Description
معرفی کیت کورتیزول بزاق دیامترا
Direct immunoenzymatic determination of Cortisol in saliva.
جهت اندازه گیری کمی هورمون کورتیزول از کیت کورتیزول Saliva ELISA استفاده نمایید.
جهت ثبت سفارش کیت کورتیزول بزاق دیامترا در تستا شاپ هم اکنون اقدام نمایید. تستا عرضه کننده انواع کیت های آزمایشگاهی و کیت های الایزا است.
فروش کیت کورتیزول بزاق دیامترا (Saliva ELISA)
کاربرد: اندازه گیری کمی هورمون کورتیزول با نمونه بزاق و به روش الایزا.
مواد مصرفی، فراورده های آزمایشگاهی و انواع کیت های آزمایشگاهی و انواع کیت های الایزا در تستا
برند: دیامترا (DiaMetra)
محتویات: پلیت ۹۶ چاهکی به همراه ویال های کنترل، کالیبراتور، بافر و محلول های لازم در تست الایزا.
قیمت: با ۴۵٪ تخفیف!! فقط ۱۲۰۰۰۰۰ تومان
فهرست مطالب
کورتیزول چیست؟
کورتیزول یک هورمون استروئیدی است که توسط ۲ غده فوق کلیوی شما که در بالای هر کلیه قرار دارند تولید می شود. وقتی استرس دارید، افزایش کورتیزول در جریان خون شما ترشح می شود. داشتن تعادل مناسب هورمون کورتیزول برای سلامتی شما ضروری است و تولید بیش از حد یا خیلی کم کورتیزول می تواند باعث مشکلات سلامتی شود.
کورتیزول عملکردهای مهم بسیاری دارد و بر روی قسمت های مختلف بدن شما اثر می گذارد از جمله:
- پاسخ به استرس یا خطر
- افزایش متابولیسم گلوکز بدن
- کنترل فشار خون
- کاهش التهاب
هورمون کورتیزول همچنین برای پاسخ “جنگ یا گریز”، که پاسخ سالم و طبیعی شما به تهدیدات درک شده است، مورد نیاز است. مقدار هورمون کورتیزول تولید شده توسط بدن شما کنترل می شود تا از درست بودن تعادل اطمینان حاصل شود.
نمودار آناتومیک پاسخ استرس با اندام های داخلی
تولید کورتیزول
برونش ها
ضربان قلب
تولید گلوکز در کبد
دستگاه گوارش
فشار خون
تاثیر سطح هورمون کورتیزول
چه اتفاقی می افتد وقتی کورتیزول بیش از حد یا کم تولید می کنید؟
معمولاً بدن شما مقدار مناسبی کورتیزول را برای حفظ سلامتی شما تولید می کند. اگر به بیماری مانند سندرم کوشینگ مبتلا هستید، بدن شما بیش از حد کورتیزول تولید می کند. اگر به بیماری مانند بیماری آدیسون مبتلا هستید، بدن شما کورتیزول بسیار کمی تولید می کند.
علائم کورتیزول بیش از حد عبارتند از:
- افزایش وزن، به خصوص در اطراف شکم و صورت
- پوست نازک و شکننده ای که دیر التیام می یابد
- آکنه
- موهای صورت زنان و دوره های قاعدگی نامنظم
- رسوبات چربی بین تیغه های شانه شما.
- علائم کشش گسترده و بنفش روی شکم شما (شکم).
- ضعف عضلانی در قسمت بالای بازوها و ران ها.
- قند خون بالا که اغلب به دیابت نوع ۲ تبدیل می شود.
- فشار خون بالا (فشار خون بالا).
- رشد بیش از حد مو (هیرسوتیسم) در افرادی که در بدو تولد به عنوان ماده انتخاب شده اند.
- استخوان های ضعیف (پوکی استخوان) و شکستگی.
جهت انجام تست بزاقی الایزا بهترین گزینه استفاده از کیت کورتیزول Saliva ELISA (کیت کورتیزول بزاق دیامترا) است.
علائم کمبود کورتیزول عبارتند از:
- خستگی مداوم
- تهوع و استفراغ
- کاهش وزن
- ضعف عضلانی
- درد در شکم
- اشتهای کم.
