Description
معرفی تست دئوکسی ریبونوکلئاز DNase
DNAse Test Agar (Deoxyribonuclease Activity)
فهرست مطالب
خرید محیط کشت DNAse Agar کندالب
کاربرد: برای تشخیص فعالیت دئوکسی ریبونوکلئاز برای کمک به شناسایی جداسازی باکتری از نمونه های بالینی.
تستا عرضه کننده لوازم مصرفی بهداشتی و آزمایشگاهی و تست دئوکسی ریبونوکلئاز DNase.
برند: کندالب CONDALAB
نوع محتویات: پودر
وزن: ۵۰۰ گرم
قیمت : ۳۸۰,۰۰۰ تومان
تست دئوکسی ریبونوکلئاز DNase (محیط کشت DNAse Agar کندالب) را با برند اسپانیایی CONDALAB از شرکت توسعه سلامت توان آفرین (تستا) تهیه نمایید.
بررسی اجمالی
تست دئوکسی ریبونوکلئاز (DNase) برای تعیین توانایی ارگانیسم در هیدرولیز DNA و استفاده از آن به عنوان منبع کربن و انرژی برای رشد استفاده می شود. عمدتاً برای افتراق استافیلوکوکوس اورئوس از سایر استافیلوکوک ها استفاده می شود.
DNase ها آنزیم هایی هستند که DNA را هیدرولیز کرده و نوکلئوتیدها و فسفات آزاد آزاد می کنند. DNaseهای تولید شده توسط باکتری، اندونوکلئازهای خارج سلولی هستند که DNA را می شکافند و غلظت بالایی از الیگونوکلئوتیدها را تولید می کنند.
برای تشخیص این آنزیم‌ها از رسانه‌های مختلفی استفاده می‌شود، برخی از هیچ نشانگر استفاده نمی‌کنند (نیاز به افزودن معرف HCl است) و برخی دیگر از شاخص‌های مختلفی (تولویدین بلو O یا متیل سبز) استفاده می‌کنند.
اصول و کاربردها
آزمایش DNAse آگار (دئوکسی ریبونوکلئاز) برای تمایز میکروارگانیسم ها با استفاده از همبستگی بین فعالیت کواگولاز مثبت و DNase استفاده می شود.
این محیط دیفرانسیل به ویژه برای شناسایی استافیلوکوک های بیماری زا توصیه می شود.
پپتون کازئین و پپتون سویا نیتروژن، ویتامین ها، مواد معدنی و اسیدهای آمینه ضروری برای رشد را تامین می کنند. منابع کلرید سدیم ضروری است.
الکترولیت برای حمل و نقل و تعادل اسمزی. اسید دئوکسی ریبونوکلئیک تشخیص DNase که DNA را پلیمریزه می کند را امکان پذیر می کند. آگار باکتریولوژیک عامل انجماد است.
آگار برای آزمایش DNase
آگار DNase بدون نشانگر:
فرمول اولیه توسط جفریس طراحی شد که DNA را در آگار تریپتیکاز سویا گنجانده بود. این محیط به افزودن اسید (HCl) برای شناسایی DNA پلیمریزه شده نیاز داشت.
g/L | Ingredients | g/L | Ingredients |
۵,۰ g | Papaic Digest of Soybean Meal | ۱۵,۰ g | Pancreatic Digest of Casein |
۲,۰ g | Deoxyribonucleic Acid | ۵,۰ g | Sodium Chloride |
۷.۳ ± ۰.۲ | pH | ۱۵,0g | Agar |
تست دئوکسی ریبونوکلئاز DNase
روش: هیدرولیز DNA با پاکسازی آگار پس از افزودن HCl مشاهده شد (الیگونوکلئوتیدها در اسید حل می شوند، اما نمک های DNA نامحلول هستند).
DNase آگار با متیل گرین
توصیف شده توسط P.B. SMITH، ادغام رنگ متیل گرین در محیط آگار حاوی اسید دئوکسی ریبونوکلئیک، محیط بهبود یافته ای را برای تشخیص باکتری های مولد دئوکسی ریبونوکلئاز می دهد. استفاده از رنگ، استفاده از اسید را برای نشان دادن فعالیت دئوکسی ریبونوکلئاز غیرضروری می کند، بنابراین امکان خرده کشت یا انکوباسیون مجدد کلنی ها را فراهم می کند.
