آزمایش ویتامین ث - کیت ویتامین C - تست اسید اسکوربیک

کیت ویتامین C - آزمایش ویتامین ث - تست اسید اسکوربیک

بزرگنمایی تصویر

کیت ویتامین C | تست اسید اسکوربیک | آزمایش ویتامین ث

Name: کیت ویتامین C | تست اسید اسکوربیک | آزمایش ویتامین ث - تستا
Brand: kiazist
SKU: VC-K-100
Price: 98000000 IRR
Availability: InStock

980,000 تومان

برای اندازه گیری و آزمایش ویتامین ث در سرم، پلاسما، انواع بافت و … از تست اسید اسکوربیک استفاده می گردد.

تستا عرضه کننده کیت ویتامین C با برند کیازیست.

SKU VC-K-100 دسته ها کیازیست, پنل سایر تست ها برچسب ویتامین C

آزمایش ویتامین ث

معرفی کیت ویتامین C (تست اسید اسکوربیک)

Fibrinogen kit

فروش و قیمت کیت آزمایش ویتامین ث

کاربرد: برای تشخیص و تعیین کمیت فعالیت اسید اسکوربیک در سرم، پلاسما، بافت حیوانی/گیاهی و سایر مایعات بیولوژیکی به روش کالریمتری با بافر لیزکننده ویژه.

تستا عرضه کننده کیت های آزمایشگاهی و کیت های تشخیص سریع و انواع کیت الایزا

برند: کیازیست

محتویات: Vitamin C Standard(پودر)، Oxidizing Agent، Lysis Buffer، Develop Agent، Chromogen، 96-well Photometric ،Plate، Protocol Booklet

قیمت : 980000 تومان

شرکت توسعه سلامت توان آفرین (تستا)، کیت ویتامین C را معرفی و عرضه می نماید.

برای خرید کیت تست اسید اسکوربیک در تستا شاپ ثبت سفارش نمایید.

ویتامین C چیست؟

ویتامین (C) اسید اسکوربیک، (VC) یک دی اسید با ساختار انول است که یک لاکتون هتروسیکلیک پنج عضوی را در ارگانیسم تشکیل می دهد.

برای اندازه گیری و آزمایش ویتامین ث از تست اسید اسکوربیک استفاده می گردد. به پیشنهاد کارشناسان تستا، کیت ویتامین C کیازیست گزینه مناسبی برای این آزمایش است.

VC، به عنوان یک کوفاکتور آنزیمی برای چندین آنزیم، به عنوان یک دهنده الکترون برای مونواکسیژناز و دی‌اکسیژناز استفاده می‌شود. گیاهان و بیشتر حیوانات VC را از گلوکز سنتز می کنند، اما انسان ها و پستانداران غیر انسانی ظرفیت بیوسنتزی VC را به دلیل از دست دادن یک جهش عملکردی در آنزیم بیوسنتزی L-mannose-1،4- لاکتون اکسیداز از دست داده اند.

بارزترین فعالیت شیمیایی VC این است که Fe³⁺ را به Fe²⁺ کاهش می‌دهد، سپس جذب آهن را در روده تقویت می‌کند و باعث ذخیره و استفاده از آهن می‌شود. Fe³⁺ بلا فاصله با احیای اسید آسکوربیک واکنش نشان می دهد و Fe²⁺ را تشکیل می دهد، سپس Fe²⁺ با فنانترولین واکنش می دهد و واکنش ایجاد رنگ رخ می دهد. محتوای ویتامین C در پلاسما را می توان تعیین کرد. مقدار OD را اندازه گیری کنید و محتوای VC را به طور غیر مستقیم محاسبه کنید.

منابع غذایی حاوی ویتامین C

اسید ال اسکوربیک، یک آنتی اکسیدان و پاک کننده رادیکال های آزاد بوده که همه جا در میوه ها و سبزیجاتی مانند مرکبات (پرتقال، لیمو، لیمو ترش، نارنگی و غیره)، خربزه، گوجه فرنگی، فلفل، کلم بروکلی و … یافت می شود.

