محیط کشت SCDLP80 براث 1

محیط کشت براث سویا کازئین دیجست لسیتین پلی‌سوربات ۸۰ (SCDLP80 Broth)

محیط کشت Soybean Casein Digest Lecithin Polysorbate 80 Medium (SCDLP80) یک محیط چندمنظوره است که عملکرد اصلی آن خنثی‌سازی (Neutralization) باقی‌مانده‌های مهارکننده‌های میکروبی (مانند مواد ضدعفونی‌کننده، آنتی‌بیوتیک‌ها یا مواد حفاظتی) و احیای (Recovery) میکروارگانیسم‌های بالقوه آسیب‌دیده در نمونه است. این محیط بر پایه محیط بسیار مغذی Soybean Casein Digest Medium (TSB) فرموله شده و با افزودن دو عامل خنثی‌کننده کلیدی تکمیل می‌گردد: لسیتین (یک فسفولیپید طبیعی) و پلی‌سوربات ۸۰ (توئین ۸۰) (یک سورفکتانت غیریونی). این ترکیبات به طور هم‌افزایی عمل می‌کنند تا طیف وسیعی از مهارکننده‌های رایج از جمله ترکیبات آمونیوم چهارتایی (Quaternary Ammonium Compounds)، ترکیبات فنلی، کلرهگزیدین، ستیل پیریدینیوم کلراید، و بسیاری از آنتی‌بیوتیک‌ها را خنثی کنند. محیط SCDLP80 همچنین به عنوان یک محیط غنی‌سازی اولیه عالی عمل می‌کند، زیرا مواد مغذی لازم برای بازیابی و رشد میکروارگانیسم‌های کم‌شمار یا آسیب‌دیده (از جمله باکتری‌ها، مخمرها و کپک‌ها) را فراهم می‌آورد.

این محیط به طور گسترده در صنایع داروسازی، آرایشی-بهداشتی و پزشکی مطابق با استانداردهای USP، Ph. Eur. و JP برای تست‌های استریلیتی (Sterility Test) محصولات تزریقی، پمادها، کرم‌ها و محلول‌ها، و همچنین در آزمون‌های کارایی ضدعفونی‌کننده‌ها (Disinfectant Efficacy Testing) و بازیابی میکروبی از سطوح یا تجهیزات استفاده می‌شود.

مشخصات کلیدی

• نوع محیط: مایع (براث)، غنی، غیرانتخابی، با خاصیت خنثی‌کنندگی.
• هدف کشت: خنثی‌سازی باقی‌مانده مواد ضد میکروبی و احیای میکروارگانیسم‌ها در تست‌های استریلیتی، کنترل کیفیت محصولات و سطوح.
• حالت فیزیکی: پودر (تهیه شده در آب مقطر، حرارت داده شده تا حل شود و سپس اتوکلاو می‌شود).
• ترکیبات کلیدی تغذیه‌ای/بازیافتی: هیدرولیزات کازئین، پپتون سویا (منابع عالی نیتروژن و ویتامین)، دکستروز، سدیم کلرید.
• ترکیبات کلیدی خنثی‌کننده: لسیتین (خنثی‌کننده ترکیبات فنلی و آمونیوم چهارتایی)، پلی‌سوربات ۸۰ (خنثی‌کننده ترکیبات فنلی، پارابن‌ها و افزایش‌دهنده حلالیت).
• مکانیسم عمل: جذب و به دام انداختن مولکول‌های مهارکننده توسط لسیتین و پلی‌سوربات ۸۰، و فراهم آوری محیطی مغذی برای ترمیم و رشد میکروارگانیسم‌های باقی‌مانده.
• شرایط کشت: نمونه (محصول، شویه سطحی، رقت‌های ماده ضدعفونی) مستقیماً به فلاسک یا لوله حاوی حجم مشخصی از محیط SCDLP80 اضافه و مخلوط می‌شود.
• شرایط انکوباسیون: ۲۰ تا ۲۵ درجه سانتی‌گراد (برای قارچ‌ها) و ۳۰ تا ۳۵ درجه سانتی‌گراد (برای باکتری‌ها) به مدت حداقل ۱۴ روز برای تست استریلیتی، یا ۳ تا ۵ روز برای تست‌های بازیابی. معمولاً به صورت روزانه از نظر کدورت بررسی می‌شود.
• خوانش نتیجه: مثبت (آلوده): ایجاد کدورت قابل مشاهده در محیط در طول دوره انکوباسیون. منفی (استریل/فاقد میکروارگانیسم قابل بازیابی): شفاف ماندن محیط پس از دوره کامل انکوباسیون. هر کدورت باید زیرکشت شود تا میکروارگانیسم شناسایی گردد.
• کنترل‌های کیفی ضروری: تست اثربخشی خنثی‌سازی (Neutralization Validation Test): محیط باید قادر به خنثی کردن حداکثر غلظت مورد انتظار مهارکننده و همچنین حمایت از رشد میکروارگانیسم‌های شاخص (مانند Staphylococcus aureus، Pseudomonas aeruginosa، Bacillus subtilis، Candida albicans، Aspergillus brasiliensis) باشد.
• کاربرد اصلی: محیط رقیق‌کننده-خنثی‌کننده اصلی در تست استریلیتی محصولات دارویی غیرمیکربیال (USP <71>, Ph. Eur. 2.6.1)، تست کارایی ضدعفونی‌کننده‌ها و آنتی‌سپتیک‌ها، و بازیابی میکروارگانیسم‌ها از سطوح، محصولات آرایشی و مواد اولیه.

نکات کاربردی و نگهداری

پودر Soybean Casein Digest Lecithin Polysorbate 80 Medium محصول ایبرسکو (IBRESco) باید در جای خشک و خنک نگهداری شود. برای تهیه، پودر را در آب مقطر با کیفیت مناسب (مانند آب قابل تزریق) حل کرده و به جوش آورید تا کاملاً حل شود. سپس اتوکلاو نمایید. پس از اتوکلاو، محیط را به آرامی تکان دهید تا رسوب احتمالی لسیتین پراکنده شود. محیط آماده را می‌توان در دمای ۲ تا ۲۵ درجه سانتی‌گراد برای مدت محدود نگهداری کرد. کارایی خنثی‌کنندگی محیط برای هر نوع ماده بازدارنده خاص (ماده ضدعفونی، آنتی‌بیوتیک، مواد حفاظتی) و هر نوع محصول باید اعتبارسنجی (Validated) شود. حجم محیط مورد استفاده باید برای رقیق کردن و خنثی کردن کامل ماده بازدارنده موجود در نمونه کافی باشد. در تست استریلیتی، نمونه مستقیماً به فلاسک‌های حاوی SCDLP80 منتقل شده و انکوبه می‌شود. محیط باید به صورت روزانه از نظر کدورت (ترجیحاً در برابر یک زمینه تیره) بررسی شود. هر فلاسک کدر باید بلافاصله زیرکشت شده و میکروارگانیسم جدا شده، شناسایی شود. برای اطمینان از عدم وجود مهارکننده باقی‌مانده، ممکن است پس از دوره انکوباسیون اصلی، یک مرحله زیرکشت از محیط به ظاهر منفی به یک محیط تازه نیز انجام شود (Subculture Test). استفاده از کنترل‌های مثبت (آلوده شده با میکروارگانیسم‌های شاخص) و منفی در هر سری آزمایش ضروری است.