازی (Neutralization) یا غیرفعال کردن طیف وسیعی از مواد ضد میکروبی باقی‌مانده در نمونه‌های دارویی، آرایشی یا نمونه‌های سطحی پس از عملیات ضدعفونی طراحی شده است. لسیتین در خنثی کردن ترکیبات آمونیوم چهارتایی (Quaternary Ammonium Compounds یا Quats) و ترکیبات فنلی بسیار موثر است. پلی‌سوربات ۲۰، یک سورفکتانت غیریونی با وزن مولکولی پایین‌تر از پلی‌سوربات ۸۰، به عنوان یک عامل خنثی‌کننده مکمل و نیز یک عامل ترکننده (Wetting Agent) عمل می‌کند که به انتشار بهتر مواد در محیط و تماس بهتر با میکروارگانیسم‌ها کمک می‌نماید. محیط مغذی پایه نیز شرایط بهینه را برای بازیابی و رشد میکروارگانیسم‌های احتمالی آسیب‌دیده یا تحت استرس فراهم می‌کند. انتخاب بین SCDLP20 و SCDLP80 اغلب بر اساس ماهیت خاص ماده بازدارنده موجود در نمونه یا مطابق با روش استاندارد آزمایشگاهی تعیین می‌شود.

کاربرد اصلی آن در صنایع داروسازی و آرایشی-بهداشتی مطابق با الزامات USP، Ph. Eur. و JP برای تست استریلیتی محصولات غیراستریل یا استریل، آزمون کارایی ضدعفونی‌کننده‌ها، و بازیابی میکروبی از سطوح، تجهیزات و مواد اولیه است.

مشخصات کلیدی

• نوع محیط: مایع (براث)، غنی، غیرانتخابی، با خاصیت خنثی‌کنندگی.
• هدف کشت: خنثی‌سازی باقی‌مانده مواد ضد میکروبی و احیای میکروارگانیسم‌ها در تست‌های کنترل کیفیت میکروبیولوژی، به ویژه زمانی که حضور مهارکننده‌هایی مانند ترکیبات آمونیوم چهارتایی یا فنلیک محتمل است.
• حالت فیزیکی: پودر (تهیه شده در آب مقطر، حرارت داده شده تا حل شود و سپس اتوکلاو می‌شود).
• ترکیبات کلیدی تغذیه‌ای/بازیافتی: هیدرولیزات کازئین، پپتون سویا، دکستروز، سدیم کلرید.
• ترکیبات کلیدی خنثی‌کننده: لسیتین (خنثی‌کننده اصلی برای Quats و فنل‌ها)، پلی‌سوربات ۲۰ (خنثی‌کننده مکمل و عامل ترکننده).
• مکانیسم عمل: غیرفعال کردن مواد ضد میکروبی از طریق تشکیل کمپلکس یا به دام افتادن در میسل‌های سورفکتانت، و فراهم آوری یک محیط مغذی برای ترمیم و تکثیر میکروارگانیسم‌های زنده باقی‌مانده.
• شرایط کشت: نمونه (محصول، شویه سطحی، یا رقت ماده ضدعفونی) مستقیماً به حجم مشخصی از محیط SCDLP20 اضافه و به خوبی مخلوط می‌شود تا خنثی‌سازی و رقیق‌شدن صورت پذیرد.
• شرایط انکوباسیون: برای تست استریلیتی: ۲۰ تا ۲۵ درجه سانتی‌گراد (برای قارچ‌ها) و ۳۰ تا ۳۵ درجه سانتی‌گراد (برای باکتری‌ها) به مدت حداقل ۱۴ روز. برای تست‌های بازیابی سریع‌تر: معمولاً ۳ تا ۵ روز. پایش روزانه از نظر کدورت ضروری است.
• خوانش نتیجه: مثبت (رشد/آلودگی): ایجاد کدورت در محیط در طول دوره انکوباسیون. منفی (عدم رشد): شفاف ماندن محیط. هرگونه کدورت باید زیرکشت و شناسایی شود.
• کنترل‌های کیفی ضروری: تست اعتبارسنجی خنثی‌سازی (Neutralization Validation): محیط باید در حضور حداکثر غلظت مورد انتظار ماده بازدارنده، قادر به حمایت از رشد میکروارگانیسم‌های شاخص (مانند Staphylococcus aureus ATCC 6538، Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027، Bacillus subtilis ATCC 6633، Candida albicans ATCC 10231، و Aspergillus brasiliensis ATCC 16404) باشد.
• کاربرد اصلی: محیط رقیق‌کننده-خنثی‌کننده در تست استریلیتی محصولات دارویی و دستگاه‌های پزشکی (طبق USP <71> و Ph. Eur. 2.6.1)، آزمون اثربخشی ضدعفونی‌کننده‌ها و آنتی‌سپتیک‌ها، و روش‌های استاندارد برای بازیابی میکروارگانیسم‌ها از سطوح (مانند روش سواب یا شستشو).

نکات کاربردی و نگهداری

پودر Soybean-Casein Digest Lecithin Polysorbate 20 Medium محصول ایبرسکو (IBRESco) باید در جای خشک و خنک نگهداری شود. برای تهیه، پودر را در آب با کیفیت مناسب (ترجیحاً آب قابل تزریق) حل کرده و به جوش آورید. پس از اتوکلاو، محیط را به آرامی تکان دهید. محیط آماده را می‌توان در دمای ۲ تا ۲۵ درجه سانتی‌گراد نگهداری کرد. قبل از استفاده روتین، اثربخشی خنثی‌کنندگی محیط برای سیستم خاص نمونه-بازدارنده باید به طور تجربی تأیید (Validated) شود. حجم محیط استفاده شده باید برای رقیق کردن نمونه تا زیر سطح مهارکنندگی (Minimum Inhibitory Concentration) و خنثی کردن کامل ماده بازدارنده کافی باشد. در تست استریلیتی، نمونه مستقیماً به فلاسک حاوی محیط اضافه می‌شود. انکوباسیون طولانی مدت برای اطمینان از رشد میکروارگانیسم‌های کندرشد ضروری است. پایش روزانه کدورت انجام شود. برای اطمینان از عدم وجود اثر بازدارنده باقی‌مانده، ممکن است در پایان دوره انکوباسیون، از محیط‌های به ظاهر منفی نیز زیرکشت گرفته شود. استفاده همزمان از کنترل رشد مثبت (محیط آلوده شده با میکروارگانیسم شاخص) و کنترل منفی (محیط بدون آلودگی) در هر سری آزمایش الزامی است. تفاوت اصلی با SCDLP80 در نوع پلی‌سوربات است که ممکن است بر اساس حلالیت یا اثربخشی در برابر مهارکننده‌های خاص انتخاب شود.