- فشار خون پایین (هیپوتانسیون).
اگر هر یک از این علائم را تجربه کردید، پزشک ممکن است آزمایش خون را برای اندازه گیری سطح هورمون کورتیزول شما پیشنهاد کند. البته روش کم تهاجمی تر استفاده از تست بزاقی الایزا است که روش کیت کورتیزول Saliva ELISA با برند دیامترا است.
چه چیزی باعث سطوح پایین کورتیزول می شود؟
داشتن سطح هورمون کورتیزول کمتر از حد طبیعی (هیپوکورتیزولیسم) نارسایی آدرنال در نظر گرفته می شود. دو نوع نارسایی آدرنال وجود دارد: اولیه و ثانویه. علل نارسایی آدرنال عبارتند از:
نارسایی اولیه آدرنال
نارسایی اولیه آدرنال معمولاً توسط یک واکنش خود ایمنی ایجاد می شود که در آن سیستم ایمنی بدن شما بدون هیچ دلیل شناخته شده ای به سلول های سالم غدد فوق کلیوی حمله می کند. این بیماری آدیسون نامیده می شود. غدد آدرنال شما همچنین می توانند در اثر عفونت یا از دست دادن خون به بافت ها آسیب ببینند (خونریزی آدرنال). همه این شرایط تولید کورتیزول را محدود می کند.
نارسایی ثانویه آدرنال
اگر غده هیپوفیز کم کار (هیپوفیتاریسم) یا تومور هیپوفیز دارید، می تواند تولید ACTH را محدود کند. ACTH به غدد آدرنال شما سیگنال می دهد که هورمون کورتیزول بسازند، بنابراین ACTH محدود منجر به تولید محدود کورتیزول می شود.
همچنین می‌توانید پس از قطع درمان با داروهای کورتیکواستروئیدی، سطح هورمون کورتیزول پایین‌تر از حد طبیعی داشته باشید، به‌خصوص اگر پس از مدت‌زمان مصرف، مصرف آنها را خیلی سریع متوقف کنید.
داروهای کورتیکواستروئیدی چیست؟
کورتیکواستروئیدها نسخه های مصنوعی کورتیزول هستند. اگر بدن شما هورمون کورتیزول کافی تولید نکند، مثلاً به دلیل شرایطی مانند بیماری آدیسون، پزشک ممکن است برای شما کورتیکواستروئید تجویز کند. داروهای کورتیکواستروئید شامل کورتیزون، هیدروکورتیزون و پردنیزون است.
با این حال، کورتیکواستروئیدها برای درمان طیف گسترده ای از بیماری های دیگر نیز استفاده می شوند. کورتیکواستروئیدها دارای اثرات ضد التهابی هستند و کاربردهای آنها شامل درمان بیماری های التهابی (مانند آسم و بیماری های التهابی روده) و بیماری های پوستی (مانند پسوریازیس) می شود. پزشک شما ممکن است داروهای کورتیکواستروئیدی را برای کمک به درمان این شرایط التهابی تجویز کند، حتی اگر بدن شما هورمون کورتیزول کافی تولید کند.
برخی افراد بدون تجویز پزشک از استروئیدهای آنابولیک برای عضله سازی استفاده می کنند. این مخاطره آمیز است. استروئیدهای آنابولیک با کورتیکواستروئیدها متفاوت است.
عوارض جانبی کورتیکواستروئید درمانی چیست؟
کورتیکواستروئیدها در درمان بثورات، بیماری التهابی روده، اسم و سایر شرایط مفید هستند، اما از آنجایی که کورتیکواستروئیدها داروهای قدرتمندی هستند، نباید از عوارض جانبی آن ها صرف نظر کرد. به ویژه اگر نیاز به مصرف طولانی مدت استروئید داشته باشید. دوره های کوتاه مدت استروئید بعید است که عوارض جانبی ایجاد کند.
