الایزا
کیت های بیوشیمی
کیت های مولکولی و سایر
کیت های دامپزشکی
کیت های زیبایی
تجهیزات آزمایشگاهی
کیت های تشخیص سریع
مصرفی
کیت سنجش هورمون T4 (96 تستی) الایزا
1,197,000 تومان
مقدمه
هورمون تیروکسین (T4) در غده تیروئید از ید و تیروزین ساخته می‌شود. فقط ۰.۰۲ تا ۰.۰۳ درصد از این هورمون در خون به صورت آزاد وجود دارد و بقیه آن به شکل متصل با پروتئین‌هاست. اصلی‌ترین این پروتئین‌ها، تیروکسین بایندینگ گلوبولین (TBG) می‌باشد.
مقدار کل تیروکسین در خون (Total T4) به عنوان یک فاکتور مهم در بررسی وضعیت تیروئید شناخته می‌شود. به طور معمول، در سرم افراد مبتلا به هیپرتیروئیدیسم، مقدار T4 افزایش می‌یابد و در افراد دچار هیپوتیروئیدیسم کاهش می‌یابد. اما در مواردی که مقدار پروتئین‌های متصل‌شونده به تیروکسین به دلایل فیزیولوژیک، ژنتیکی یا فارماکولوژیک غیرطبیعی باشد، اندازه‌گیری مقدار کل T4 به تنهایی نمی‌تواند فاکتور دقیقی برای ارزیابی عملکرد تیروئید باشد.
کیت حاضر، قابلیت اندازه‌گیری و تیتراسیون هورمون تیروکسین را با اختصاصیت و حساسیت بسیار بالا دارا می‌باشد.
اساس آزمایش
کیت T4 حاضر به روش رقابتی و با استفاده از آنتی‌بادی مونوکلونال طراحی شده است. در این روش، چاهک‌ها توسط آنتی‌بادی مونوکلونالی که علیه مولکول T4 است، پوشش داده می‌شوند (Coating). سپس، استانداردها و نمونه‌های بیماران با این آنتی‌بادی‌ها مجاور شده و بعد محلول Assay Buffer و به دنبال آن، T4 کنژوگه شده با آنزیم HRP به چاهک‌ها اضافه می‌شوند.
کنژوگه T4-HRP با T4 موجود در نمونه‌ها برای اتصال به آنتی‌بادی‌های موجود در چاهک‌ها رقابت می‌کند. بنابراین، هر چه مقدار T4 در نمونه بیشتر باشد، مقدار کمتری از T4 کنژوگه به آنتی‌بادی متصل خواهد شد و بالعکس.
پس از شستشو، محلول رنگ‌زا که حاوی هیدروژن پراکسید (H₂O₂) و کروموژن است، به چاهک‌ها اضافه شده و انکوبه می‌شود. بعد از انکوباسیون، رنگ آبی تشکیل‌شده به‌طور معکوس با غلظت T4 در نمونه‌ها متناسب است.
برای توقف فعالیت بیش از حد و نامناسب آنزیم، محلول متوقف‌کننده اضافه می‌شود که باعث تبدیل رنگ آبی به زرد می‌گردد؛ این رنگ دارای بیشترین جذب نوری در طول موج ۴۵۰ نانومتر است.
❄️ شرایط نگهداری
کیت را در یخچال و در دمای بین ۲ تا ۸ درجه سانتی‌گراد نگهداری نمایید.
چاهک‌ها را در کیسه مخصوص پلیت همراه با نم‌گیر نگهداری کنید.
پایداری محتویات کیت تا پایان مدت انقضای درج‌شده روی هر جزء حفظ می‌شود.
محلول شستشوی آماده مصرف (رقیق‌شده به نسبت ۱:۲۰ با آب مقطر)، به مدت یک هفته در دمای ۲ تا ۸ درجه سانتی‌گراد قابل استفاده است.
🧫 جمع‌آوری و آماده‌سازی نمونه
می‌توان از سرم یا پلاسما پس از جداسازی از خون استفاده نمود.
نمونه تا ۲ روز در دمای ۲ تا ۸ درجه سانتی‌گراد و تا ۳۰ روز در دمای -۲۰ درجه سانتی‌گراد قابل نگهداری است.
از انجماد و ذوب مجدد (Freeze-Thaw) نمونه‌ها باید خودداری شود.
ℹ️ توضیحات عمومی
پیش از شروع آزمایش، همه مواد و نمونه‌ها را به دمای اتاق برسانید.
پس از آغاز آزمایش، مراحل باید بدون وقفه انجام شود.
برای هر نمونه از نوک سمپلر یک‌بار مصرف استفاده نمایید.
پس از افزودن محلول متوقف‌کننده، جذب نوری چاهک‌ها حداکثر تا ۳۰ دقیقه قابل قرائت است.
برای دستیابی به نتایج دقیق، شستشوی کامل چاهک‌ها و تخلیه قطرات باقی‌مانده الزامی است.
زمان انکوباسیون یکی از مهم‌ترین عوامل در نتایج مطلوب است. توصیه می‌شود قبل از شروع، تمام محلول‌ها و ابزار مورد نیاز آماده و درب ویال‌ها باز شده باشند تا زمان بین مراحل سمپلینگ کاهش یابد.
