محیط کشت YM آگار

محیط کشت آگار وای‌ام (Yeast Mold Agar)

محیط کشت Yeast Mold Agar (YM Agar) یک محیط پایه غنی و همه‌کاره برای کشت قارچ‌ها است که ترکیبی متعادل از مواد مغذی ضروری را فراهم می‌آورد. فرمولاسیون استاندارد آن حاوی عصاره مخمر و پپتون به عنوان منابع نیتروژن، ویتامین‌ها و اسیدهای آمینه، دکستروز (گلوکز) به عنوان منبع کربن و انرژی، و آگار است. ویژگی کلیدی این محیط، pH پایین (حدود ۵٫۴) است که به طور انتخابی از رشد بسیاری از باکتری‌ها جلوگیری کرده و محیط را برای رشد قارچ‌ها مطلوب می‌سازد. این اسیدیته، YM Agar را به یک محیط نیمه‌انتخابی تبدیل می‌کند. برخی فرمولاسیون‌ها ممکن است حاوی کلرامفنیکل نیز باشند تا خاصیت ضدباکتریایی محیط را进一步增强 دهند و آن را برای نمونه‌های با آلودگی باکتریایی بالا مناسب‌تر کنند. این محیط برای رشد طیف وسیعی از مخمرها (از جمله مخمرهای بیماری‌زا و صنعتی) و کپک‌ها مناسب است و اغلب برای نگهداری کشت‌های قارچی، مطالعات مورفولوژی و شمارش کلی در صنایع غذایی، دارویی و تحقیقاتی استفاده می‌شود.

کاربرد اصلی آن در صنایع تخمیر (برای کشت و نگهداری مخمرها)، کنترل کیفیت میکروبی مواد غذایی و دارویی، آزمایشگاه‌های تحقیقاتی میکولوژی، و میکروبیولوژی محیطی (بررسی آلودگی قارچی) است.

مشخصات کلیدی

• نوع محیط: جامد (آگار)، غنی، نیمه‌انتخابی (به دلیل pH اسیدی) برای مخمرها و کپک‌ها.
• هدف کشت: کشت، جداسازی، نگهداری و شمارش مخمرها (Yeasts) و کپک‌ها (Molds).
• حالت فیزیکی: پودر (تهیه شده در آب مقطر، حرارت داده شده تا حل شود و سپس اتوکلاو می‌شود).
• ترکیبات کلیدی تغذیه‌ای: عصاره مخمر (منبع ویتامین‌ها و فاکتورهای رشد)، پپتون (منبع نیتروژن)، دکستروز (منبع کربن).
• فاکتورهای انتخابی: pH اسیدی (~۵٫۴) (مهارکننده بسیاری از باکتری‌ها). فرمول‌های اصلاح‌شده ممکن است حاوی کلرامفنیکل باشند.
• مکانیسم عمل: فراهم آوری یک محیط مغذی با pH بهینه برای متابولیسم قارچ‌ها، همزمان با ایجاد یک سد شیمیایی (اسید) در برابر رقیبان باکتریایی.
• شرایط کشت: روش‌های کشت سطحی (Streak Plate)، نقطه‌ای، پور پلیت یا اسپرد پلیت.
• شرایط انکوباسیون: ۲۰ تا ۲۵ درجه سانتی‌گراد (دمای بهینه برای بسیاری از قارچ‌ها) به مدت ۲ تا ۵ روز (برای مخمرها ممکن است ۲-۳ روز و برای کپک‌های کندرشد تا ۵ روز یا بیشتر).
• خوانش نتیجه: مشاهده رشد کلونی‌های قارچی. کلونی‌های مخمر معمولاً کرمی، براق، محدب و خامه‌ای هستند. کلونی‌های کپک می‌توانند کرکی، پنبه‌ای، مخملی یا پودری با رنگ‌های متنوع (سفید، سبز، سیاه، آبی، زرد) باشند. مورفولوژی کلونی اغلب برای شناسایی اولیه کمک‌کننده است.
• کنترل کیفیت: رشد خوب با سویه‌های قارچی مانند Candida albicans ATCC 10231 (مخمر) و Aspergillus brasiliensis ATCC 16404 (کپک). مهار نسبی رشد باکتریایی با سویه Staphylococcus aureus ATCC 25923 (در صورت pH اسیدی).
• کاربرد اصلی: کشت عمومی و نگهداری مخمرها و کپک‌ها در تحقیقات و صنعت، شمارش قارچ‌ها در کنترل کیفیت، و به عنوان محیط پایه برای مطالعات فیزیولوژیکی و مورفولوژیکی قارچ‌ها.

نکات کاربردی و نگهداری

پودر Yeast Mold Agar محصول ایبرسکو (IBRESco) باید در جای خشک و خنک نگهداری شود. برای تهیه محیط، پودر را در آب مقطر حل کرده و با حرارت ملایم هم بزنید تا کاملاً حل شود. pH محیط باید پس از حل کردن در محدوده ۵٫۴ ± ۰٫۲ تنظیم شود (معمولاً با اسید کلریدریک رقیق). سپس اتوکلاو نمایید. پس از اتوکلاو، محیط را تا حدود ۴۵-۵۰ درجه سانتی‌گراد سرد کرده و در صورت نیاز، آنتی‌بیوتیک استریل فیلترشده (مانند کلرامفنیکل) را اضافه کنید. سپس در پلیت‌های استریل بریزید. پلیت‌های آماده را می‌توان در دمای ۲ تا ۸ درجه سانتی‌گراد و دور از نور برای مدت چند هفته نگهداری کرد. قبل از استفاده، پلیت‌ها باید به دمای اتاق برسند. از آنجایی که این محیط فاقد مهارکننده قوی گسترش کپک‌های رشته‌ای است، در صورت آلودگی نمونه با چنین کپک‌هایی، ممکن است کل پلیت به سرعت پوشیده شود. برای نمونه‌های با آلودگی باکتریایی بالا، استفاده از فرمول حاوی کلرامفنیکل توصیه می‌شود. برای اهداف شمارش، روش پور پلیت (با دمای محیط نه خیلی داغ) یا اسپرد پلیت مناسب است. انکوباسیون در تاریکی یا نور کم می‌تواند از تولید رنگدانه ناشی از نور جلوگیری کند. این محیط اغلب به عنوان یک محیط پایه خوب برای تهیه اسلاید کالچر برای مشاهده ساختارهای میکروسکوپی قارچ‌ها استفاده می‌شود.