عوارض جانبی درمان طولانی مدت استروئیدی ممکن است شامل موارد زیر باشد:
- نازک شدن پوست
- پوکی استخوان
- افزایش اشتها و افزایش وزن، به خصوص در اطراف صورت
- قند خون بالا یا دیابت
- تغییرات سریع خلقی، احساس تحریک پذیری و اضطراب، افسردگی یا افکار خودکشی
- افزایش احتمال عفونت
- بیماری های چشمی مانند گلوکوم و آب مروارید
- فشار خون بالا
اگر پزشک برای شما کورتیکواستروئیدها تجویز کرد، حتما بپرسید که چه مدت باید آنها را مصرف کنید و اگر متوجه عود علائم یا عوارض جانبی دارو شدید چه باید بکنید. داروساز شما نیز می تواند در این مورد به شما توصیه کند.
آزمایش های تشخیص کورتیزول
چه آزمایش هایی می توانند سطح هورمون کورتیزول را بررسی کنند؟
پزشک سطح کورتیزول شما را از طریق آزمایش خون، ادرار ( ادرار کردن) یا بزاق (تف) اندازه گیری میکند. آنها بسته به علائم شما بهترین آزمایش را تعیین خواهند کرد.
سطوح طبیعی کورتیزول چقدر است؟
سطح کورتیزول در خون، ادرار و بزاق شما معمولاً در اوایل صبح به اوج خود می رسد و در طول روز کاهش می یابد و در حدود نیمه شب به پایین ترین سطح خود می رسد. اگر در شیفت شب کار کنید و در ساعات مختلف روز بخوابید، این الگو می تواند تغییر کند.
برای اکثر آزمایش هایی که سطح هورمون کورتیزول را در خون شما اندازه گیری می کنند، محدوده های طبیعی عبارتند از:
- ۶ صبح تا ۸ صبح: ۱۰ تا ۲۰ میکروگرم در دسی لیتر (mcg/dL).
- حدود ساعت ۴ بعد از ظهر: ۳ تا ۱۰ میکروگرم در دسی لیتر.
محدوده طبیعی می تواند از آزمایشگاهی به آزمایشگاه دیگر، زمانی به زمان دیگر و فردی به فرد دیگر متفاوت باشد. اگر نیاز به آزمایش سطح هورمون کورتیزول دارید، پزشک نتایج شما را تفسیر میکند و در صورت نیاز به انجام آزمایش‌های بیشتر به شما اطلاع می‌دهد.
چگونه می توانم سطح کورتیزول خود را کاهش دهم؟
- اگر سندرم کوشینگ (سطوح بسیار بالای کورتیزول) دارید، برای کاهش سطح هورمون کورتیزول خود به درمان پزشکی نیاز دارید. درمان معمولاً شامل دارو و/یا جراحی است. اگر سطح کورتیزول شما کمتر از حد طبیعی باشد، به درمان پزشکی نیز نیاز خواهید داشت.
- با این حال، به طور کلی، چندین کار روزمره وجود دارد که می توانید برای کاهش سطح کورتیزول و حفظ آن در محدوده بهینه انجام دهید، از جمله:
- خواب با کیفیت داشته باشید: مشکلات مزمن خواب، مانند آپنه انسدادی خواب، بی خوابی یا کار در شیفت شب، با سطوح بالاتر کورتیزول مرتبط است.
- به طور منظم ورزش کنید: چندین مطالعه نشان داده اند که ورزش منظم به بهبود کیفیت خواب و کاهش استرس کمک می کند، که می تواند به کاهش سطح کورتیزول در طول زمان کمک کند.
- یاد بگیرید استرس و الگوهای تفکر استرس زا را محدود کنید: آگاهی از الگوی تفکر، تنفس، ضربان قلب و سایر نشانه های تنش به شما کمک می کند استرس را در زمان شروع آن تشخیص دهید و می تواند به شما در جلوگیری از بدتر شدن آن کمک کند.
- تمرینات تنفس عمیق را انجام دهید: تنفس کنترل شده به تحریک سیستم عصبی پاراسمپاتیک، سیستم “استراحت و هضم” شما کمک می کند، که به کاهش سطح کورتیزول کمک می کند.
- از خود لذت ببرید و بخندید: خندیدن باعث ترشح اندورفین و سرکوب کورتیزول می شود. شرکت در سرگرمی ها و فعالیت های سرگرم کننده نیز می تواند احساس را تقویت کند.
مشخصات کیت کورتیزول Saliva ELISA
حیطه کاربرد
روش رنگ سنجی ایمونوآنزیمی رقابتی برای تعیین کمی غلظت کورتیزول در بزاق.
