-30%برند بهار افشان
-30%برند بهار افشان
معرف تست کاتالاز - تست کاتالاز بهار افشان - Catalase Test
بزرگنمایی تصویر

معرف تست کاتالاز | تست کاتالاز بهار افشان | Catalase Test

قیمت اصلی: 490,000 ریال بود.قیمت فعلی: 345,000 ریال.

معرف تست کاتالاز (Catalase Test) در آزمون کیفی برای تعیین حضور و فعالیت آنزیم کاتالاز در باکتری به کار می رود.

تستا، تست کاتالاز بهار افشان را عرضه می نماید.
SKU KATA-B-110 دسته ها , برچسب ها , , ,
تست کاتالاز

معرف تست کاتالاز

Catalase Test

فهرست مطالب

تست کاتالاز بهار افشان

کاربرد: معرف تست کاتالاز در آزمون کیفی برای تعیین حضور و فعالیت آنزیم کاتالاز در باکتری به کار می رود.

تستا عرضه کننده مواد مصرفی بهداشتی و آزمایشگاهی و تست کاتالاز بهار افشان.

برند: بهار افشان

قیمت :  ۳۹۰۰۰۰ تومان

شرکت توسعه سلامت توان آفرین (تستا)، معرف تست کاتلاز بهار افشان را با کیفیت و قیمت مناسب عرضه می کند.

معرف کاتالاز چیست؟

کاتالاز آنزیمی است که در خون و سایر بافت ها فعالیت آنتی اکسیدانی دارد. این آنزیم می تواند واکنشی را که پراکسید هیدروژن مصرف می کند کاتالیز کند و آن را به آب و اکسیژن تبدیل کند. از آنجایی که اندازه گیری مستقیم پراکسید هیدروژن در نمونه های بیولوژیکی دشوار است، تعیین این آنزیم های سم زدا به طور گسترده ای مورد استفاده قرار گرفته است. سطح فعالیت کاتالاز نیز با ظرفیت آنتی اکسیدانی مرتبط است.

آنزیم کاتالاز واکنشی را انجام می دهد و باعث ایجاد ترکیبی می شود که با کروموژن کمپلکس می سازد. این واکنش یک رنگ ارغوانی را تولید می کند که مستقیماً با فعالیت کاتالاز متناسب است که می تواند با یک اندازه گیری اسپکتروفتومتری ساده و سریع تعیین شود.

کاتالاز آنزیمی است که توسط میکروارگانیسم هایی تولید می شود که در محیط های اکسیژن دار زندگی می کنند تا اشکال سمی متابولیت های اکسیژن مانند پراکسید هیدروژن (H2O2) را خنثی کند.

این آنزیم اثرات باکتری کش پراکسید هیدروژن را خنثی می کند و از باکتری های هوازی یا بی هوازی اختیاری محافظت می کند.

بی هوازی ها عموماً فاقد آنزیم کاتالاز هستند.

اصل تست کاتالاز

  (حباب های گاز)     H2O2 → 2H2O+ O2

 

واکنش مرتبط با تست کاتالاز
کاتالاز آنزیمی است که باعث تجزیه پراکسید هیدروژن H2O2 به اکسیژن و آب می شود

 

همانطور که گفته شد کاتالاز آنزیمی است که باعث تجزیه پراکسید هیدروژن H2O2 به اکسیژن و آب می شود. برای فهمیدن اینکه آیا یک سویه باکتری خاص قادر به تولید آنزیم کاتالاز است یا خیر، یک تلقیح کوچک از یک ایزوله باکتری با محلول پراکسید هیدروژن (۳٪) مخلوط می شود و به منظور تشکیل سریع حباب های اکسیژن بررسی می شود. فقدان کاتالاز با کمبود یا تولید ضعیف حباب مشهود است.

باکتری های کاتالاز مثبت شامل باکتری های هوازی سخت و همچنین بی هوازی اختیاری هستند. همه آنها توانایی تنفس با استفاده از اکسیژن به عنوان گیرنده الکترون انتهایی را دارند.

باکتری‌های کاتالاز منفی ممکن است بی‌هوازی باشند، یا ممکن است بی‌هوازی اختیاری باشند که فقط با استفاده از اکسیژن به‌عنوان گیرنده الکترون انتهایی (یعنی استرپتوکوک) تخمیر می‌شوند و تنفس نمی‌کنند.