به دلایل مشابه بند ۶، بهتر است حجم تست محدود باشد و زمان افزودن نمونه‌ها از ۵ دقیقه فراتر نرود.
🧪 مراحل انجام آزمایش
تعداد چاهک‌های مورد نیاز را انتخاب کرده و باقی چاهک‌ها را با نم‌گیر درون کیسه مخصوص پلیت قرار دهید و درب آن را ببندید.
۲۵ میکرولیتر از هر استاندارد، سرم کنترل و نمونه را به چاهک‌ها اضافه کنید. پیشنهاد می‌شود از نمونه‌ها به‌صورت داپلیکیت (دو تایی) استفاده شود و از میانگین جذب نوری آن‌ها برای محاسبه نتایج بهره بگیرید.
سپس، ۵۰ میکرولیتر Assay Buffer و پس از آن ۵۰ میکرولیتر محلول آنزیم کنژوگه به هر چاهک اضافه نمایید. برای ۱۵ ثانیه پلیت را آرام تکان دهید تا محتویات چاهک‌ها کاملاً مخلوط شوند. سپس چاهک‌ها را با برچسب مخصوص پلیت بپوشانید و به مدت ۱ ساعت در دمای ۲۲ تا ۲۸ درجه سانتی‌گراد و در تاریکی انکوبه نمایید.
پس از انکوباسیون، محتویات چاهک‌ها را خالی کرده و ۵ بار با محلول شستشوی آماده مصرف شستشو دهید. (می‌توان از سمپلر ۸ کاناله استفاده کرد، اما باید مراقب بود محلول از یک چاهک به چاهک دیگر نریزد.) در هر بار، حدود ۳۰۰ میکرولیتر محلول وارد هر چاهک کنید، سپس چاهک‌ها را وارونه کرده، خالی نمایید و با ضربات ملایم روی پارچه یا کاغذ نم‌گیر خشک کنید.
۱۰۰ میکرولیتر محلول رنگ‌زا (Substrate-Chromogen) به هر چاهک اضافه کرده و به مدت ۱۵ دقیقه در دمای اتاق و در تاریکی انکوبه نمایید.
۱۰۰ میکرولیتر محلول متوقف‌کننده (Stop Solution) به هر چاهک اضافه کرده و واکنش‌های آنزیمی را متوقف نمایید.
برای سنجش جذب نوری، از دستگاه الایزا ریدر با فیلتر ۴۵۰ نانومتر استفاده کنید. (توصیه می‌شود از فیلتر ۶۳۰ نانومتر به عنوان رفرنس بهره گرفته شود.)
🧪 محتویات کیت T4:
پلیت ۹۶ خانه: حاوی چاهک‌های پوشش داده شده با آنتی‌بادی ضد T4 (Anti-T4 Coated Plate)
محلول آنزیم کنژوگه (T4 Enzyme Conjugate): یک ویال حاوی ۶ میلی‌لیتر، آماده مصرف
اسی بافر (Assay Buffer): یک ویال حاوی ۶ میلی‌لیتر، آماده مصرف
سری استانداردها (Standards Set):
شامل ۶ ویال با غلظت‌های ۰، ۲، ۴، ۸، ۱۲، و ۲۰ میکروگرم بر دسی‌لیتر (µg/dl)
ویال استاندارد صفر حاوی ۱ میلی‌لیتر، سایر ویال‌ها هرکدام ۰.۵ میلی‌لیتر
سرم کنترل: یک ویال حاوی ۰.۵ میلی‌لیتر با غلظت درج‌شده روی برچسب ویال
محلول شستشو (Wash Solution):
یک ویال حاوی ۵۰ میلی‌لیتر محلول شستشوی غلیظ ۲۰×
برای مصرف، با آب مقطر به نسبت ۱:۲۰ رقیق شود
محلول رنگ‌زا (Substrate-Chromogen): یک ویال حاوی ۱۲ میلی‌لیتر، آماده مصرف
محلول متوقف‌کننده (Stop Solution): یک ویال حاوی ۱۲ میلی‌لیتر اسید کلریدریک ۱ نرمال
برچسب مخصوص پلیت
⚙️ مواد و وسایل مورد نیاز (در کیت موجود نیست):
دستگاه الایزا ریدر با فیلتر ۴۵۰ نانومتر (ترجیحاً همراه فیلتر رفرنس ۶۳۰ نانومتر)
سمپلر دقیق در حجم‌های ۲۵، ۵۰ و ۱۰۰ میکرولیتر
آب مقطر
⚠️ نکات مهم برای مصرف‌کنندگان:
محتویات این کیت فقط برای استفاده در همین کیت طراحی و تعبیه شده‌اند.
از مخلوط کردن محتویات کیت‌هایی با شماره ساخت متفاوت جداً خودداری نمایید.
تستا عرضه کننده
کیت سنجش هورمون T4 (96 تستی) الایزا
- اطلاعات کارشناسان تستا
- کاتالوگ محصول
دیدگاهها
هیچ دیدگاهی برای این محصول نوشته نشده است.