اهمیت بالینی
- کورتیزول یک هورمون استروئیدی است که در پاسخ به هورمونی به نام ACTH (تولید شده توسط غده هیپوفیز) از قشر آدرنال آزاد می شود و در پاسخ به استرس نقش دارد. فشار خون، سطح قند خون را افزایش می دهد، ممکن است باعث ناباروری در زنان شود و سیستم ایمنی بدن را سرکوب می کند.
- کورتیزول از طریق گیرنده های داخل سلولی خاص عمل می کند و در سیستم های فیزیولوژیکی متعددی از جمله عملکرد سیستم ایمنی، تنظیم شمارنده گلوکز، تون عروق، استفاده از بستر و متابولیسم استخوان تأثیر می گذارد. کورتیزول عمدتاً در ادرار به شکل آزاد (آزاد) دفع می شود.
- اکثر کورتیزول موجود در بزاق متصل نیست و از طریق مکانیسم های درون سلولی وارد بزاق می شود. میزان کورتیزول بزاق تحت تأثیر سرعت جریان بزاق یا آنزیم های بزاق قرار نمی گیرد.
- همبستگی بالایی بین سطح کورتیزول سرم و بزاق وجود دارد. این عملکردهای درون زا طبیعی اساس عواقب فیزیولوژیکی استرس مزمن هستند – ترشح طولانی مدت کورتیزول باعث تحلیل عضلات، هیپرگلیسمی و سرکوب پاسخ های ایمنی/التهابی می شود. همین عواقب ناشی از مصرف طولانی مدت داروهای گلوکوکورتیکوئیدی است.
اساس تست
کورتیزول (آنتی ژن) در نمونه با کورتیزول آنتی ژنی کونژوگه با پراکسیداز ترب کوهی (HRP) برای اتصال به تعداد محدودی از آنتی بادی های ضد کورتیزول پوشش داده شده روی میکروپلیت (فاز جامد) رقابت می کند.
پس از انکوباسیون، جداسازی محدود/آزاد با یک شستشوی ساده فاز جامد انجام می شود.
سپس، آنزیم HRP در بخش محدود با سوبسترا (H2O2) و زیرلایه TMB واکنش می دهد و رنگ آبی ایجاد می کند که با افزودن محلول توقف (H2SO4) به زرد تغییر می کند.
شدت رنگ با غلظت کورتیزول در نمونه نسبت معکوس دارد. غلظت کورتیزول در نمونه از طریق منحنی کالیبراسیون محاسبه می شود.
معرف ها و مواد موجود در کیت
کیت کورتیزول بزاق دیامترا از نوع الایزا است و طبیعتاً محتویات کیت شامل ملزومات تست بزاقی الایزا و به شرح زیر است:
عنوان | توضیحات |
کالیبراتور | ۷ ویال، هر کدام یک میلی لیتر |
کنترل (A،B) | ۲ ویال، هر کدام یک میلی لیتر |
بافر انکوباسیون | ۱ ویال، ۳۰ میلی لیتر بافر فسفات ۵۰ میلی مولار pH 7.4، BSA 1 گرم در لیتر |
کونژوگه | ۱ ویال، ۱ میلی لیتر کورتیزول کونژوگه به پراکسیداز ترب کوهی (HRP) |
میکروپلیت پوشش داده شده | (۱ میکروپلیت شکستنی) آنتی بادی ضد کورتیزول جذب شده روی میکروپلیت |
بستر TMB | ۱ ویال، ۱۵ میلی لیتر H2O2-TMB 0.26 گرم در لیتر (از هرگونه تماس پوستی خودداری کنید) |
محلول توقف | ۱ ویال، ۱۵ میلی لیتر اسید سولفوریک ۰.۱۵ مول در لیتر (از هرگونه تماس پوستی خودداری کنید) |
۱۰X Conc محلول شستشو | ۱ ویال، ۵۰ میلی لیتر بافر فسفات ۰.۲M pH 7.4 |
هشدارها
- کیت کورتیزول بزاق دیامترا فقط برای استفاده در شرایط آزمایشگاهی توسط افراد حرفه ای در نظر گرفته شده است. برای استفاده داخلی یا خارجی در انسان یا حیوانات نیست.