. با توجه به نقش اساسی در رژیم غذایی انسان، اسید ال اسکوربیک (E300) و مشتقات نمک (E301-303) معمولاً به عنوان افزودنی های غذایی استفاده می شوند، با مزیت اضافی خواص آنتی اکسیدانی و افزایش دهنده طعم آنها. در صنعت نوشیدنی، اسید ال اسکوربیک را می توان برای جلوگیری از اکسیداسیون برخی از نوشیدنی ها اضافه کرد.

کیت ویتامین C کیا زیست

در کیت ویتامین C کیا زیست ابتدا اکسیده شده سپس با کروموژن مخصوص واکنش داده تا در طول موج 530 نانومتر جذب داشته باشد. بافر لیز ویژه در کیت ویتامین C منجر به حفظ ویتامین C شده که برای ذخیره بلند مدت آن مناسب می باشد.

کاربرد کیت ویتامین C

برای تشخیص و تعیین کمیت فعالیت اسید اسکوربیک در سرم، پلاسما، بافت حیوانی/گیاهی و سایر مایعات بیولوژیکی به روش کالریمتری با بافر لیزکننده ویژه

موارد احتیاط و نکات ایمنی

برخی از معرف های کیت حاوی مواد خطرناکی هستند. باید از لمس پوست و لباس خودداری شود.
در صورت لمس در اثر بی احتیاطی فوراً با آب فراوان بشویید.
کلیه نمونه ها و مواد زائد باید بر اساس قوانین مربوط به ایمنی زیستی آزمایشگاه تصفیه شوند.
نمونه های تازه یا نمونه هایی که اخیراً به دست آمده اند برای جلوگیری از تخریب و غیر طبیعی شدن توصیه می شود که ممکن است منجر به نتایج اشتباه شود.
قبل از آزمایش ویتامین ث، لطفا دستورالعمل ها را به دقت بخوانید.
هنگام کار با کیت از دستکش و لباس کار استفاده نمایید.

اطلاعات کلی و محتویات

شرایط نگهداری و جابه جایی: کیت ویتامین C کیا زیست در دمای 4 درجه سانتی گراد نگهداری شود. حمل توسط یخ مرطوب انجام می شود.

محدوده دینامیک: 5-40 g/mLµ
حساسیت: g/mLµ 2

نوع نمونه

مایع رویی کشت سلولی، ادرار، سرم، پلاسما، عصاره های کشت سلولی، سایر مایعات بیولوژیکی، عصاره های بافتی، محیط کشت سلولی

مقدار نمونه پیشنهادی

نمونه	حداکثر	مطلوب
Cells	1.5×106	5×105 –1×106
Tissue	100 mg	50 mg
Plasma or Serum	200 uL	200 Ul
Plant	500 mg	50-500 mg

محتویات کیت ویتامین C کیا زیست

شماره	ماده	مفدار/ تعداد
1	Oxidizing Agent	1.5 میلی لیتر
2	Lysis Buffer	50 میلی لیتر
3	Develop Agent	10 میلی لیتر
4	Chromogen	2 میلی لیتر
5	Vitamin C Standard	پودر
6	96-well Photometric Plate	1 Pcs
7	Protocol Booklet	1 Pcs

موارد لازم که در کیت ویتامین C موجود نیست:

سرسمپلر و سمپلر در اندازه های مختلف
میکروتیوب 1.5 میلی لیتری
سولفوریک اسید (Sulfuric Acid)
آب دیونیزه یا مقطر
فور یا بن ماری با دمای 37 °C
شیکر (Shaker)
سانتریفیوژ دوربالا (15000)15000×g
دستگاه Plate Reader با طول موج 530-500 نانومتر
کیت اندازه گیری پروتئین برای نرمال سازی (انتخابی) – KBCA96 Kiazist
قبل از انجام تست کل پروتکل را بخوانید

آماده سازی نمونه

نمونه ها باید به روش های مرسوم تهیه شوند:

الزامات نمونه

نمونه ها نباید حاوی DTT، 2- مرکاپتواتانول و سایر معرف های احیا کننده باشند. HEDP، EDTA و سایر عوامل کیلیت نباید اضافه شوند.

