محیط کشت ای سی آگار ایبرسکو

محیط کشت آگار ای‌سی (All Culture Agar)

محیط کشت ای سی آگار AC Agar که از نام کامل آن “All Culture Agar” گرفته شده است، یک محیط غنی و چندمنظوره است که برای حمایت از رشد اولیه و پربار طیف بسیار گسترده‌ای از میکروارگانیسم‌ها از جمله هوازی‌ها، بی‌هوازی‌های اجباری و میکروآئروفیل‌ها فرموله شده است. فرمولاسیون قدرتمند این محیط حاوی منابع متعدد کربن و نیتروژن شامل پروتئوز پپتون، عصاره مخمر، عصاره گوشت و عصاره مالت است که مجموعه کاملی از اسیدهای آمینه، پپتیدها، ویتامین‌ها و فاکتورهای رشد را فراهم می‌کنند. دکستروز (گلوکز) به عنوان منبع کربوهیدرات قابل تخمیر و انرژی سریع عمل می‌کند. یک ویژگی منحصر‌به‌فرد این محیط، حضور اسید آسکوربیک (ویتامین C) است که نه‌تنها به عنوان یک آنتی‌اکسیدان و عامل کاهنده ملایم عمل می‌کند، بلکه به بهبود شفافیت محیط نیز کمک می‌نماید. برخلاف برخی محیط‌های حاوی تیوگلیکولات سدیم که ممکن است برای برخی ارگانیسم‌ها سمی باشند، AC Agar این سمیت را نشان نمی‌دهد و گزینه‌ای ایمن‌تر برای کشت ارگانیسم‌های حساس است. این محیط به دلیل داشتن مقدار کم آگار (۱ گرم در لیتر)، به صورت نیمه‌جامد تهیه می‌شود که این ویژگی برای تست تحرک و ایجاد شرایط میکروآئروفیلیک ایده‌آل است.

کاربرد اصلی این محیط در تست‌های استریلیتی برای محلول‌ها، مواد بیولوژیک و محصولاتی است که حاوی مواد نگهدارنده جیوه‌ای (مانند تیومرسال) نیستند. همچنین به عنوان یک محیط غنی‌سازی عمومی برای کشت نمونه‌های بالینی، دارویی، غذایی و محیطی و نیز برای کشت باکتری‌های پاتوژن و ساپروفیت مختلف استفاده می‌شود. این محیط رشد عالی برای ارگانیسم‌هایی مانند استافیلوکوکوس اورئوس، اشریشیا کلی، استرپتوکوکوس پیوژنز و کلستریدیوم پرفرینجنس (در شرایط بی‌هوازی) را پشتیبانی می‌کند.

مشخصات کلیدی محیط کشت ای سی آگار

• نوع محیط: جامد (آگار)، نیمه‌جامد، بسیار غنی، غیرانتخابی، برای کشت عمومی و تست استریلیتی.
• هدف کشت: کشت و تکثیر طیف وسیعی از میکروارگانیسم‌های هوازی، بی‌هوازی و میکروآئروفیل؛ مناسب برای تست‌های استریلیتی.
• حالت فیزیکی: پودر کرم‌رنگ تا زرد، همگن و روان. تهیه شده در آب مقطر، حرارت داده شده تا حل شود و سپس اتوکلاو می‌شود.
• ترکیبات کلیدی (گرم/لیتر): پروتئوز پپتون (۲۰٫۰)، عصاره گوشت (۳٫۰)، عصاره مخمر (۳٫۰)، عصاره مالت (۳٫۰)، دکستروز/گلوکز (۵٫۰)، اسید آسکوربیک (۰٫۲)، آگار (۱٫۰).
• مشخصات فیزیکی: ژل نیمه‌جامد؛ محیط آماده کهربایی روشن تا متوسط، شفاف تا کمی اوپالسانس؛ pH نهایی ۷٫۲ ± ۰٫۲ در دمای ۲۵ درجه سانتی‌گراد.
• مکانیسم عمل: فراهم آوری یک بستر مغذی کامل و متعادل با پتانسیل اکسیداسیون-احیا کاهش‌یافته برای رشد همزمان میکروارگانیسم‌های هوازی و بی‌هوازی.
• شرایط کشت و انکوباسیون: پس از اتوکلاو (۱۲۱ درجه سانتی‌گراد به مدت ۱۵ دقیقه) در لوله‌ها یا بطری‌ها توزیع می‌شود. انکوباسیون معمولاً در ۳۵ تا ۳۷ درجه سانتی‌گراد به مدت ۱۸ تا ۲۴ ساعت (برای بی‌هوازی‌ها در شرایط بی‌هوازی) انجام می‌شود.
• خوانش نتیجه: رشد مثبت: مشاهده کدورت، رشد منتشر در محیط نیمه‌جامد یا تشکیل کلونی. رشد منفی: عدم تغییر در محیط.
• کنترل کیفیت: رشد خوب تا عالی با سویه‌های استاندارد از جمله Staphylococcus aureus، Escherichia coli، Streptococcus pyogenes و Clostridium perfringens (در شرایط بی‌هوازی).
• کاربرد اصلی: محیط استاندارد کشت و تست استریلیتی برای مواد بیولوژیک و محلول‌های غیرحاوی نگهدارنده‌های جیوه‌ای، کشت ارگانیسم‌های هوازی و بی‌هوازی، و به عنوان جایگزینی غیرسمی برای محیط‌های حاوی تیوگلیکولات.

نکات کاربردی و نگهداری

پودر محیط کشت ای سی آگار AC Agar محصول ایبرسکو (IBRESco) باید در جای خشک و خنک و دور از رطوبت و منابع حرارتی نگهداری شود. پودر بسیار مرطوب‌کننده است؛ پس از هر بار برداشتن پودر، درب ظرف باید محکم بسته شود تا از کلوخه شدن آن جلوگیری گردد. برای تهیه محیط، مقدار ۳۵٫۲ گرم پودر را در یک لیتر آب مقطر یا دیونیزه حل کرده و با حرارت ملایم و همزدن مداوم به جوش آورید تا کاملاً حل شود. سپس در لوله‌ها یا بطری‌های مناسب توزیع کرده و اتوکلاو نمایید. اگر محیط در همان روز استفاده نشود، توصیه می‌شود برای خارج کردن گازهای محلول، قبل از مصرف آن را به مدت کوتاهی در بن‌ماری جوشانده یا در اتوکلاو حرارت داده و سپس بدون تکان دادن سریع سرد کنید. این کار پتانسیل اکسیداسیون-احیا محیط را کاهش داده و شرایط را برای رشد بی‌هوازی‌ها مساعدتر می‌کند. از آنجایی که این محیط غیرانتخابی است، برای جلوگیری از آلودگی، رعایت دقیق اصول استریل در تمام مراحل ضروری است. توجه: این محیط برای محصولات حاوی نگهدارنده‌های جیوه‌ای (مانند تیومرسال) مناسب نیست.