- هنگام کار با معرف های ارائه شده از تجهیزات حفاظت فردی مناسب استفاده کنید.
- برخی از معرف ها حاوی مقادیر کمی Proclin 300R به عنوان نگهدارنده هستند. از تماس با پوست یا مخاط خودداری کنید.
- سوبسترا TMB حاوی یک ماده محرک است که در صورت استنشاق، بلعیده یا جذب از طریق پوست ممکن است مضر باشد. برای جلوگیری از آسیب، از استنشاق، بلعیدن یا تماس با پوست و چشم خودداری کنید.
- محلول توقف از محلول اسید سولفوریک رقیق شده تشکیل شده است. اسید سولفوریک سمی و خورنده است و در صورت بلعیدن می تواند سمی باشد. برای جلوگیری از سوختگی شیمیایی، از تماس با پوست و چشم خودداری کنید.
- از قرار گرفتن معرف TMB/H2O2 در معرض نور مستقیم خورشید، فلزات یا اکسیدان ها خودداری کنید. محلول را فریز نکنید.
- این روش امکان تعیین کورتیزول از ۰.۵ نانوگرم در میلی لیتر تا ۱۰۰ نانوگرم در میلی لیتر را فراهم می کند.
- اگر بیمار با کورتیکواستروئیدها یا استروئیدهای طبیعی یا مصنوعی درمان شده باشد، اهمیت بالینی تعیین کورتیزول را می توان باطل کرد.
اقدامات احتیاطی
- همه معرف ها باید در یخچال در دمای ۸-۲ درجه سانتیگراد در ظرف اصلی خود نگهداری شوند. هر گونه استثنا به وضوح نشان داده شده است. معرف ها تا تاریخ انقضا پایدار هستند و همانطور که نشان داده شده است نگهداری می شوند.
- اجازه دهید تمام اجزای کیت کورتیزول Saliva ELISA و نمونه ها به دمای اتاق (۲۲-۲۸ درجه سانتیگراد) برسند و قبل از استفاده خوب مخلوط شوند.
- اجزای کیت کورتیزول بزاق دیامترا را از لات های مختلف تعویض نکنید. تاریخ انقضای چاپ شده روی برچسب جعبه و ویال ها باید رعایت شود. از هیچ جزء کیت بیش از تاریخ انقضا استفاده نکنید.
- حذف ناقص یا نادرست مایع از چاهک ها می تواند بر دقت سنجش تأثیر بگذارد و/یا زمینه را افزایش دهد. برای بهبود عملکرد کیت در سیستم های اتوماتیک، افزایش تعداد شستشو توصیه می شود.
- مهم است که زمان واکنش در هر چاهک برای نتایج قابل تکرار ثابت نگه داشته شود. لوله گذاری نمونه ها نباید بیش از ده دقیقه طول بکشد تا از رانش آزمون جلوگیری شود. اگر بیش از ۱۰ دقیقه باشد.
- افزودن محلول سوبسترا TMB یک واکنش جنبشی را آغاز می کند که با افزودن محلول توقف خاتمه می یابد. بنابراین، سوبسترا TMB و محلول توقف باید به ترتیب اضافه شوند تا هرگونه انحراف زمانی در طول واکنش حذف شود.
روش تست
۱.آماده سازی کالیبراتورها (C0…C6)
قبل از استفاده، کالیبراتورها را حداقل به مدت ۵ دقیقه روی یک همزن چرخشی بگذارید.
کالیبراتورها آماده استفاده هستند و غلظت کورتیزول زیر را دارند:
کالیبراتور | ng/mL |
C0 | ۰ |
C1 | ۰.۵ |
C2 | ۱ |
C3 | ۵ |
C4 | ۱۰ |
C5 | ۲۰ |
C6 | ۱۰۰ |
پس از باز شدن، کالیبراتورها به مدت شش ماه در دمای ۲-۸ درجه سانتیگراد پایدار هستند.
برای واحدهای SI: ng/mL x 2,76 = nmol/L
۲. تهیه کونژوگه رقیق شده
۱۰ لیتر کونژوگه (معرف ۳) را به ۱ میلی لیتر بافر انکوباسیون (معرف ۲) اضافه کنید.