آماده سازی نمونه سلول و بافت (حیوانی و گیاهی)

سلول: از Lysis Buffer به میزان 1 میلی لیتر روی سلول ها ریخته سپس آنها را با اسکراپر بتراشید.
بافت حیوانی: 100 میلی گرم از بافت حیوانی را در 500 میکرولیتر از Lysis Buffer کاملا هموژن کنید.

بافت گیاهی: 300 میلی گرم از بافت گیاهی را در 500 میکرولیتر از Lysis Buffer کاملا هموژن کنید.

در ادامه به مدت 10 دقیقه در 15000×G سانتریفیوژ کرده و سوپرناتانت را جمع آموری کنید. سپس در 400 میکرولیتر از آن را به یک میکروتیوب جدید انتقال داده و به آن 20 میکرولیتر سولفوریک اسید غلیظ اضافه کرده و خوب مخلوط کنید. سپس به مدت 10 دقیقه در 15000×G سانتریفیوژ کرده و سوپرناتانت را جمع آموری کنید. در این مرحله می توانید آن را در دمای -20 °C ذخیره کرده و یا مستقیم به مرحله آزمایش ببرید.

آماده سازی مایعات بیولوژیک (سرم، پلاسما و …….)

ابتدا 100 میکرولیتر از نمونه را با 100 میکرولیتر Lysis Buffer ترکیب کنید. در ادامه به آن 20 میکرولیتر سولفوریک اسید غلیظ اضافه کرده و خوب مخلوط کنید. سپس به مدت 10 دقیقه در 15000×G سانتریفیوژ کرده و سوپرناتانت را جمع آموری کنید. در این مرحله می توانید آن را در دمای -20 °Cذخیره کرده و یا مستقیم به مرحله آزمایش ببرید.

آماده سازی کیت و استاندارد

پس از آماده سازی نمونه موارد زیر را آماده کنید.
همه محلول ها در دمای اتاق گرم شوند.
تمامی تیوب ها اسپین شوند تا محتویات به ته ویال ها جمع شود.
تمامی محلول ها آماده به مصرف می باشند.
Develop Agent: این محلول به طور طبیعی رسوب می کند. قبل از استفاده تکان دهید. نیاز به حل شدن ندارد.
اسید سولفوریک 85%: 8.5 میلی لیتر از اسید سولفوریک غلیظ را با 1.5میلی لیتر آب دیونیزه مخلوط کنید.
آماده سازی استاندارد: به ویال استاندارد یک میلی لیتر از Lysis Buffer اضافه کرده و طبق جدول زیر استانداردها را بسازید. این ویال تا 1 ماه در دمای -20 ˚C قابل نگهداری می باشد.

شماره استاندارد	Lysis Buffer (µ)	استاندارد استوک (µ)	غلظت نهایی µg/mL
A	1000	0	0
B	995	5	5
C	990	10	10
D	980	20	20
E	960	40	40

نحوه انجام آزمایش ویتامین ث

جهت دقت آزمایش ویتامین ث و محاسبه Technical Replication توصیه می شود هر نمونه و یا استاندارد به صورت دوتایی انجام شود. نمونه ها در طول آزمایش بر روی یخ نگهداری شوند.

در یک تیوب جدید 200 میکرولیتر از نمونه آماده شده و استانداردها را با 12 میکرولیتر از Oxidizing Agent ترکیب کرده و در دمای اتاق به مدت 5 دقیقه انکوبه کنید

در ادامه 70 میکرولیتر از Develop Agent را با آن ترکیب کرده و خوب هم بزنید. سپس به مدت یک دقیقه در 15000×g سانتریفیوژ کنید

سپس 130 میکرولیتر از سوپرناتانت را برداشته و به پلیت 96 خانه اضافه کنید.

در ادامه به هر چاهک 20 میکرولیتر Chromogen اضافه کرده و پلیت را به آرامی تکان داده تا مخلوط شود. سپس روی پلیت را پوشانده و در دمای 37 درجه سانتیگراد به مدت 4 تا 5 ساعت انکوبه کنید.

در پایان این زمان، به هر چاهک 100 میکرولیتر اسید سولفوریک 85% اضافه کرده و به مدت 5دقیقه بر روی شیکر قرار دهید تا دانه های قرمز در هر چاهک حل شود.