 

نقش سلولی:

پراکسید هیدروژن یک محصول جانبی مضر است که از بسیاری از فرآیندهای متابولیک طبیعی تشکیل می شود. این کار به منظور جلوگیری از آسیب هایی که به سلول ها و بافت ها وارد می شود انجام می شود، این محصولات جانبی باید به سرعت به اشکال دیگر یا به مواد کمتر خطرناک تبدیل شوند.

در پایان، کاتالاز اغلب توسط سلول‌ها برای کاتالیز سریع تجزیه پراکسید هیدروژن به مولکول‌های اکسیژن گازی و آب با واکنش کمتر استفاده می‌شود. پراکسی زوم ها در سلول های گیاهی در فرآیند تنفس نوری نقش دارند که در آن از اکسیژن برای تولید دی اکسید کربن و تثبیت نیتروژن همزیستی استفاده می شود.

پراکسید هیدروژن به عنوان یک عامل ضد میکروبی قوی زمانی که سلول های موجود در ارگانیسم ها با یک پاتوژن آلوده می شوند، استفاده می شود. پاتوژن های کاتالاز مثبت، مانند مایکوباکتریوم توبرکلوزیس، کمپیلوباکتر ژژونی و لژیونلا پنوموفیلا.

  این پاتوژن‌ها می‌توانند باعث شوند که کاتالاز رادیکال‌های پراکسید را غیرفعال کند، که به آنها اجازه می‌دهد بدون آسیب در میزبان زنده بمانند.

درصد H2O2 مورد استفاده در آزمایش کاتالاز

هدف

درصد

آزمایش روتین هوازی

۳% H۲O۲

شناسایی باکتری های بی هوازی

۱۵% H۲O۲

در سوپراکسول کاتالاز (که برای گونه زایی احتمالی Neisseria sps استفاده می شود)

۳۰% H۲O۲

معرف تست کاتالاز (تست کاتالاز بهار افشان) – Catalase Test
 

مراحل آزمایش کاتالاز

روش های آزمایش کاتالاز اسلاید و لوله

آزمایش کاتالاز اسلاید
  • مقدار کمی از کلنی باکتری را با استفاده از یک حلقه یا چوب چوبی استریل به سطح یک لام شیشه ای تمیز و خشک منتقل کنید (مطمئن شوید که کلنی با چشم غیر مسلح روی لام قابل مشاهده است).
  • یک قطره ۳% H2O2 را روی لام بریزید و مخلوط کنید.
  • نتیجه مثبت، تغییر و تحول سریع اکسیژن (در عرض ۵-۱۰ ثانیه) است که توسط حباب زدن مشهود است.
  • نتیجه منفی عدم وجود حباب یا فقط چند حباب پراکنده است.
  • اسلاید خود را در ظروف دفع شیشه ای بیولوژیکی بیندازید.
 
تست کاتالاز متد اسلاید: نتایج مثبت و منفی (نمودار شماتیک)
تست کاتالاز متد اسلاید: نتایج مثبت و منفی (نمودار شماتیک)
تست کاتالاز متد اسلاید: نمودار شماتیک
آزمایش کاتالاز لوله

۴ تا ۵ قطره H2O2 3% را به یک لوله آزمایش اضافه کنید.

  • با استفاده از یک چوب اپلیکاتور، مقدار کمی از ارگانیسم را از یک کلنی ۱۸ تا ۲۴ ساعته جدا شده جمع آوری کنید و آن را در لوله آزمایش قرار دهید (توجه: مراقب باشید که هیچ آگاری نگیرید (مخصوصاً اگر از بلاد آگار استفاده می کنید).
  • لوله را روی یک پس زمینه تاریک قرار دهید و به شکل گیری فوری حباب (O2 +H2O  = حباب) در انتهای چوب اپلیکاتور چوبی توجه کنید.
تست کاتالاز متد لوله: نتایج مثبت و منفی (نمودار شماتیک)
تست کاتالاز متد لوله: نتایج مثبت و منفی (نمودار شماتیک)
تست کاتالاز متد لوله: نمودار شماتیک

نتایج آزمایش کاتالاز

واکنش مثبت کاتالاز: با جوشاندن فوری (تشکیل حباب) مشهود است.

واکنش منفی کاتالاز: عدم تشکیل حباب (جوش زایی) یا چند حباب بعد از ۲۰ ثانیه.

توجه: برخی از باکتری ها دارای آنزیم هایی غیر از کاتالاز هستند که می تواند پراکسید را تجزیه کند، تشکیل چند حباب ریز بعد از ۲۰ تا ۳۰ ثانیه آزمایش مثبت تلقی نمی شود.