به آرامی مخلوط کنید. به مدت ۳ ساعت در دمای اتاق (۲۲-۲۸ درجه سانتیگراد) پایدار است.
۳.تهیه محلول شستشو
قبل از استفاده، محتویات هر ویال “محلول شستشوی Conc. 10X” را با آب مقطر تا حجم نهایی ۵۰۰ میلی لیتر رقیق کنید. برای حجم های کوچکتر، نسبت رقت ۱:۱۰ را رعایت کنید. محلول شستشو رقیق شده به مدت ۳۰ روز در دمای ۸-۲ درجه سانتی گراد پایدار است.
در محلول شستشو غلیظ امکان مشاهده وجود کریستال وجود دارد. در این حالت در دمای اتاق تا حل شدن کامل کریستال ها مخلوط کنید. برای دقت بیشتر، کل بطری محلول شستشوی غلیظ را تا ۵۰۰ میلی لیتر رقیق کنید، مراقب باشید که کریستال ها به طور کامل منتقل شوند، سپس مخلوط کنید تا کریستال ها کاملا حل شوند.
۴. آماده سازی نمونه و کنترل ها
تعیین کورتیزول باید در بزاق انجام شود.
توصیه می شود نمونه های بزاق را با یک لوله شیشه ای سانتریفیوژ و یک نی پلاستیکی، با دستگاه جمع آوری بزاق Dia.Metra یا با “Salivette” جمع آوری کنید. سایر دستگاه های جمع آوری نمونه تجاری موجود آزمایش نشده اند. کنترل ها آماده استفاده هستند.
۵. روش و محدودیت ها
نمونه های بزاق را در زمان های مشخص شده جمع آوری کنید.
اگر دستورالعمل خاصی داده نشده باشد، نمونه بزاق ممکن است در هر زمانی جمع آوری شود. با این حال باید به موارد زیر توجه کرد:
- الف) اگر بزاق در صبح جمع آوری می شود، اطمینان حاصل کنید که این کار قبل از مسواک زدن انجام می شود.
- ب) در طول روز ۱ ساعت بعد از غذا، مصرف خوراکی داروهای دارویی یا تمیز کردن دندان زمان بگذارید.
- ج) دریافت یک نمونه شفاف خوب بسیار مهم است – یعنی عدم آلودگی با غذا، رژلب، خون (خونریزی لثه) یا سایر مواد خارجی از این قبیل.
دستورالعمل های پردازش بزاق با دستگاه جمع آوری بزاق Dia.Metra
- اجازه دهید بزاق از طریق نی به داخل لوله شیشه ای سانتریفیوژ جریان یابد.
- نمونه را به مدت ۱۵ دقیقه با دور ۳۰۰۰ سانتریفیوژ کنید
- حداقل ۱ ساعت در دمای ۲۰- درجه سانتیگراد نگهداری شود
- دوباره به مدت ۱۵ دقیقه با دور ۳۰۰۰ سانتریفیوژ کنید
- نمونه بزاق اکنون آماده آزمایش است.
- نمونه را در دمای ۲-۸ درجه سانتیگراد به مدت یک هفته یا در دمای ۲۰- درجه سانتیگراد برای مدت طولانی تری نگهداری کنید.
دستورالعمل های پردازش بزاق با Salivette Sardstedt
- سواب را از Salivette خارج کنید
- جویدن آرام سواب به مدت ۱ دقیقه مقدار کافی بزاق تولید می کند.
- سواب را داخل Salivette قرار دهید و با استفاده از درپوش لوله را محکم ببندید.
- سالیوت را به مدت ۲ دقیقه در ۱۰۰۰ گرم (rcf) برای تولید بزاق سانتریفیوژ کنید.
- سواب کامل ر از ظرف سانتریفیوژ خارج کرده و دور بیندازید. بزاق شفاف اکنون برای تجزیه و تحلیل آماده است (حداقل ۱ میلی لیتر بزاق باید با این روش بازیابی شود).
هنگام کار با کیت رعایت کنید!
اجازه دهید همه معرف ها به دمای اتاق (۲۲-۲۸ درجه سانتیگراد) برسند. در پایان تست بزاقی الایزا، معرف ها را فوراً در دمای ۲-۸ درجه سانتیگراد نگهداری کنید: از قرار گرفتن طولانی مدت در دمای اتاق خودداری کنید.