در آخر جذب پلیت را در طیف 500 تا 540 نانومتر خوانش کنید.

نحوه محاسبه

ابتدا از چاهک های دوتایی میانگین بگیرید.

سپس جذب همه چاهک ها را از جذب استاندارد صفر (A) کم کنید.

در ادامه توسط جذب استانداردها منحنی استاندارد در برابر غلظت استانداردها را رسم کنید. (نرم افزار Excelیا Curve Expert).

سپس بر طبق فرمول زیر غلظت منحنی را حساب کنید:

Ascorbic Acid Concentration (µg/mL) = C × D × 2

C= غلظت محاسبه شده نمونه از روی منحنی استاندارد.

D= ضریب رقت نمونه.

2= ضریب رقت که فقط برای مایعات بیولوژیک اعمال می شود.

برای محاسبه خودکار از نرم افزار Curve expertنسخه Basic نیز می توانید محاسبه را انجام دهید.

نمونه استاندارد و تست

عیب یابی

مشکل	راه حل	دلیل
آزمایش کار نمیکنه!	به بخش آماده سازی کیت ویتامین C رجوع گردد	بافرها در دمای نامناسب می باشند
	پروتکل مصرف را مجدد مطالعه نمایید	مرحله ای از پروتکل جا افتاده است
	طول موج توصیه شده در پلیت را بخوانید	طول موج اشتباه
نتایج غیر قابل انتظار	طول موج توصیه شده در پلیت را بخوانید	طول موج اشتباه
	برای حذف پروتئین حتما از H2SO4 استفاده گردد	نمونه دارای ذرات نامحلول می باشد
	یا نمونه را رقیق نموده و یا با تهیه نمونه غلیظ انجام بدهید	جذب نمونه ها از خارج از طیف استاندارد می باشد
استاندارد خطی نیست	اطمینان از به دما رسیدن و یکدست شده مواد ( بافر ماسک گرم شود)	محتویات کیت به طور کامل به دمای ذکر شده نرسیده اند
	از کالیبره بودن و دقت سمپلر ها مطمئن گردید	خطای پیپت کردن
	بعلت پی پتاژ کردن زیاد این اتفاق رخ می دهد	وجود حباب در چاهک ها

جهت آزمایش ویتامین ث، استفاده از کیت ویتامین C با برند کیازیست توصیه می گردد.

تستا عرضه کننده انواع کیت های آزمایشگاهی و لوازم مصرفی آزمایشگاهی و تست اسید اسکوربیک

منابع

Loewus F A. Biosynthesis and metabolism of ascorbic acid in plants and of analogs of ascorbic acid in fungi. Phytochemistry, 1999, 52: 193–210. Vitamin C: Its Functions and Biochemistry in Animals and Plants - Google Books

Rumsey S C, Levine M. Absorption, transport, and disposition of ascorbic acid in humans. Journal of Nutritional Biochemistry, 1998, 9(3): 116–130. Encyclopedia of Dairy Sciences - Google Books
Loewus F A, Loewus M W, Seib P A. Biosynthesis and metabolism of ascorbic acid in plants. Critical Reviews in Plant Sciences, 1987, 5(1): 101- 119.
Du J, Cullen J J, Buettner G R. Ascorbic acid: chemistry, biology and the treatment of cancer. Biochimica et Biophysica Acta, 2012, 1826(2): 443-457.
Smirnoff N. Ascorbic acid metabolism and functions: A comparison of plants and mammals. Free Radical Biology & Medicine, 2018.
Vitamin C Standard(پودر)، Oxidizing Agent، Lysis Buffer، Develop Agent، Chromogen، 96-well Photometric ،Plate، Protocol Booklet

دیدگاهها

هیچ دیدگاهی برای این محصول نوشته نشده است.

اولین نفری باشید که دیدگاهی را ارسال می کنید برای “کیت ویتامین C | تست اسید اسکوربیک | آزمایش ویتامین ث”

تستــــــــــــــا

کیت ویتامین C | تست اسید اسکوربیک | آزمایش ویتامین ث

تستا عرضه کننده کیت ویتامین C با برند کیازیست.