متیل گرین : ۰,۰۵ گرم
روش: رنگ سبز متیل می تواند به DNA پلیمریزه شده متصل شود تا یک کمپلکس سبز پایدار در pH 7.3 تشکیل دهد. عمل DNase ساختار DNA را پلیمریزه می‌کند و متیل گرین آزاد می‌کند، متیل سبز آزاد به‌طور خود به خود در pH 7.3 رنگ‌زدایی می‌کند و در نتیجه هاله‌های بی‌رنگ در اطراف کلنی‌های DNase مثبت ایجاد می‌شود.
DNase آگار با تولویدین بلو
توصیف شده توسط Schreier، در اصل برای تمایز آسان و سریع S. marcescens از سایر اعضای بخش KES طراحی شده است: Klebsiella، Enterobacter، Serratia.
تولویدین آبی: ۰,۱ گرم
روش: هنگامی که تولویدین آبی O (TBO) اضافه می شود، یک کمپلکس با DNA تشکیل می شود که با هیدرولیز DNA ساختار آن تغییر می کند و در نتیجه رنگ صورتی روشن ایجاد می شود.
فرمول به کار رفته در این محصول:
Formula in g/L | |||
۵,۰ g | Sodium chloride | ۱۵,۰ g | Bacteriological agar |
۵,۰ g | Soy peptone | ۱۵,۰ g | Casein peptone |
۲,۰ g | Deoxyribonucleic acid | ||
تست دئوکسی ریبونوکلئاز DNase
آماده سازی محیط
۴۲ گرم از محیط را در یک لیتر آب مقطر معلق کنید. خوب مخلوط کنید و با حرارت دادن با هم زدن مکرر حل کنید. یک دقیقه بجوشانید تا کاملا حل شود. در اتوکلاو با دمای ۱۲۱ درجه سانتیگراد به مدت ۱۵ دقیقه استریل کنید. تا دمای ۵۰-۴۵ درجه سانتیگراد خنک کنید، خوب مخلوط کنید و در پلیت ها بریزید.
دستورالعمل استفاده
روش استفاده و دستورالعمل به کارگیری محیط کشت DNAse Agar کندالب به شرح زیر است:
- برای تشخیص بالینی، نوع نمونه، کلنی های جدا شده از هر نمونه بالینی است.
- نمونه مورد تجزیه و تحلیل را با یک حلقه بذر دهی ۱۰ میکرولیتری روی سطح آگار تلقیح کنید. ۴ تا ۵ نمونه مختلف را می توان به طور همزمان در یک صفحه تلقیح کرد. یک خط در مرکز جعبه ایجاد می‌کنید (اگر از ۲ گونه استافیلوکوک استفاده می‌کنید، می‌توانید جعبه را از وسط تقسیم کنید و هر موجود زنده را از یک طرف پایین بیاورید).
- به مدت ۲۴-۱۸ ساعت در دمای ۲±۳۵ درجه سانتیگراد انکوبه شود.
- پس از رشد رضایت بخش، یک قطره HCl 1N یا چند قطره محلول تولویدین بلو ۰.۱% اضافه کنید. در برخی از سویه ها، لازم است غلظت HCl به ۲N افزایش یابد تا واکنش مثبت خوبی حاصل شود.
- پس از انکوباسیون: اگر محیط DNase حاوی نشانگر رنگی نباشد: ظرف را با اسید کلریدریک ۱N پر کنید و بگذارید ظرف چند دقیقه بماند تا معرف جذب شود. اسید کلریدریک اضافی را تخلیه کنید، سپس جعبه را در عرض ۵ دقیقه در پس زمینه تیره بررسی کنید.
- در حضور HCl رقیق، DNA محیط پلیمریزه شده و یک رسوب مات تشکیل می دهد. کلنی های میکروارگانیسم هایی که قادر به سنتز دئوکسی ریبونوکلئازها هستند به نظر می رسد توسط یک ناحیه شفاف یا هاله احاطه شده اند که حاوی بخش هایی از نوکلئوتیدهای محلول ناشی از تجزیه DNA هستند که توسط HCl رسوب نمی کنند. در صورت تمایل، ۰.۱% تولویدین آبی را به جای HCl اضافه کنید.