نوارهای ریز چاهک روکش دار استفاده نشده باید به طور ایمن در کیسه فویل حاوی ماده خشک کن رها شده و در دمای ۲-۸ درجه سانتیگراد نگهداری شود.
برای جلوگیری از آلودگی میکروبی و/یا شیمیایی احتمالی، معرف های استفاده نشده هرگز نباید به داخل ویال های اصلی منتقل شوند.
از آنجایی که برای بهبود دقت نتایج آزمایش لازم است تعیین در دو نسخه انجام شود، برای هر نقطه از منحنی کالیبراسیون (C0-C6)، دو چاه برای هر کنترل، دو چاه برای هر نمونه، یک چاه برای Blank آماده کنید.
Reagent | Calibrator | Sample / Control | Blank |
Calibrator C0-C6 | ۲۵ µL | ||
Sample / Control | ۲۵ µL | ||
Diluted Conjugate | ۲۰۰ µL | ۲۰۰ µL | |
به مدت ۱ ساعت در دمای ۳۷ درجه سانتیگراد انکوبه کنید. محتویات هر چاهک را بردارید. چاهک ها را ۳ بار با ۳۰۰ میکرولیتر محلول شستشو رقیق شده بشویید. نکته مهم: در هر مرحله شستشو، بشقاب را به آرامی به مدت ۵ ثانیه تکان دهید و محلول اضافی را با ضربه زدن به صفحه معکوس بر روی یک دستمال کاغذی جاذب بردارید. شستشوی اتوماتیک: در صورت استفاده از واشر اتوماتیک، توصیه می شود ۶ مرحله شستشو را انجام دهید. | |||
TMB Substrate | ۱۰۰ µL | ۱۰۰ µL | ۱۰۰ µL |
در دمای اتاق (۲۲-۲۸ درجه سانتیگراد) به (مدت ۱۵ دقیقه) در تاریکی انکوبه کنید. | |||
Stop Solution | ۱۰۰ µL | ۱۰۰ µL | ۱۰۰ µL |
میکروپلیت را به آرامی تکان دهید. جذب (E) را در ۴۵۰ نانومتر در برابر طول موج مرجع ۶۲۰-۶۳۰ نانومتر یا در برابر Blank در عرض ۵ دقیقه بخوانید. | |||
کنترل کیفیت
هر آزمایشگاه باید کنترل‌ها را در محدوده سطوح نرمال، بالا و پایین هورمون کورتیزول برای نظارت بر عملکرد سنجش ارزیابی کند. این کنترل‌ها باید به‌عنوان مجهول‌ها و مقادیر تعیین‌شده در هر روش آزمایشی در نظر گرفته شوند. نمودارهای کنترل کیفیت باید برای پیگیری عملکرد معرف های عرضه شده نگهداری شوند. برای تعیین روندها باید از روش های آماری مرتبط استفاده شود. آزمایشگاه منفرد باید محدودیت های قابل قبولی برای عملکرد سنجش تعیین کند.
پارامترهای دیگری که باید پایش شوند عبارتند از ۸۰، ۵۰ و ۲۰ درصد قطع منحنی کالیبراسیون برای تکرارپذیری اجرا به اجرا. علاوه بر این، حداکثر جذب باید با تجربه گذشته سازگار باشد. انحراف قابل توجه از عملکرد ثابت می تواند نشان دهنده تغییر نامحسوس در شرایط آزمایشی یا تخریب واکنشگرهای کیت کورتیزول Saliva ELISA باشد. برای تعیین دلیل تغییرات باید از معرف های تازه استفاده شود.
نتایج
جذب متوسط
میانگین جذب (Em) را برای هر نقطه از منحنی کالیبراسیون (C0-C6) و هر نمونه محاسبه کنید.
منحنی کالیبراسیون
مقدار متوسط (Em) جذب کالیبراتورها (C0-C6) را در برابر غلظت رسم کنید. منحنی مناسب را از طریق نقاط رسم شده رسم کنید. (es: چهار پارامتر لجستیک).