 

اقدامات احتیاطی / محدودیت ها

از حلقه یا سوزن فلزی به همراه H2O2 استفاده نکنید. مثبت کاذب می دهد و فلز را تخریب می کند. در عوض، از یک حلقه پلاتین یا اپلیکاتور چوبی برای انجام این آزمایش استفاده کنید.

در صورت استفاده از کلونی از اسلاید خون آگار، بسیار مراقب باشید که هیچ یک از آگار خون را خراش ندهید زیرا سلول های خونی کاتالاز مثبت هستند و هر آگار آلوده کننده (حامل گلبول های قرمز خون) می تواند مثبت کاذب باشد.

آنزیم کاتالاز فقط در کشت های زنده وجود دارد، کلنی هایی را که سن آنها بیش از ۲۴ ساعت است آزمایش نکنید. کشت های قدیمی تر ممکن است نتایج منفی کاذب داشته باشند.

موارد استفاده از تست کاتالاز

آزمایش کاتالاز در درجه اول برای تشخیص کوکسی های گرم مثبت استفاده می شود: اعضای جنس استافیلوکوک کاتالاز مثبت هستند و اعضای جنس استرپتوکوک و انتروکوک کاتالاز منفی هستند.

آزمایش کاتالاز برای افتراق سویه های مقاوم به هوا کلستریدیوم (کاتالاز منفی) از گونه باسیلوس (کاتالاز مثبت) استفاده می شود.

یک آزمایش نیمه کمی کاتالاز برای شناسایی مایکوباکتریوم توبرکلوزیس استفاده می شود.

آزمایش کاتالاز برای جداسازی میله های گرم منفی سخت مفید است.

آزمایش کاتالاز می تواند به عنوان کمکی برای شناسایی انتروباکتریاسه استفاده شود. اعضای خانواده انتروباکتریاسه کاتالاز مثبت هستند.

Neisseria gonorrhoeae به دلیل سوپراکسول، حباب هایی را ایجاد می کند که در سایر اعضای جنس دیده نمی شود.

آزمون کاتالاز رنگی

Catalase Test Colored Reagent

 بروزترین کیت های آزمایشگاهی از جمله معرف تست کاتالاز بهار افشان (Catalase Test) را از شرکت توسعه سلامت توان آفرین (تستا) تهیه نمایید.

هدف و اساس تست

تست کاتالاز بهار افشان یک آزمون کیفی برای تعیین حضور و فعالیت آنزیم کاتالاز در باکتری است.

آنزیم کاتالاز، آب اکسیژنه را به آب و اکسیژن تجزیه می کند معرف کاتالاز اصولا جهت افتراق الف) استرپتوکوک ها (-) از میکروکوک و یا استافیلو کوک ها (+) ب) لیسریا مونوسیتوژنز و کورینه باکتریوم ها (+) از سایر میکروارگانیسم هایی که از نظر مورفولوژی شبیه آنها هستند شامل انتروکوک ها، استرپتوکوک گروه B و لاکتوباسیلوس ها (-)  به کار می رود.

مشخصات و پایداری معرف تست کاتالاز بهار افشان

این فراورده آماده مصرف است و نیازی به بازسازی ندارد. قطره چکان باز نشده در یخچال ۲-۸ درجه سانتی گراد بدور از نور تا زمان پایداری یاد شده برروی ویال پایدار است. ویال باز شده در دمای ۲-۸ درجه در شرایط مناسب ( بدون آلودگی) حد اقل به مدت ۳ ماه قابل استفاده است.

هشدار: پس از استفاده درب قطره چکان را محکم ببندید، در غیر اینصورت محلول غیرفعال خواهد بود.

مراحل تست به شرح زیر است

در کیت آزمون کاتالاز رنگی با استفاده معرف تست کاتالاز بهار افشان و از روش اسلاید (لام) می توان انجام داد.