نتایج در حضور HCl:
- DNase (+): ناحیه شفاف در اطراف ناحیه رشد.
- DNase (-): عدم وجود ناحیه شفاف در اطراف ناحیه رشد.
نتایج در حضور تولویدین آبی:
- DNase (+): هاله صورتی در اطراف ناحیه رشد. بقیه بشقاب آبی باقی می ماند.
- DNase (-): عدم وجود هاله صورتی در اطراف ناحیه رشد.
کنترل کیفیت محیط کشت DNAse Agar کندالب
pH (25ºC) | رنگ محیط آماده شده | رنگ محیط کم آب شده | ظاهر | انحلال پذیری |
۷,۳±۰,۲ | کهربایی | بژ | پودر ریز | w/o rests |
تست دئوکسی ریبونوکلئاز DNase
شرایط نگهداری محیط کشت DNAse Agar کندالب
در دمای ۲-۲۵ درجه سانتیگراد نگهداری شود.
ویدیو معرفی محیط کشت DNAse Agar
مدت: ۱ دقیقه و ۴۰ ثانیه وضوح (رزولوشن): ۶۴۰*۳۶۰ زبان: زبان اصلی (انگلیسی)
منبع از سایت ویمئو قابل مشاهده می باشد و برای این کار نیاز به ابزار عبور از تحریم دارد.
آزمایش DNA آگار به عنوان یک آزمایش بیوشیمیایی و میکروبیولوژی تشخیصی استفاده می شود.
این نوع محیط کشت به عنوان یک محیط افتراقی است که برای تشخیص فعالیت دئوکسی ریبونوکلئاز استفاده می شود.
برای این کار لازم است، از یک کلنی جدا شده از نمونه استفاده نمایید و در ادامه آزمایش بر روی محیط کشت آگار تلقیح را انجام دهید.
در ویدیو فوق انجام آزمایش با لوازم دستی نمایش داده می شود. تصویر زیر از ویدیو ابزار مورد نیاز مشاهده می گردد.
نتایج آزمایش DNA آگار (DNase) در تصویر زیر قابل مشاهده است. این تصویر از ویدیو فوق برداشت شده است.
سمت راست: محیط کشت با حاله ای شفاف نشانگر نتیجه مثبت است.
سمت چپ: محیط کشت بدون تغییر نشانگر نتیجه منفی است.
با ثبت سفارش آنلاین تست دئوکسی ریبونوکلئاز DNase با برند اسپانیایی CONDALAB در تستا شاپ، این محصولات را با بهترین کیفیت خرید نمایید.
شرکت توسعه سلامت توان آفرین (تستا) در خدمت سلامت جامعه
- C D JEFFRIES- Rapid method for determining the activity of microorganisms on nucleic acids
- B. Smith - Improved Medium for Detecting Deoxyribonuclease-Producing Bacteria
- Schreier - Modification of Deoxyribonuclease Test Medium for Rapid Identification of Serratia marcescens
- TEXtBOOK Diagnostic Microbiology 4ed
- DALYANN - DNase TEST AGAR
- F.P. Pimenta - DNase test as a novel approach for the routine screening of Corynebacterium diphtheriae
- BD - DNase Test Agar
- BIOLOGY libretexts - Deoxyribonuclease (DNAse) Test
- T J Beveridge - Mechanism of gram variability in select bacteria
- CDC - DNase Test
- laboratoryinfo - Deoxyribonuclease (DNase) Test – Principle, Procedure, Uses, Result Interpretation
الایزا
کیت های بیوشیمی
کیت های مولکولی و سایر
کیت های دامپزشکی
کیت های زیبایی
تجهیزات آزمایشگاهی
کیت های تشخیص سریع
مصرفی
jame –
My partner and I stumbled upon this different web address and decided to check it out. Nice post, I found it both new and challenging.
Shanita Kalista –
Hi there, are you genuinely visiting this site on a regular basis? If so, then you will definitely gain fast idious knowledge.