محاسبه نتایج
مقادیر نمونه ها را در منحنی کالیبراسیون درون یابی کنید تا مقادیر متناظر غلظت بیان شده بر حسب ng/mL را بدست آورید.
ارزش های مرجع
مقادیر زیر را می توان به عنوان راهنمای اولیه استفاده کرد تا زمانی که هر آزمایشگاه محدوده نرمال خود را ایجاد کند.
- صبح. ۳ – ۱۰ نانوگرم در میلی لیتر
- بعد از ظهر. ۰.۶ – ۲.۵ نانوگرم در میلی لیتر
لطفاً به این واقعیت توجه کنید که تعیین طیفی از مقادیر مورد انتظار برای یک جمعیت “عادی” در یک روش معین به عوامل بسیاری مانند ویژگی و حساسیت روش مورد استفاده و نوع جمعیت مورد بررسی بستگی دارد. بنابراین، هر آزمایشگاه باید محدوده ارائه شده توسط سازنده را به عنوان یک نشانه کلی در نظر بگیرد و محدوده خود را از مقادیر مورد انتظار بر اساس جمعیت بومی محل کار آزمایشگاه تولید کند.
عملکرد و خصوصیات
حساسیت
کمترین غلظت قابل تشخیص کورتیزول که می تواند از کالیبراتور ۰ متمایز شود ۰.۱۲ نانوگرم در میلی لیتر در حد اطمینان ۹۵٪ است.
اختصاصیت
واکنش متقاطع آنتی بادی که بر اساس آبراهام ۵۰% محاسبه شده است در جدول نشان داده شده است
Cortisol | ۱۰۰ % |
Prednisolone | ۴۶.۲ % |
۱۱-Deoxycortisol | ۴ % |
Cortisone | ۳.۶۹ % |
Prednisone | ۳.۱۰ % |
۱۱aOH Progesterone | ۱ % |
Progesterone | < 0.1 % |
Aldosterone | < 0.1 % |
Pregnenolone | < 0.1 % |
اگر علاقه مند هستید با سایر کیت های کورتیزول آشنا شوید بر روی برچسب «آزمایش هورمون کورتیزول» کلیک کنید. برندهای مختلفی کیت کورتیزول را تولید می کنند.
جهت تست بزاقی الایزا می توانید از کیت کورتیزول بزاق دیامترا استفاده نمایید.
تستا عرضه کننده انواع کیت های آزمایشگاهی و کیت کورتیزول Saliva ELISA
Australian Pituitary foundation (A Guide to Cushing’s Disease), Australian Addison's Disease Association (Addison’s Disease & Adrenal Insufficiency), Hormones Australia (Adrenal gland), Hormones Australia (Pituitary gland), Royal Children’s Hospital Melbourne (Corticosteroid medicine)
Learn more here about the development and quality assurance of healthdirect content.
Lab Tests Online. Cortisol (https://labtestsonline.org/tests/cortisol). Accessed 12/10/2021.
MedlinePlus. Cortisol Test (https://medlineplus.gov/lab-tests/cortisol-test/). Accessed 12/10/2021.
Thau L, Gandhi J, Sharma S. Physiology, Cortisol (https://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK538239/). In: StatPearls [Internet]. Treasure Island, FL: StatPearls Publishing; 2021. Accessed 12/10/2021.
Saliva ELISA: a method for the diagnosis of chronic Chagas disease in endemic areas - PubMed (nih.gov)
الایزا
کیت های بیوشیمی
کیت های مولکولی و سایر
کیت های دامپزشکی
کیت های زیبایی
تجهیزات آزمایشگاهی
کیت های تشخیص سریع
مصرفی
محمدطاها –
آیا سطح کورتیزول در ساعات مختلف شبانه روز متفاوت است؟ چه زمانی بیشتر است؟
testa_admin –
سلام
سطح کورتیزول در خون در طول روز متفاوت است، اما به طور کلی در صبح زمانی که از خواب بیدار می شویم بالاترین سطح خود را دارد و سپس در طول روز کاهش می یابد. این ریتم روزانه نامیده می شود.
در افرادی که در شب کار می کنند، این الگو معکوس است، بنابراین زمان انتشار کورتیزول به وضوح با الگوهای فعالیت روزانه مرتبط است.
تستا – شرکت توسعه سلامت توان آفرین