  1. کلنی ایزوله ۱۸-۲۴ ساعته وی محیط کشت فاقد خون را به وسیله لوپ نیکل کروم یا پلاستیکی یا اپلیکاتور چوبی برروی لام شیشه ای خشک و تمیز منتقل کنید.
  2. یک قطره از معرف تست کاتالاز بهار افشان برروی آن بریزید.
  3. تشکیل حباب را به طور سریع در کمتر از ۱۰ ثانیه بررسی کنید.
  •  
تست کاتالاز متد اسلاید: نتایج مثبت و منفی (تصاویر حقیقی)
Catalase Test متد اسلاید: نتایج مثبت و منفی (تصاویر حقیقی)
تست کاتالاز متد اسلاید: نتایج مثبت و منفی - در نمونه مثبت حباب هوا دیده می شود
محدودیت های آزمون و نتایج کاذب:
  1. کلنی مورد آزمایش نباید به محیط کشت خوندار (ژلوز خوندار) آغشته شود. گلبول های قرمز حاوی آنزیم کاتالاز بوده و نتیجه مثبت کاذب می دهد. از اینرو می توانید به جای محیط بلاد آگار از محیط شکلات آگار برای باکتری های سخت رشد استفاده کنید.
  2. کلنی را به کمک لوپ Nichrome یا نیکل- کروم یا پلاستیکی یکبار مصرف یا پلیکاتور چوبی برداشت کنید. استفاده از لوپ پلاتینی  باعث ایجاد نتیجه مثبت کاذب می شود
  3. کشت های کهنه آنزیم کاتالاز را از دست می دهند و سبب ایجاد نتیجه منفی کاذب می شود.
  4. بعضی از انتروکوک ها سودو کاتالاز تولید کرده و واکنش مثبت ضعیف ایجاد می کنند. اما شدت واکنش بعد از چندبار پاساژ کاهش می یابد.
  5. هنگام انجام آزمایش کلنی و معرف را با هم مخلوط نکنید.
تفسیر نتایج

ایجاد حباب های پایدار به طور سریع یا کف کردن در کمتر از ۱۰ ثانیه برروی لام بیانگر وجود آنزیم کاتالاز در باکتری مورد آزمایش است.

کنترل کیفی

معرف کاتالاز باید هرروز یا قبل از آزمایش باکتری مجهول، با ارگانیسم های کنترل مثبت و منفی، کنترل کیفی شود.

  • استافیلوکوکوس اورئوس ATCC 25923-  کاتالاز مثبت
  • استرپتوکوکوس پیوژنز  ATCC 19615- کاتالاز منفی
تست کاتالاز متد لوله: نتایج مثبت و منفی (تصاویر حقیقی)
تست کاتالاز متد لوله: نتایج مثبت و منفی (تصاویر حقیقی)
Catalase Test متد لوله: نتایج مثبت و منفی - در نمونه مثبت حباب هوا دیده می شود

جهت سفارش آنلاین معرف کاتالاز رنگی (معرف تست کاتالاز بهار افشان) در فروشگاه تستا (تستا شاپ) ثبت سفارش نمایید.

منابع
  1. Tille, P. (2017). Bailey & Scott’s Diagnostic Microbiology(14 edition). Mosby.
  2. Procop, G. W., & Koneman, E. W. (2016). Koneman’s Color Atlas and Textbook of Diagnostic Microbiology(Seventh, International edition). Lippincott Williams and Wilkins.
  3. Karen Reiner. 2010. Catalase test protocol.
  4. Clinical Microbiology Procedures Handbook, Fourth Edition. (2016). American Society of Microbiology. https://doi.org/10.1128/9781555818814
    Mitchell RL, Anderson IC. Catalase photoactivation. Science 1965; 150:74.
    Funada H, Hattori K-I, Kosakai N. Catalase-negative Escherichia coli isolated from blood. J Clin Micro 1978; 7:474-8.
    Chester B, Moskowitz LB. Rapid catalase supplemental test for identification of members of the family Enterobacteriaceae. J Clin Micro 1987; 25:439-41.
    Isenberg HD, Ed. Clinical microbiology procedures handbook, Vol I. Washington, DC: ASM, 1992.
    Catalase test: Principle, Procedure, Results, Precautions, Limitations Uses - PhD Nest

1 دیدگاه برای معرف تست کاتالاز | تست کاتالاز بهار افشان | Catalase Test

  1. testa_admin –

    سلام
    لطفاً تجربیات و نظرات خود را در خصوص «معرف تست کاتالاز Catalase Test» را با ما به اشتراک گذارید. از تجربیات ارزشمند شما سپاسگزار خواهیم بود.
    شرکت توسعه سلامت توان آفرین – تستا

دیدگاه خود را بنویسید

نشانی ایمیل شما منتشر نخواهد شد. بخش‌های موردنیاز علامت‌گذاری شده‌اند *